吸入糖皮質(zhì)激素對(duì)哮喘大鼠氣道肥大細(xì)胞脫顆粒的影響.pdf

1、目的:
　　1.觀察哮喘模型大鼠氣道中肥大細(xì)胞脫顆?，F(xiàn)象及其所釋放的介質(zhì)β-類胰蛋白酶和IL-6與哮喘氣道炎癥的相關(guān)關(guān)系。
　　2.觀察吸入糖皮質(zhì)激素——布地奈德能否減輕氣道炎癥、減少肥大細(xì)胞增生、保護(hù)肥大細(xì)胞膜、抑制肥大細(xì)胞脫顆粒及β-類胰蛋白酶和IL-6的釋放。
　　3.比較布地奈德與肥大細(xì)胞穩(wěn)定劑-曲尼司特在哮喘防治及肥大細(xì)胞脫顆粒抑制作用上的異同。
　　4.探討布地奈德及曲尼司特在哮喘防治上是否存在協(xié)同作

2、用。
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　1.取雄性成年SD大鼠40只，分為五組:正常對(duì)照組（A組）、哮喘模型組（B組）、布地奈德干預(yù)組（C組）、曲尼司特干預(yù)組（D組），布地奈德+曲尼司特干預(yù)組(E組)，每組各8只，觀察并記錄各組大鼠的情況。
　　2.利用卵清蛋白致敏及激發(fā)來(lái)創(chuàng)建哮喘亞急性模型，對(duì)照組以0.9％氯化鈉代替。
　　3.藥物干預(yù)組分別以布地奈德泵霧化及曲尼司特灌胃處理，對(duì)照組以0.9％氯化鈉代替。
　　4.采集

3、血清，用ELISA方法檢測(cè)血清β-類胰蛋白酶及IL-6含量;采集支氣管周圍肺組織標(biāo)本，用Western Blot檢測(cè)大鼠組織中β-類胰蛋白酶水平;HE染色進(jìn)行病理學(xué)檢測(cè)觀察各組大鼠氣道炎癥情況;甲苯胺藍(lán)染色觀察各組肺組織標(biāo)本中肥大細(xì)胞形態(tài)及計(jì)數(shù);電鏡下觀察肥大細(xì)胞脫顆?，F(xiàn)象。
　　5.并且，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中意外發(fā)現(xiàn)曲尼司特存在損傷泌尿系統(tǒng)可能，故實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)取各組大鼠腎組織及膀胱標(biāo)本行HE染色，進(jìn)行病理檢測(cè)以篩查有無(wú)腎臟及膀胱炎性病變。<

4、br>　　結(jié)果:
　　1.大鼠亞急性哮喘模型的建立:隨著激發(fā)次數(shù)的增加，哮喘模型組（B組）大鼠逐漸出現(xiàn)煩躁不安、抓耳撓腮、呼吸加快、打噴嚏、體重增長(zhǎng)減慢等哮喘樣表現(xiàn)。病理學(xué)檢查顯示明顯氣道炎癥，嗜酸性細(xì)胞增多;肺組織與氣道周圍肥大細(xì)胞增多，電鏡下肥大細(xì)胞脫顆粒增加。大鼠哮喘亞急性模型建立成功。
　　2.各組肥大細(xì)胞計(jì)數(shù):B組氣道肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)較A組明顯增多，C組、D組及E組與B相比明顯減少，其中E組減少最為明顯，但仍多于A組，

5、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，C組與D組間無(wú)明顯差異。
　　3.各組電鏡下肥大細(xì)胞脫顆粒變化:A組肥大細(xì)胞數(shù)量少，無(wú)明顯脫顆?，F(xiàn)象。B組肥大細(xì)胞增生及脫顆粒表現(xiàn)明顯，而C組、D組、E組均較B組有所改善。
　　4.各組肺組織β-類胰蛋白酶含量比較:B組肺組織中β-類胰蛋白酶含量較A組升高明顯;C組、D組和E組3組均較B組減少，其中E組減少最為明顯，但仍高于A組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。C組及D組間無(wú)明顯差異。<

6、br>　　5.各組血清β類胰蛋白酶、IL-6含量測(cè)定:B組血清中β-類胰蛋白酶及IL-6的含量較A組升高明顯，C組、D組和E組3組則明顯低于B組，其中E組降低最明顯，但仍高于A組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。C組與D組之間則差異。相關(guān)性分析顯示，β-類胰蛋白酶與IL-6呈正相關(guān)關(guān)系。
　　6.曲尼司特干預(yù)組（D組）中發(fā)現(xiàn)膀胱炎1例，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中該實(shí)驗(yàn)組大鼠尿量增多，喝水增多，病理結(jié)果顯示:該組中一只大鼠的膀胱粘膜水腫，間質(zhì)內(nèi)