促甲狀腺激素影響脂肪分布及脂肪細(xì)胞脂肪因子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分，前言：
　　 肥胖是指體內(nèi)脂肪堆積過多和(或)分布異常,體重增加,是一種多因素的慢性代謝性疾病。它嚴(yán)重危害著人類的健康,中心型肥胖更是心血管疾病發(fā)生、發(fā)展過程中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。目前已有多篇研究證實(shí)甲狀腺功能與肥胖之間存在一定的聯(lián)系,盡管這種關(guān)聯(lián)的病因?qū)W機(jī)制尚未被闡明。早在30年前,就有研究指出臨床甲狀腺功能減退癥會(huì)引起體重的增加以及一系列的心血管事件。近來的研究表明,亞臨床甲狀腺功能減退癥的患者甚至甲狀腺功能正常的人群

2、,促甲狀腺激素水平與體重指數(shù)同樣存在正相關(guān)。
　　 關(guān)于甲狀腺功能與脂肪分布的研究為數(shù)不多。DePergola等人對(duì)甲狀腺功能正常的超重/肥胖女性進(jìn)行了研究,結(jié)果顯示腰圍(中心型肥胖)與TSH及游離三碘甲腺原氨酸呈獨(dú)立正相關(guān)。AlevizakiM等人應(yīng)用超聲測(cè)定腹部皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪面積并分析了其與甲狀腺功能的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)皮下脂肪與游離甲狀腺素呈負(fù)相關(guān),并且FT4為皮下脂肪的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。此后,WesterinkJ等學(xué)者同樣采用

3、超聲測(cè)定脂肪面積并分析其與TSH的相關(guān)性,結(jié)果顯示在66歲以上的人群中,TSH與內(nèi)臟脂肪呈正相關(guān),而在其他年齡段,并未發(fā)現(xiàn)TSH與內(nèi)臟脂肪的這種正性相關(guān)。
　　 本研究擬采用核磁共振檢測(cè)腹部皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪面積,分析其與甲狀腺功能之間的相關(guān)性,探討甲狀腺功能對(duì)腹部脂肪分布的影響。
　　 方法：
　　 隨機(jī)選取沈陽市南站社區(qū)40至65歲居民為研究對(duì)象,排除因各種原因(心臟支架、心臟起搏器、體內(nèi)金屬植入物、無檢查意

4、愿等)未行核磁共振檢查者,已知甲狀腺疾病并服用甲狀腺激素藥物或抗甲狀腺藥物治療者,服用影響甲狀腺功能的藥物者(避孕藥或雌激素等),懷孕或產(chǎn)后一年內(nèi)者,經(jīng)甲狀腺功能測(cè)定診斷為臨床甲減和臨床甲亢者,最終611人納入研究,其中男性307人,年齡(50.13±6.80)歲,女性304人,年齡(50.29±6.59)歲。所有研究對(duì)象進(jìn)行詳細(xì)的問卷調(diào)查,測(cè)定身高、體重、腰圍、臀圍、血壓,計(jì)算體重指數(shù)和腰臀比。應(yīng)用“TanitaTBF300A”體脂儀

5、測(cè)定體脂含量。采集空腹血檢測(cè)空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹胰島素,并行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)測(cè)定2小時(shí)靜脈血漿葡萄糖,計(jì)算HOMA-IR。測(cè)定TSH、FT4、FT3和TPOAb。在第四腰椎至第五腰椎的的平臍孔水平,應(yīng)用核磁共振掃描,采用SLICE-O-MATICversion4.2軟件畫圖,計(jì)算皮下脂肪和內(nèi)臟脂肪面積。采用SPSS16.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。
　　 結(jié)果：
　　

6、 1、TSH與皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪的相關(guān)性
　　 Pearson相關(guān)分析顯示,LnTSH與SF呈正相關(guān)(r=0.183,P=0.000),而與VF無相關(guān)。從性別上來看,在男性中LnTSH與SF及VF均無相關(guān),而女性LnTSH與SF呈正相關(guān)(r=0.133,P=0.02),VF呈正相關(guān)(r=0.136,P=0.018)。按照BMI進(jìn)行分組,超重/肥胖組的LnTSH與SF呈正相關(guān),且相關(guān)性更為明顯(r=0.253,P=0.000),非

7、超重組的LnTSH與SF同樣呈現(xiàn)正相關(guān),但相關(guān)性較弱(r=0.108,P=0.047),而兩組人群LnTSH均與VF無關(guān)。按照TPOAb陽性與否進(jìn)行分組,TPOAb陽性組LnTSH與SF呈正相關(guān),且相關(guān)性明顯(r=0.345,P=0.009),在TPOAb陰性組,LnTSH與sF同樣呈現(xiàn)正相關(guān),但相關(guān)性沒有TPOAb陽性組明顯(r=0.137,P=0.001),而兩組人群LnTSH均與VF無關(guān)。按照內(nèi)臟脂肪面積進(jìn)行分組,腹型肥胖組LnT

8、SH與SF呈正相關(guān)(r=0.220,P=0.000),非腹型肥胖組LnTSH與SF同樣呈正相關(guān),但相關(guān)性沒有腹型肥胖組明顯(r=0.161,P=0.003),兩組人群LnTSH均與VF無關(guān)。
　　 2、FT4與皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪的相關(guān)性
　　 Pearson相關(guān)分析顯示,FT4與SF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.164,P=0.000),與VF呈正相關(guān)(r=0.118,P=0.004)。從性別上進(jìn)行分析,無論在男性還是女性FT4與

9、SF均無相關(guān)。按照BMI進(jìn)行分組,超重/肥胖組的FT4與SF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.172,P=0.004),其FT4與VF無相關(guān),在非超重組,FT4與SF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.161,P=0.003),其FT4與VF呈正相關(guān)(r=0.244,P=0.000)。按照TPOAb陽性與否進(jìn)行分組,TPOAb陽性組的FT4與SF呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.291,P=0.030),其FT4與VF無相關(guān),在TPOAb陰性組,FT4與SF同樣存在負(fù)相關(guān)(r

10、=-0.142,P=0.001),其FT4與VF呈正相關(guān)(r=132,P=0.002),按照內(nèi)臟脂肪面積進(jìn)行分組,腹型肥胖組FT4與SF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.189,P=0.002),在非腹型肥胖組,FT4與SF同樣呈負(fù)相關(guān)(r=-0.188,P=0.001),兩組人群FT4與VF均無相關(guān)。
　　 3、FT3與皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪的相關(guān)性
　　 Pearson相關(guān)分析顯示,FT3與SF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.098,P=0.01

11、5),與VF呈正相關(guān)(r=0.261,P=0.000)。從性別上進(jìn)行分析,無論在男性還是女性均未見FT3與SF及VF的相關(guān)性。按照BMI進(jìn)行分組,超重/肥胖組的FT3與SF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.147,P=0.015),其FT3與vF呈正相關(guān)(r=0.205,P=0.001),在非超重組,FT3與SF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.241,P=0.000),其FT3與VF呈正相關(guān)(r=0.235,P=0.000)。按照TPOAb陽性與否進(jìn)行分組,TP

12、OAb陽性組FT3與SF無相關(guān),其FT3與VF呈正相關(guān)(r=0.342,P=0.010),在TPOAb陰性組,FT3與SF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.112,P=0.008),與VF呈正相關(guān)(r=0.253,P=0.000),按照內(nèi)臟脂肪面積進(jìn)行分組,腹型肥胖組FT3與SF及VF均無相關(guān),非腹型肥胖組的FT3與SF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.218,P=0.000),其FT3與VF呈正相關(guān)(r=0.117,P=0.033)。
　　 4、影響皮下

13、脂肪及內(nèi)臟脂肪面積的多因素分析
　　 將Pearson相關(guān)分析中與皮下脂肪或內(nèi)臟脂肪有相關(guān)的變量帶入多因素線性回歸模型,結(jié)果顯示TSH增高及FT3降低是預(yù)測(cè)皮下脂肪面積的危險(xiǎn)因素。
　　 結(jié)論：
　　 流行病學(xué)的橫斷面研究結(jié)果顯示血清TSH增高及正常范圍內(nèi)的FT3降低是預(yù)測(cè)皮下脂肪面積的危險(xiǎn)因素,提示血清TSH及FT3可能在體內(nèi)脂肪的分布上發(fā)揮著一定的作用。
　　 第二部分，前言：
　　 脂肪組織

14、是體內(nèi)巨大的能量?jī)?chǔ)備系統(tǒng),它對(duì)維持機(jī)體的能量平衡有著重要作用。脂肪細(xì)胞的增殖、分化異?？梢鹬窘M織的過多堆積,繼而導(dǎo)致肥胖和胰島素抵抗,是動(dòng)脈粥樣硬化、2型糖尿病、高血壓和脂代謝障礙等多種疾病的共同危險(xiǎn)因素?，F(xiàn)已知道脂肪組織表達(dá)和分泌多種生物活性肽,這些多肽稱為脂肪因子或脂肪細(xì)胞因子。除此之外,脂肪組織還有多種受體表達(dá),使其能對(duì)傳統(tǒng)的內(nèi)分泌系統(tǒng)及中樞神經(jīng)系統(tǒng)起到應(yīng)答反應(yīng)。
　　 在甲減狀態(tài)下,瘦素的水平變化不同研究所得出的結(jié)果

15、不盡相同,可升高、降低或無明顯變化。在甲減的患者或動(dòng)物模型中,血漿脂聯(lián)素水平可表現(xiàn)為明顯下降、或升高或無明顯改變。同樣甲減狀態(tài)下TNT-α及IL-6的水平變化亦無定論。
　　 本研究擬采用體內(nèi)實(shí)驗(yàn)及體外實(shí)驗(yàn)探討TSH增高狀態(tài)下,脂肪細(xì)胞瘦素、脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子α及白細(xì)胞介素6的表達(dá)的變化。
　　 方法：
　　 將24只Wistar大鼠隨機(jī)分成3組(每組n=8):①完全甲減組(CH):手術(shù)完全切除甲狀腺,皮下注射

16、0.9%的氯化鈉溶液。②正常對(duì)照組(C):行甲狀腺切除假手術(shù)、皮下注射0.9%的氯化鈉溶液。③亞臨床甲減組(SCH):手術(shù)切除甲狀腺,于頸背部每日皮下注射L-T4溶液1.0μg/(100g·d)建立亞臨床甲減模型。留取附睪周圍的內(nèi)臟脂肪組織,應(yīng)用WesternBlot技術(shù)檢測(cè)其瘦素、脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素6在蛋白水平的表達(dá),應(yīng)用RealtimePCR技術(shù)檢測(cè)上述指標(biāo)在mRNA水平的表達(dá)。
　　 采用經(jīng)典方法誘導(dǎo)3T3

17、L1細(xì)胞分化為成熟的脂肪細(xì)胞,給予其外源性的促甲狀腺激素(TSH)的刺激,濃度分別為0(對(duì)照組)、0.05mIU/m1、0.5mIU/ml、5mIU/ml及50mIU/ml,應(yīng)用ELISA法測(cè)定細(xì)胞上清瘦素、脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子α及白細(xì)胞介素6的表達(dá),應(yīng)用WesternBlot技術(shù)及RealtimePCR技術(shù)測(cè)定上述指標(biāo)在蛋白水平及mRNA水平的表達(dá)。采用SPSS16.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。
　　 結(jié)果：
　　 1、

18、大鼠脂肪組織脂肪因子表達(dá)
　　 亞臨床甲減組及臨床甲減組大鼠脂肪組織瘦素、腫瘤壞死因子α及白細(xì)胞介素6的表達(dá)高于對(duì)照組,而脂聯(lián)素的表達(dá)低于對(duì)照組,臨床甲減組大鼠脂肪組織瘦素、腫瘤壞死因子α及白細(xì)胞介素6的表達(dá)高于亞臨床甲減組,而脂聯(lián)素的表達(dá)低于亞臨床甲減組。
　　 2、分化的3T3L1細(xì)胞脂肪因子的表達(dá)
　　 隨著TSH濃度的增高,細(xì)胞上清瘦素、腫瘤壞死因子α及白細(xì)胞介素6水平呈現(xiàn)上升趨勢(shì),而細(xì)胞上清中未檢出脂聯(lián)