28033.蛋白質(zhì)多糖反應(yīng)體系的共振瑞利散射光譜、共振非線性散射光譜及其分析應(yīng)用研究

1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文蛋白質(zhì)多糖反應(yīng)體系的共振瑞利散射光譜、共振非線性散射光譜及其分析應(yīng)用研究姓名：劉健申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：劉紹璞20100501兩南大學(xué)碩十學(xué)位論文在pH1825的BR緩沖介質(zhì)中，硫酸軟骨素A(CSA)的硫酸酯基離解而以帶多個(gè)負(fù)電荷的大陰離子存在，而HSA、BSA、Chy、aAmy和溶菌酶(Lyso)等蛋白質(zhì)處于其等電點(diǎn)(pI)之下，則是帶多個(gè)正電荷的大陽離子，兩者可借靜電引力、氫鍵作用、疏水作用而

2、結(jié)合形成復(fù)合物。此時(shí)將引起共振瑞利散射(RRS)和二級散射(sos)、倍頻散射(FDS)等共振非線性散射(RNLS)的顯著增強(qiáng)并出現(xiàn)新的散射光譜。3種散射的散射增強(qiáng)(MRRS觚os和MFDS)均在一定范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)的濃度成正比，方法具有高靈敏度。三種方法對蛋白質(zhì)的檢出限分別為45120ng／mL(RRS法)、89158ng／mL(SOS法)和134315ng／mL(FDS法)，其中以CSABSA體系靈敏度最高(檢出限可達(dá)45ng／mL)

3、。本文研究了反應(yīng)體系的RRS、SOS和FDS的光譜特征、適宜的反應(yīng)條件和影響因素，討論了反應(yīng)機(jī)理、結(jié)合模式以及散射增強(qiáng)的原因。并以CSABSA體系為例考察了共存物質(zhì)的影響，表明方法有良好的選擇性。方法可用于正常人血清及尿樣中蛋白質(zhì)的測定。3蛋白質(zhì)與透明質(zhì)酸鈉相互作用的共振瑞利散射及共振非線性散射光譜研究及其分析應(yīng)用在適當(dāng)酸度的BR緩沖溶液介質(zhì)中，透明質(zhì)酸鈉(SodiumHyalumnate，SH)的D葡萄醛酸單元上的羧酸離解而帶上負(fù)電荷

4、，而與在處于等電點(diǎn)以下帶正電荷的HSA、BSA、Chy和aAmy借助靜電引力、疏水作用等結(jié)合而形成離子締合物。此時(shí)將引起共振瑞利散射(RRS)顯著增強(qiáng)，并產(chǎn)生新的RRS光譜，其最大散射波長位于300nm(ChySH)、290nm(HSASH，BSASH)和305nm(aAmySH)處。散射增強(qiáng)(MARS)與SH濃度在一定范圍內(nèi)成正比，可用于SH的定量測定。HSASH，BSASH，ChySH以及僅AmySH體系的檢出限(3∞分別是：3O，

5、77，43和35ng／mL(RRS)：54，163，105和68ng／mL(SOS)：89，210，172和88ng／mL(FDS)。本文研究了適宜的反應(yīng)條件，考察了共存物質(zhì)的影響，表明方法有較好的選擇性?；诖丝梢越⑵鹨环N靈敏度高、簡便、快速測定透明質(zhì)酸鈉的新方法。4用蛋白質(zhì)作探針共振瑞利散射和共振非線性散射發(fā)測定痕量藻酸鈉在適當(dāng)酸度的BR緩沖溶液介質(zhì)中，藻酸鈉(SodiumAlginate，Alg)的甘露糖醛酸單元上的羧酸離解而帶

6、上負(fù)電荷，而與在此酸度介質(zhì)中處于等電點(diǎn)(pI)以下的帶正電荷的HSA、BSA、Chy和Lyso借助靜電引力、疏水作用等結(jié)合而形成離子締合物。此時(shí)將引起共振瑞利散射(RRS)、二級散射(sos)和倍頻散射(FDS)等共振非線性散射(RNLS)的顯著增強(qiáng)，并產(chǎn)生新的散射光譜，其最大RRS散射波長分別位于304nm(Chy—Alg)、300nm(HSAAIg，BSAAlg)和301um(LySO—Alg)處。散射增強(qiáng)(A／RRS、MsoS和釁