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1、外源基因表達(dá)的不可預(yù)測性一直是制約轉(zhuǎn)基因動物發(fā)展的主要技術(shù)瓶頸之一.多年的實(shí)驗結(jié)果表明,定點(diǎn)整合技術(shù)和位點(diǎn)特異性重組技術(shù)的結(jié)合使用是解決這一難題的主導(dǎo)方向.該實(shí)驗從這個角度出發(fā),主要研究了在牛乳腺上皮細(xì)胞中對β-酪蛋白基因座位進(jìn)行定點(diǎn)整合的可行性,為動物乳腺生物反應(yīng)器的研制做了進(jìn)一步的探索工作.首先,利用PCR技術(shù)從牛的基因組DNA中獲得了構(gòu)建打靶載體所需要的左、右同源臂,長度分別為1590bp和6371bp.其中1590bp的左同源臂
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