小柴胡湯預處理對大鼠肝內膽管上皮I-R損傷保護作用的研究.pdf

1、目的：通過觀察中藥小柴胡湯預處理對肝臟缺血再灌注損傷大鼠肝內膽管上皮的病理變化、相關生化指標(Glu、GGT、ALP)及膽管上皮細胞凋亡指數(shù)(AI)的變化，探討在肝臟缺血再灌注損傷時肝內膽管損傷的機制及防護措施的理論依據；為肝膽手術特別是肝移植術后膽道并發(fā)癥的防治提供理論依據。 方法：采用大鼠原位肝缺血再灌注模型，膽總管插管連續(xù)引流膽汁。將48只Wistar雄性大鼠隨機分成4組：假手術組(S0組)、實驗組1(EM1組)、實驗組2

2、(EM2組)和小柴胡湯預處理組(XP組)；觀察在不同時限下(缺血30min，再灌注60min和缺血30min，再灌注120min)膽汁與血清中堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰轉移酶(GGT)的活性變化、膽汁中葡萄糖含量(Glu)變化、肝內膽管上皮細胞的病理形態(tài)和凋亡指數(shù)(AI)變化，以及中藥小柴胡湯灌胃預處理對此缺血再灌注損傷的影響。 結果： 1.缺血再灌注損傷導致膽汁中Glu含量、GGT、ALP活性顯著升高(P<0.0

3、1)；小柴胡湯預處理組(XP組)較實驗組2(EM2組)膽汁中Glu含量、GGT、ALP活性升高幅度均小，差異具有高度顯著性(P<0.01)；缺血30min，再灌注60min組(EM1組)與假手術組(S0組)大鼠血清中GGT、ALP活性無顯著性差異(P>0.05)；膽管上皮細胞的凋亡指數(shù)(AI)在缺血再灌后明顯升高，差異具有高度顯著性(P<0.01)： 2.膽汁中與血清中GGT、ALP活性升高不同步：從缺血再灌注前(S0組)，到缺

4、血灌注后60min(EM1組)，血清中GGT、ALP活性無顯著變化(P>0.05)，相比較而言，從缺血再灌注前(S0組)，到缺血再灌注后60min(EM1組)，膽汁中GGT、ALP活性升高較為顯著(P<0.01)；從缺血再灌注后60min到120min，膽汁中GGT、ALP活性無顯著變化(P>0.05)； 3.缺血再灌注損傷后的120min之內，膽汁中ALP與GGT活性、Glu含量以及發(fā)生凋亡的膽管上皮細胞數(shù)量能反映膽管損傷情況

5、，小柴胡湯預處理后能減輕膽管上皮細胞損傷：膽汁中Glu含量、膽汁GGT、ALP活性升高幅度降低，發(fā)生凋亡膽管上皮細胞數(shù)量也明顯減少。 4.各組標本行HE染色，光鏡下觀察：各組肝內膽管上皮細胞排列整齊，無明顯變形、脫落等改變；細胞基本形態(tài)完整，胞漿染色均勻，細胞核染色無明顯差異，也無明顯固縮變形。 結論：在缺血再灌后膽汁中的相關生化指標水平能夠反映肝內膽管上皮損傷情況；肝臟缺血再灌注損傷能促進肝內膽管上皮細胞凋亡的發(fā)生，小