安徽地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎血清學(xué)調(diào)查及APP分離與生物學(xué)特性研究.pdf

1、豬傳染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP)，是由胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一種豬高度傳染性呼吸道疾病，嚴重危害我國養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。為了解安徽地區(qū)PCP的流行情況，提高APP亞臨床感染的檢出率和細菌分離率，并研究分離株的生物型特性，本試驗將從以下幾個方面開展。
　　運用ApxIV-ELISA試劑盒檢測1288

2、份血清感染抗體，了解安徽地區(qū)總體感染情況及流行特點。結(jié)果顯示，APP感染抗體總陽性率為26.40％（340/1288），豬場感染率為78.37%(58/74)，母豬/后備母豬/公豬 APP感染抗體陽性率（45.47%）高于哺乳仔豬（28.02%）、保育豬（6.16%）、育肥豬（7.20%）；夏季（41.42%）高于春季（29.75%）、秋季（26.35%）、冬季（19.26%），淮北地區(qū)（30.73%）和江淮地區(qū)（28.57%）高于皖南

3、地區(qū)（13.77%），中型豬場（47.16%）高于大型豬場（19.28%）和小型豬場及散養(yǎng)戶（23.15%）。安徽地區(qū) PCP的流行特點，為制定有效防控措施提供了科學(xué)依據(jù)。
　　比較dsbE-PCR、omlA-PCR和ApxIVA-PCR的敏感性和特異性，并同時運用三種PCR方法檢測135份母豬鼻腔棉拭子中APP核酸，比較三種PCR方法的APP核酸檢出率。結(jié)果顯示：三種PCR最低檢測限度均為102CFU，且至對APP發(fā)生反應(yīng)；ds

4、bE-PCR方法的APP核酸檢出率（23.7%）顯著高于omlA-PCR（8.1%）和ApxIVA-PCR（14.8%），三者符合率較高，分別為84.4%、91.1%和93.3%。本試驗為APP亞臨床感染分子檢測方法的改良提供參考。
　　同時使用添加抗生素、NAD及血清的mPPLO、TSA、CA和BA四種選擇性培養(yǎng)基分離135份母豬鼻腔棉拭子中APP，比較四種分離培養(yǎng)基的分離率。結(jié)果顯示：mPPLO的APP分離率（11.9%）顯著

5、高于TSA（0.7%）、CA（5.2%）和BA（2.2%），四者符合率較高，分別為88.9%、93.3%、90.37%、95.6%、98.5%和97.0%。本試驗為豬鼻腔中APP分離方法的優(yōu)化及培養(yǎng)基的選擇提供理論參考。
　　通過細菌學(xué)試驗，研究APP分離株和參考株的生化特性。結(jié)果顯示：分離株和參考菌株的細菌形態(tài)、生化特性以及生長曲線一致。G-，具有典型的多形性,菌體較小,多為球桿菌；與甘露醇、葡萄糖等反應(yīng)為陽性，與乳糖、七葉苷等

6、反應(yīng)為陰性；2h~12h期間處于對數(shù)期，12h~14h達到最大值，14h后稍有下降并趨于平穩(wěn)。本試驗結(jié)果為APP的細菌學(xué)檢測、生化鑒定及疫苗制作提供參考依據(jù)。
　　運用常規(guī)藥敏紙片法，研究APP分離株藥物敏感性。結(jié)果顯示：安徽分離株對環(huán)丙沙星，氟苯尼考和諾氟沙星的敏感率最高（100%），其次是阿奇霉素和復(fù)方新諾明（85.7%），對丁胺卡那、青霉素等較敏感（71.4%~42.9%），對四環(huán)素、阿莫西林、萬古霉素和林可霉素耐藥（0%）

7、；福建分離株對環(huán)丙沙星和氨芐西林的敏感率最高（88.9%）；其次是諾氟沙星、卡那霉素和頭孢唑林（77.8%），對青霉素、氟苯尼考等較敏感（66.7%~33.3%），對四環(huán)素、林可霉素和萬古霉素耐藥（0%）。本試驗為APP臨床用藥提供指導(dǎo)。
　　通過輔酶試驗，鑒定APP的生物型。結(jié)果顯示：安徽分離株及參考菌株屬于生物I型，福建分離株屬于生物II型；運用ApaI-PFGE技術(shù)，對APP分離株及參考株進行基因型分型。結(jié)果顯示：參考株和分