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文檔簡介
1、芽孢桿菌是一群好氧或兼性厭氧、產(chǎn)芽孢的革蘭氏陽性桿菌的總稱,種類多、數(shù)量大,分布極其廣泛,其生理特征豐富多樣,是土壤和植物體表根際的重要微生物種群。由于芽孢桿菌具有內(nèi)生芽孢、抗逆性強(qiáng)、繁殖速度快、營養(yǎng)要求簡單和易于在植物根圍定殖的特點(diǎn),使其在植物病害生物防治中被廣泛地研究和利用。 本研究旨在從植物根際土壤中分離出對(duì)多種植物病原真菌具有強(qiáng)頡頏作用的芽孢桿菌,對(duì)菌株進(jìn)行鑒定、發(fā)酵優(yōu)化,并研究其抑菌機(jī)理,以探求用于植物病害生物防治的新
2、資源。 本試驗(yàn)采用把土壤懸浮液在80℃處理10 min的方法,從采來的土樣中共分離到142株芽孢桿菌。經(jīng)過皿內(nèi)對(duì)峙初步篩選出原始菌株1 2株,再通過無菌發(fā)酵濾液復(fù)篩得到一株對(duì)稻瘟病菌,小麥赤霉病菌,黃瓜枯萎病菌,梨黑星病菌,煙草赤星病菌,番茄灰霉病菌均具有強(qiáng)頡頏作用的芽孢桿菌B-Q2,對(duì)其進(jìn)行單孢分離并測(cè)定單孢頡頏性,結(jié)果表明B-Q2-7的抑菌活性最強(qiáng),對(duì)稻瘟病菌和番茄灰霉病菌抑制效果最好,抑制率分別達(dá)到87.04%和90.6%
3、。最終確定B-Q2-7為最優(yōu)菌株。 依據(jù)B-Q2-7菌株的培養(yǎng)特征、形態(tài)學(xué)特征以及生理生化特征,并參照相關(guān)文獻(xiàn)初步鑒定其屬于芽孢桿菌屬的地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)。 溫室盆栽實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示B-Q2-7無菌發(fā)酵濾液對(duì)番茄灰霉病具有良好的預(yù)防和治療作用,10倍液的預(yù)防效果和治療效果分別達(dá)到了89.6%和80.4%,250倍液的預(yù)防和治療效果也在60%以上。 運(yùn)用單因素分析法和復(fù)合因素分
4、析方法(正交設(shè)計(jì))對(duì)菌株B-Q2-7進(jìn)行了發(fā)酵優(yōu)化,確定了其最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方和最佳發(fā)酵培養(yǎng)條件。最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:葡萄糖1.2%+蔗糖0.6%+淀粉1.2%,豆餅粉3%,酵母粉0.3%,K<,2>HPO<,4>·3H<,2>O0.2%;發(fā)酵條件優(yōu)化結(jié)果表明:菌株B-Q2-7在發(fā)酵時(shí)間為36h,發(fā)酵培養(yǎng)基初始PH值8.0.培養(yǎng)溫度36℃,搖瓶轉(zhuǎn)速150 r/min時(shí),菌體代謝更旺盛,抑菌效果最好。 B-Q2-7菌株抑菌機(jī)理初
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