吸入糖皮質(zhì)激素對哮喘小鼠核因子NF-κB及Th2類細(xì)胞因子的影響.pdf

1、目的：探討哮喘小鼠肺組織核因子-κB(NF-κB)表達(dá)和支氣管肺泡灌洗液(BALF)中Th1/Th2類細(xì)胞因子的水平以及吸入糖皮質(zhì)激素對它們的影響，分析NF-κB與BALF中白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-5(IL-5)的相關(guān)性研究。 方法：30只BALB/c小鼠隨機(jī)分為正常組、哮喘組、哮喘普米克令舒(布地奈德懸液)治療組。其中哮喘組于第0、7、14天分別予卵清白蛋白(OVA)10ug及氫氧化鋁AL(OH)320mg混懸

2、液腹腔注射致敏，于第15-18天每天兩次霧化吸入2％OVA溶液以激發(fā)哮喘，普米克令舒治療組同上方法致敏及激發(fā)，但每次激發(fā)前均先霧化吸入普米克令舒1mg，保留10分鐘。正常對照組以生理鹽水代替OVA/AL(OH)3混懸液腹腔注射及霧化。所有動物都于末次激發(fā)后24小時內(nèi)行支氣管肺泡灌洗(BAL)及摘取肺臟制備冷凍切片，以ELISA法檢測BALF中IL-4、IL-5、干擾素-γ(IFN-γ)的含量并計數(shù)BALF中白細(xì)胞總數(shù)與分類，免疫組化測肺

3、組織NF-κB表達(dá)。 結(jié)果：1.三組BALF中白細(xì)胞總數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)的含量差異有顯著性(F=6.7，35.76)，其中哮喘組BALF中白細(xì)胞總數(shù)(11.73±5.18)及EOS的含量(8.0±3.87)明顯增加，較正常組(5.29±2.61、0.25±0.35)、治療組(7.25±3.9、0.8±1.01)有顯著差異(P＜0.01)；正常組與治療組比較BALF中白細(xì)胞總數(shù)及Eos的含量差異無顯著性(P＞0.05)。

4、 2.三組BALF中IL-4、IL-5的含量差異有顯著性(F=34.33、19.64)，哮喘組BALF中IL-4(95.23±22.82)、IL-5(90.97±20.27)明顯增加，較正常組(36.83±11.15、38.01±13.50)、治療組(45.58±14.89、49.2±24.68)差異有顯著性(P＜0.01)，正常組與治療組比較差異無顯著性(P＞0.05)。 3.三組肺組織NF-κB活化細(xì)胞百分比差異有顯著

5、性，(F=43.03、P＜0.01)，其中哮喘組(25.6±5.76)與正常組(8.6±3.98)、治療組(12.10±2.56)比較肺組織NF-κB活化細(xì)胞百分比差異有顯著性(P＜0.01)，正常組與治療組比較差異無顯著性(P＞0.05)。NF-κB活化細(xì)胞百分比與BALF中IL-4、IL-5的含量呈顯著正相關(guān)。(r分別=.0.95、0.92，t分別=16.1、12.4，P＜0.01)結(jié)論：1.哮喘小鼠BALF中Th2類細(xì)胞因子IL-

6、4、IL-5含量明顯增高，提示哮喘患者存在Th2優(yōu)勢反應(yīng)。 2.哮喘小鼠存在肺組織NF-κB過度激活，表達(dá)增強(qiáng)。 3.NF-κB激活陽性細(xì)胞數(shù)與BALF中IL-4、IL-5含量的水平成正相關(guān)。提示作為轉(zhuǎn)錄因子NF-κB參與調(diào)控一系列細(xì)胞因子的表達(dá)。 4.吸入糖皮質(zhì)激素使哮喘小鼠BALF中IL-4、IL-5含量減少，抑制哮喘肺組織NF-κB的過度激活和表達(dá)。推測吸入糖皮質(zhì)激素可能通過抑制Th2類細(xì)胞功能來增強(qiáng)Th1