雞傳染性生長(zhǎng)障礙綜合征病原的分離及其生物學(xué)特性的研究.pdf

1、摘要本試驗(yàn)用SPF雞胚及雞胚成纖維細(xì)胞、MDCK18Vero細(xì)胞，從我省某雞場(chǎng)患生長(zhǎng)障礙綜合征的病死雞肝臟組織中分離到一株病毒，該病毒不能凝集雞紅細(xì)胞。為確定該病的病原，對(duì)所分離病毒進(jìn)行了理化特性測(cè)定、病毒核酸型別測(cè)定、動(dòng)物回歸試驗(yàn)等生物學(xué)特性測(cè)定，證明該分離病毒與細(xì)小病毒科(Parvovirdae)細(xì)小病毒屬(Parvovirus)的雞細(xì)小病毒(Chickenparvovirus)特性基本相符，核酸型為DNA型。然后應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫吸

2、附測(cè)定法(間接ELISA)和免疫酶染色法對(duì)該病毒進(jìn)行免疫學(xué)分析，從免疫學(xué)方面對(duì)所分離病毒作進(jìn)一步確認(rèn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明雞胚尿囊液及內(nèi)臟組織毒的效價(jià)比細(xì)胞培養(yǎng)物中的要高。病毒復(fù)制的制場(chǎng)所為細(xì)胞核。本試驗(yàn)還通過(guò)雞胚接種門(mén)日齡雞胚經(jīng)卵黃囊接種，9日齡經(jīng)尿囊腔接種)發(fā)現(xiàn)了該病毒能穩(wěn)定引起雞胚死亡的代次、及雞胚的死亡時(shí)間。冬19還通過(guò)尿囊腔接種9日齡雞胚，成功的建立了雞傳染性生長(zhǎng)障礙綜合征模型，并采用常規(guī)石蠟切片及蘇木紫一伊紅染色(即HE染色)對(duì)該病

3、進(jìn)行了病理組織學(xué)動(dòng)態(tài)研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同階段死亡的雞胚病變不同，接種后一周內(nèi)死亡雞胚胚體水腫、全身出血。至出殼前死亡雞胚胚體水腫、蒼白、個(gè)體瘦小肝臟腫大、質(zhì)軟、易碎，呈黃色或土黃色。膽囊充盈、其內(nèi)充滿稀薄的膽汁法氏囊、胸腺萎縮，腸道擴(kuò)張、腸壁菲薄、內(nèi)充滿氣體及黃色泡沫狀物:腎臟腫大。病理組織學(xué)變化方面，早期肝臟、腎臟、腸主要以出血、水腫和壞死為主，且肝細(xì)胞核及腎小管的上皮細(xì)胞核內(nèi)均發(fā)現(xiàn)有核內(nèi)包涵體，包涵體呈嗜酸性，為大型圓形包涵體或不規(guī)則

4、的顆粒狀法氏囊則以水腫、濾泡發(fā)育不良、小型淋巴細(xì)胞數(shù)量增多為主。1921日齡雞胚肝細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞的胞漿內(nèi)出現(xiàn)12各大的空泡，法氏囊濾泡數(shù)目增多細(xì)胞間有較大空隙。以上變化說(shuō)明了全魚(yú)fpj對(duì)機(jī)體損傷的廣泛性。核內(nèi)包涵體的出現(xiàn)進(jìn)一步說(shuō)明，雞傳染性生長(zhǎng)障礙綜合征的病原在細(xì)胞核內(nèi)增殖，為DNA關(guān)鍵詞:雞細(xì)小病毒生物學(xué)特性病毒未間接ELISA“““染色》病理徽文獻(xiàn)綜述生長(zhǎng)障礙綜合征[1.2.3.4]是一種發(fā)生在快速增長(zhǎng)的幼齡肉用仔雞的、以生長(zhǎng)

5、障礙為特征的接觸性傳染病[5.6.71.它于1978年由Kouwenhoven首次報(bào)道.并將該病名命名為runtingsyndrome。在以后的研究I作中，Kouwenhoven.Etal[91認(rèn)為，該病所表現(xiàn)的臨床癥狀與首次報(bào)道的生長(zhǎng)障礙綜合征。1有時(shí)會(huì)有不同，自此以后，美國(guó)、英國(guó)、甸牙利、澳大利亞、加拿大、日本和南非等國(guó)相繼報(bào)道了該病。由于該病在各地區(qū)所表現(xiàn)的臨床癥狀有所不同，該病曾有過(guò)許多不同的術(shù)語(yǔ)名稱(chēng)。這些名稱(chēng)均是根據(jù)其癥狀所命

6、名，如:傳染性矮小綜合癥(infectiousstuntingsyndrome)110”’2.，，]:生長(zhǎng)抑制綜合癥(runtingstuntingsyndrome)[114.151蒼白雞綜合癥(palebirdsyndrome)[12.161.消化不良綜合癥(malabsorptionsyndrome)117is191脆骨病(brittlebonedisease)15.201:以及直升飛機(jī)病(Helicopterdisease)[20

7、21101986年，我國(guó)江西首次報(bào)道了該病[22101993年，河北省首次報(bào)道了商品蛋雞的生長(zhǎng)障礙綜合征1712000年，河北又發(fā)現(xiàn)了商品蛋雞的生長(zhǎng)障礙綜合征(現(xiàn)在正在研究中)。傳染性生長(zhǎng)障礙綜合征在自然條件下，主要感染生長(zhǎng)快速的肉用幼齡仔雞，火雞，珍珠雞，蛋雞也可發(fā)生[11.21.23.241。該病的主要特征為:生長(zhǎng)遲緩，雞個(gè)征體矮小，兩腿無(wú)力，羽毛凌亂18.221，但采食正常[43]傳染性生長(zhǎng)障礙綜合征自1978年Kouwenhov

8、en首次報(bào)道至今，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)該病進(jìn)行了大量的研究，目前對(duì)該病的研究主要集中在流行病學(xué)和病理組織學(xué)方面，在病原學(xué)方面，研究成果并不十分樂(lè)觀。1.流行病學(xué)在流行病學(xué)方面，學(xué)者們一致認(rèn)為，該病主要危害生長(zhǎng)較快的肉雞，對(duì)蛋雞不產(chǎn)生明顯的癥狀[201.該病與雞的生長(zhǎng)速度有關(guān)[51雞齡越小，對(duì)該病的易感性越高:老齡雞和生長(zhǎng)率低的雞一般不表現(xiàn)癥狀:1日齡雞感染后，發(fā)病率高，自然條件下，肉雞主要在37日齡發(fā)病，表現(xiàn)雞體矮小，羽毛凌亂，腹瀉等。4周齡時(shí)