自身免疫性甲狀腺疾病的分子免疫遺傳學(xué)研究——FcRL3、FcγRⅡB和PTPN22基因的交互作用.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開： 第一部分： 目的：了解自身免疫性甲狀腺疾病(AITD)患者臨床特征及免疫功能；分析并比較臨床特征，家族史和免疫學(xué)指標(biāo)在Graves病(GD)組和橋本甲狀腺炎(HT)組患者中的異同；探討免疫功能異常在自身免疫性甲狀腺疾病發(fā)病機制中的作用。 方法：選取重慶地區(qū)漢族人群中符合入選條件的研究對象，共納入1005名研究對象，其中AITD患者有702例，男202例，女500例。根據(jù)《內(nèi)科學(xué)》五年

2、制教材第6版診斷標(biāo)準，將所有研究對象分為正常對照(NC組，303例)，Grayes病(GD組，584例)和橋本甲狀腺炎(HT組118例)。對研究對象甲狀腺大小和眼征進行評估，并對甲狀腺功能、TRAb、TgAb和TPOAb等免疫學(xué)指標(biāo)進行測定。 結(jié)果：(1)GD和HT均有一定的遺傳傾向，其中GD組患者AITD家族史出現(xiàn)的頻率更高(23.4％vs14.4％，P＜0.05)。(2)與HT組比較，GD組患者發(fā)病年齡較為年輕(P＜0.05

3、)，其眼征和甲狀腺腫出現(xiàn)頻率更高(分別為：56.3％vs24.8％，P＜0.01；65.4％vs25.0％，P＜0.01)。(3)TRAb、TgAb和TPOAb是評價甲狀腺自身免疫功能異常的客觀指標(biāo)，GD和HT均存在免疫學(xué)功能異常，與GD組相比較，HT組患者TgAb和TPOAb陽性率(P＜0.05)及抗體滴度均明顯增高(P＜0.01)。(4)與HT組相比較，GD組患者FT3、FT4、TT4均明顯增高(P＜0.05)，uTSH明顯降低(P

4、＜0.01)。 結(jié)論：GD和HT均有一定的遺傳傾向，其中GD組患者AITD家族史出現(xiàn)的頻率更高。GD和HT均存在免疫學(xué)功能異常，HT組患者TgAb和TPOAb陽性率及抗體滴度均明顯增高。這提示遺傳易感和免疫功能異常均與AITD發(fā)病機制有關(guān)。 第二部分： 目的：研究蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型(PTPN22)基因單核苷酸多態(tài)性(SNP)與AITD(GD和HT)的關(guān)聯(lián)。 方法：采用PCR-RFLP方法，結(jié)合DNA

5、直接測序技術(shù)，在無親緣關(guān)系的216例正常人、279例GD患者和73例HT組患者中，對SNP數(shù)據(jù)庫報道的PTPN22基因外顯子14 SNP位點進行病例-對照研究，評估變異位點與AITD的關(guān)聯(lián)。 結(jié)果：(1)PTPN22基因1858位點A等位基因頻率在中國重慶地區(qū)漢族人群中極低，未檢出突變的純合子從基因型，A等位基因頻率與亞洲人群類似，與高加索人群差異較大。(2)GD和HT組PTPN22基因1858位點A等位基因頻率分別與對照組相比

6、，其差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(分別為：1.4％vs1.2％，χ2=0.137，p＞0.05；0.0％vs1.1％，χ2=2.903，p＞0.05)。經(jīng)非條件Logistic回歸校正年齡和性別因素后，AG基因型在GD和HT組的頻率與對照組相比，其差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(recessive模式分別為：OR=0.805，95％CI=0.256～2.533，p＞0.05；OR=0.435，95％CI=0.184～1.031，p＞0.05)。提示PTPN2

7、2基因1858位點A/G多態(tài)性與GD和均HT無關(guān)聯(lián)。 結(jié)論：PTPN22基因1858A等位基因在中國重慶地區(qū)漢族人群頻率極低，與亞洲人群類似，與高加索人群差異較大。PTPN22基因1858位點多態(tài)性與GD和HT均無關(guān)聯(lián)，可能與AITD的遺傳易感無關(guān)。 第三部分： 目的：研究FcγRⅡB基因外顯子4 SNP位點與AITD的關(guān)聯(lián)；探討PTPN22、FcRL3和FcγRⅡB基因多個SNPs位點之間的交互作用對AITD的

8、影響。 方法：選擇重慶地區(qū)206例正常對照、572例GD患者和83例HT組患者，對FcγRⅡB基因外顯子4 SNP位點進行病例-對照研究。采用PCR-RFLP方法結(jié)合DNA直接測序技術(shù)鑒定基因型。應(yīng)用多因素維度降低法(MDR)分析FcRL3、FcγRⅡB和PTPN22基因多個SNPs位點之間的交互作用。 結(jié)果：(1)在重慶地區(qū)漢族人群中僅存在極少TT基因型和較少T等位基因。(2)GD組和HT組患者T等位基因的頻率分別與對

9、照組相比，其差別均無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。經(jīng)非條件Logistic回歸校正年齡和性別因素后，分別采用共顯性(additive)、顯性(dominant)和隱性(recessive)模式分析，結(jié)果顯示該多態(tài)性位點基因型與GD和HT均無關(guān)聯(lián)(additive模式分別為：OR=0.852，95％CI=0.595～1.221，p＞0.05；OR=0.924，95％CI=0.501～0.704，p＞0.05)，提示該位點SNP可能與AITD

10、的遺傳易感無關(guān)。(3)FcγRⅡB基因在AITD的發(fā)生中與FcRL3和PTPN22基因均無交互作用。(4)FcRL3、FcγRⅡB和PTPN22基因5個SNPs位點間的交互作用與GD均無關(guān)聯(lián)，而FcRL3基因啟動子、外顯子2和4 SNPs位點間在HT發(fā)病中存在交互作用。 結(jié)論：FcγRⅡB外顯子4A/T多態(tài)性與GD和HT均無關(guān)聯(lián)，可能與AITD遺傳易感無關(guān)。該基因在AITD的發(fā)生中與FcRL3和PTPN22基因均無交互作用。Fc