乳腺癌轉移生物標志物及中藥干預作用的初步研究.pdf

1、乳腺癌是一種嚴重危害婦女身心健康的常見惡性腫瘤，已成為西方發(fā)達國家女性腫瘤發(fā)病率的首位，遠處轉移是乳腺癌患者死亡的最主要原因，通常晚期乳腺癌的五年生存率僅為20％，目前對乳腺癌轉移的治療一直沒有明顯的突破，故提高判斷乳腺癌復發(fā)轉移的準確性，早期防治乳腺癌轉移已經(jīng)成為當務之急，中藥以多靶點治療、全面干預、毒副作用相對少等優(yōu)勢在控制乳腺癌遠處轉移方面占有不可替代的地位。乳腺癌轉移標志物是評價腫瘤轉移潛力的重要依據(jù)，現(xiàn)有的傳統(tǒng)轉移標志物對判斷

2、乳腺癌預后的靈敏度和特異性還有待提高，有資料顯示依靠這些標志物對乳腺癌做出判斷后，仍有50％左右患者會出現(xiàn)復發(fā)及轉移。生物標志物具有檢測客觀、敏感性高等一直是腫瘤研究的熱點，目前對于乳腺癌轉移的特異性生物標志物還有待進一步研究，但腫瘤轉移過程大體分為粘附、降解、遷移和新生血管的形成4個階段，其中腫瘤細胞之間解粘附是轉移的第一個環(huán)節(jié)，被認為是轉移的早期事件。蛋白酶是轉移的主要靶標，細胞外基地膜降解是轉移的關鍵環(huán)節(jié)，并以此為靶標的腫瘤治療方

3、案已經(jīng)應用于臨床監(jiān)測和治療乳腺癌及其轉移，尋找乳腺癌轉移的不同時期生物標志物，可望早期判斷乳腺癌是否復發(fā)及轉移，防治乳腺癌的遠處轉移，同時以生物標志物作為指標評價藥物抗乳腺癌轉移的潛力有助于揭示中藥多靶點抑制腫瘤轉移的作用特點。因此本研究采用原位移植方法建立小鼠乳腺癌4T1自發(fā)轉移模型，在接種腫瘤后不同轉移時期用western法檢測原發(fā)灶和轉移灶(肺和淋巴結)中相關生物標志物表達的變化，用放免法檢測血清學指標的變化，采用生化和組織學的同

4、步檢查對結果進行驗證，同時以臨床有效中藥復方“抗癌Ⅰ號”為模型藥物，觀察其對所研究標志乳腺癌轉移的生物標記物的影響，為抗乳腺癌轉移藥物篩選提供有參考價值的實驗依據(jù)。
　　1目的：
　　探討乳腺癌轉移不同時期不同部位時生物標志物表達的變化，完善乳腺癌轉移的評價方法，為實現(xiàn)臨床前靶向性抗乳腺癌轉移的中藥篩選奠定基礎。
　　2方法：
　　建立小鼠乳腺癌4T1自發(fā)性轉移模型，于腫瘤接種后不同時間點用western法檢測各

5、組動物正常乳腺、腫瘤、肺、淋巴結組織中E-鈣粘蛋白(E-CD)，基質金屬蛋白酶9(MMP-9)，雌激素受體(ER)，孕激素受體(PR)的表達情況；用放免法檢測各組動物血清雌二醇，孕激素，糖類抗原153(CA153)的水平。
　　3結果：
　　3.1乳腺癌轉移的相關生物標志物研究
　　與對照組比較，腫瘤接種21d后，模型組動物血清CA153未見明顯改變；腫瘤接種35d后，模型組動物肺組織中E-CD表達降低，陽性藥CTX組

6、動物肺組織中E-CD表達較模型組明顯增高，模型組動物肺和淋巴結組織中MMP-9水平升高；隨著造模時間延長，腫瘤接種42d后，模型組肺組織中E-CD水平持續(xù)降低，模型組肺和淋巴結組織中MMP-9水平持續(xù)升高，MMP-9在轉移灶肺組織表達高于原發(fā)灶。
　　3.2中藥對乳腺癌轉移干預作用的研究
　　與模型組比較，給藥2W后，中藥復方5.67g·kg-1劑量和CTX組動物瘤體積明顯下降(分別為P<0.05和P<0.01)；給藥4W后

7、，中藥復方組荷瘤動物去瘤體重有增高趨勢，但無顯著性差異。11.33g·kg-1劑量和CTX組動物肺結節(jié)數(shù)明顯減少(P<0.05)，11.33g·kg-1劑量組動物血清孕激素水平較模型組明顯升高(P<0.05)，中藥復方組肺組織中E-鈣粘蛋白表達明顯增加，CTX組動物肺和淋巴結組織中MMP-9表達較模型組下降，中藥復方低劑量組肺組織中MMP-9表達下降。
　　4結論：
　　1)E-鈣粘蛋白表達下降與乳腺癌模型肺轉移有一定的相關