硒代蛋氨酸對肉雞的生物學(xué)效應(yīng)及其分子機(jī)理研究.pdf

1、本課題研究了新型有機(jī)硒源-硒代蛋氨酸(Se-Met)及其不同構(gòu)型對肉雞生長性能、飼料利用和肉品質(zhì)的影響，并從硒沉積、抗氧化和免疫功能、相關(guān)激素的合成與分泌、關(guān)鍵代謝酶活力和硒蛋白基因表達(dá)等方面探討其主要作用機(jī)理，旨在闡明Se-Met對肉雞的生物學(xué)效應(yīng)，為其開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 試驗(yàn)一 DL-硒代蛋氨酸的有效性評價(jià)
　　 本試驗(yàn)采用2因子×4水平完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，同比SS，研究DL-Se-Met作為硒源對肉雞的有效性及

2、最適添加量。選用7日齡Ross308商品代公母混合雛840只，按照飼養(yǎng)試驗(yàn)要求分為7組，每組120只(含3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)40只)。對照組為不加硒的基礎(chǔ)日糧組(硒含量實(shí)測值0.04mg/kg)，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.05、0.15、0.25 mg Se/kg的亞硒酸鈉(SS)和DL-Se-Met。試驗(yàn)為期42天。自由采食和飲水。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每重復(fù)選體重相近公雞4只，進(jìn)行屠宰試驗(yàn)，并取樣分析。結(jié)果表明：
　　 (1)DL

3、-Se-Met是有效的硒源補(bǔ)充劑，最適添加水平為0.15mg Se/kg。
　　 (2)同比SS，DL-Se-Met顯著提高了飼料轉(zhuǎn)化率(P<0.05)，但對日增重和采食量均無顯著影響(P>0.05)；提高了肉雞宰后16h肌肉的紅色色度Hunter a值和降低了24 h、48 h肌肉滴水損失率(P<0.05)；提高了血清和組織硒含量(P<0.05)；增高了血清和組織T-AOC和GSH含量及肌肉SOD活力，減低了組織MDA含量及肌

4、肉和胰臟GPx活力(P<0.05)；提高了胸腺指數(shù)和血清IgA、IgG、IgM含量(P<0.05)；提高了血清TT3濃度并降低了血清TT4/TT3比值(P<0.05)。
　　 試驗(yàn)二硒代蛋氨酸的構(gòu)效研究
　　 本試驗(yàn)比較研究Se-Met同分異構(gòu)體對肉雞的生物學(xué)活性。選用1日齡Ross308商品代公母混合雛800只，按照飼養(yǎng)試驗(yàn)要求分為4組，每組200只(含5個(gè)重復(fù)，每重復(fù)40只)。4個(gè)處理組分別為SS對照組，D-、L-、

5、DL-Se-Met試驗(yàn)組，均在基礎(chǔ)日糧(硒含量實(shí)測值0.04 mg/kg)中添加0.15 mg Se/kg。試驗(yàn)為期42天。自由采食和飲水。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每重復(fù)選體重相近公雞4只，進(jìn)行屠宰試驗(yàn)，并取樣分析。結(jié)果表明：
　　 (1)同比SS，不同構(gòu)型Se-Met對肉雞生長性能和飼料利用均無顯著影響(P>0.05)，但顯著降低宰后胸肌24h、48h滴水損失率和提高血清和組織硒含量(P<0.05)。
　　 (2)同比SS，L

6、-和DL-Se-Met均顯著提高了血清和肝臟GSH含量、胰臟和肌肉T-AOC及降低了組織MDA含量(P<0.05)，升高了血清IgG含量(P<0.05)，提高了血清TT3濃度和降低了血清TT4/TT3比值(P<0.05)，提高了胰臟蛋白酶活力(P<0.05)，降低了肝腎TrxR1活力(P<0.05)；D-Se-Met則顯著提高了血清GSH含量和降低了肌肉MDA含量(P<0.05)，降低了肝腎GPx1和。TrxR1活力及血清和肝臟Se1P

7、含量(P<0.05)。
　　 (3)互比Se-Met構(gòu)型，DL型較L型顯著提高了胰臟T-AOC，血清GSH、IgA和IgG含量，血清、腎臟和肌肉硒含量，而降低了肝臟MDA含量(P<0.05)；而D型較L、DL型降低了肝臟GPx1活力及GSH含量、肌肉和胰臟T-AOC、胰臟淀粉酶和蛋白酶活力(P<0.05)。
　　 (4)同比SS，不同構(gòu)型Se-Met均顯著提高了肝腎GPx1、TrxR1和SelP及肌肉SelW mRNA豐

8、度，并皆呈DL>D>L型(P<0.05)。
　　 (5)首次成功克隆了雞GPx1基因cDNA部分序列，長度為416 bp。
　　 試驗(yàn)三硒代蛋氨酸體外抗氧化能力研究
　　 本實(shí)驗(yàn)采用雞胚腎細(xì)胞原代培養(yǎng)，同比SS，研究不同構(gòu)型Se-Met的體外抗氧化功能。結(jié)果表明：
　　 (1)同比SS，不同構(gòu)型Se-Met均提高了腎細(xì)胞SOD、GSH和T-AOC及降低了MDA(P<0.05)，而L和D-Se-Met降低了

9、GFx活力(P<0.05)。
　　 (2)互比Se-Met構(gòu)型，DL型較L型顯著提高了腎細(xì)胞GSH含量(P<0.05)，但D型較L、DL型降低了SOD和GPx活力及T-AOC水平，而增高了MDA含量(P<0.05)。
　　 試驗(yàn)四原代培養(yǎng)雞胚腎細(xì)胞氧化應(yīng)激模型建立
　　 實(shí)驗(yàn)成功建立了體外雞胚腎細(xì)胞氧化應(yīng)激模型，通過研究表明H2O2對原代培養(yǎng)雞胚腎細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激的最適濃度和作用時(shí)間分別為100μmol/L和12

10、h。
　　 試驗(yàn)五硒代蛋氨酸對腎細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用研究
　　 本試驗(yàn)采用4因子×7水平+1因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，研究SS和L、D、DL-Se-Met4種硒源對H2O2誘導(dǎo)損傷腎細(xì)胞的保護(hù)作用。結(jié)果表明：氧化應(yīng)激使細(xì)胞抗氧化能力下降，表現(xiàn)為細(xì)胞GPx活力、T-AOC和GSH水平降低而MDA含量增高(P<0.05)：而Se-Met和SS均可減弱H2O2誘導(dǎo)的氧化損傷程度，就此同比正常對照組，DL-和L-Se-Met組抗氧化指

11、標(biāo)能恢復(fù)到與其同等水平，而D-Se-Met組卻顯著降低了GPx活力和T-AOC水平(P<0.05)，SS也顯著降低了SOD活力、T-AOC和GSH水平，提高了MDA含量(P<0.05)；與此同時(shí)，DL-Se-Met較L-Se-Met還顯著提高了細(xì)胞GSH含量(P<0.05)，D-Se-Met較SS升高了T-AOC和GSH水平，降低了MDA含量(P<0.05)。
　　 上述結(jié)果提示：(1)不同構(gòu)型Se-Met均是肉雞有效的硒源補(bǔ)充