雞貧血病毒(CAV)vp1基因克隆與表達(dá)的研究.pdf

1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文雞貧血病毒(CAV)vp1基因克隆與表達(dá)的研究姓名：張剛申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：動物學(xué)指導(dǎo)教師：李云龍2001.4.30雞貧血病毒vpI爺因克隆i.j表達(dá)的研究雞貧血病毒(CAV)vpl基因克隆與表達(dá)的研究摘要雞貧血病毒(chickenanemiavirusCAV)是雞傳染性貧血病(chickeninfectiousanemiaVIA)的病原，屬圓環(huán)病毒科(Circoviridae)o(CAV基因組編碼三種蛋白:

2、VP1(51.6KD)VP2(24.OKD)VP3(13.6KD)，其中VPl是CAV的唯一衣殼蛋白，是CAV的保護性抗原，與VP2共同誘導(dǎo)雞產(chǎn)生免疫保護作用。尹本研究根據(jù)CAVvpl的基因序列設(shè)計合成一對引物，通過PCR方法對vpl基因進(jìn)行擴增，并把vpl基因連接到克隆載體PUC18上，在大腸桿菌DI15a中進(jìn)行克隆。用末端雙脫氧終止法測定vpl基因的序列，證明vpl基因共含1347bpoDNABlast分析表明，該基因與GeneBa

3、nk中已發(fā)表的vpl基因序列的一致性為95%左右，具有較大差異。這些差異導(dǎo)致vpl基因編碼蛋白的氨基酸發(fā)生改變。把克隆的vpl基因亞克隆到表達(dá)載體pET30(b)上，并在大腸桿菌DE3中用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)。SDSPAGE電泳鑒定證明VPl蛋白成功表達(dá)，其分子量為51.6KDovpl基因的成功克隆與表達(dá)，為VPl蛋白的免疫學(xué)研究和CAV基因工程疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:雞貧血病顴CAV)(PCR)，基因克隆丫vpl，八合酶鏈?zhǔn)椒戳吮磉_(dá)