土壤頡頏放線菌LH33-3的篩選、發(fā)酵及活性產(chǎn)物初步研究.pdf

1、本研究旨在從玉米與小麥的輪作田內(nèi)分離出對多種植物病原真菌具有強烈頡頏作用的放線菌，對菌株進行鑒定、發(fā)酵條件優(yōu)化，對其產(chǎn)生的抑菌活性物質(zhì)進行初步研究，尋找新型農(nóng)用抗生素的產(chǎn)生菌來源。 本試驗從采來的兩個土樣中共分離到198株放線菌。經(jīng)過皿內(nèi)十字交叉法初步篩選出原始菌株10株，再通過液體發(fā)酵復篩得到一株對水稻稻瘟病菌、番茄早疫病菌、小麥赤霉病菌、梨黑星病菌、棉花枯萎病菌、番茄灰霉病菌，小麥全蝕病菌、茄褐紋病菌、玉米大斑病菌，等均具有

2、強頡頏作用的放線菌LH33，對其進行單孢分離并測定單孢頡頏性，結(jié)果表明LH33-3的抑菌活性最強，對稻瘟病菌和小麥全蝕病菌抑制效果最好，抑制率分別達到90.5％和88.4％。最終確定LH33-3為最優(yōu)菌株。 依據(jù)LH33-3菌株的培養(yǎng)特征、形態(tài)學特征以及生理生化特征，并參照相關(guān)文獻初步鑒定其屬于鏈霉菌屬的金色類群(S．a(chǎn)ureofaciens)。 發(fā)酵條件優(yōu)化結(jié)果表明：菌株LH33-3在發(fā)酵時間為72h，發(fā)酵培養(yǎng)基初始P

3、H值8.0，培養(yǎng)溫度30℃，搖瓶轉(zhuǎn)速150 r/min，裝液量10mL，接種量10％的條件下，菌體代謝更旺盛，抑菌效果最好。 LH33-3菌株抑菌機理初步研究表明LH33-3發(fā)酵提取物抑菌譜廣，對供試的大多數(shù)病原真菌都有很好的抑制效果。其中對水稻稻瘟病菌、小麥赤霉病菌、小麥全蝕病菌、茄褐紋病菌、番茄灰霉病菌、玉米大斑病菌、辣椒疫霉病菌在低濃度也能達到較好的效果，1mg/l的藥液抑制率在45％以上。 能強烈抑制病原真菌菌絲

4、的生長和孢子的萌發(fā)。顯微觀察到被LH33-3抑制的病原真菌菌絲大部分扭曲、腫大、畸形，分枝增多，原生質(zhì)外溢，出現(xiàn)膨大的泡囊；被其抑制后，病原真菌的分生孢子數(shù)減少，孢子萌發(fā)率低，芽管或孢子畸形，最低質(zhì)量濃度(1mg/L)藥液對番茄早疫病菌孢子萌發(fā)抑制率55％，對已萌發(fā)孢子的致畸率為38％。 溫室盆栽實驗結(jié)果顯示LH33-3無菌發(fā)酵濾液對番茄狄霉病具有良好的預防和治療作用，100 mg/L質(zhì)量濃度發(fā)酵提取物的預防效果和治療效果分別達