細葉百合組織培養(yǎng)及多倍體誘導研究.pdf

1、細葉百合(Lilium.pumilum),為百合科百合屬植物,是東北高寒地區(qū)野生種,花色鮮紅,花被片反卷下垂,具有良好的觀賞特性。細葉百合多分布在山的陰坡疏林下,適應性強,具有較強的抗性,是百合抗性育種的重要親本,也是優(yōu)良的園林綠化植物材料。目前,由于自然生態(tài)環(huán)境遭到破壞,細葉百合的自然分布量銳減,因此,野生種質(zhì)資源的保存和繁殖顯得更為重要。
　　 本研究采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),以細葉百合種球的鱗片和花器官的各組織部位等(包括花瓣

2、,花托,花絲,子房,花柱)為外植體,通過器官直接發(fā)生、愈傷組織兩種不同途徑,建立了細葉百合組織培養(yǎng)再生體系;進行了細葉百合種子最適萌發(fā)條件的試驗,并以無菌種子為材料進行了多倍體誘導,經(jīng)染色體倍數(shù)鑒定,確定獲得了多倍體植株。研究為野生細葉百合繁殖及多倍體育種奠定了工作基礎(chǔ),同時為進一步開展分子育種奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.以細葉百合鱗片為外植體建立了無菌培養(yǎng)系,鱗片在MS+NAA0.5 mg/L+6-BA1.5 mg

3、/L的培養(yǎng)基上分化率最高,達到100％,且長勢良好;在MS+NA.A0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L的培養(yǎng)基上,增殖倍數(shù)達3.7;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.5mg/l,且移栽成活率可達100％。在鱗片誘導分化過程中,存在位置效應,不定芽誘導率依次為外層＞中層＞內(nèi)層;下部＞中部＞上部。
　　 2.以花器官不同組織部位為外植體,通過愈傷組織途徑建立無菌培養(yǎng)體系,結(jié)果表明:誘導花托愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為MS+NA

4、0.5 mg/L+6-BA0.5mg/L;誘導子房愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.0mg/L;誘導花柱愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0 mg/L;誘導花瓣愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為MS+2,4-D2 mg/L+KT2 mg/L。誘導花絲愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為MS+2,4.D2 mg/L+KT2mg/L,其愈傷組織不定芽分化最適培養(yǎng)基為MS+NAA0.5mg/L+6-BA2.0 m

5、g/L。各種花器官外植體誘導愈傷組織由易到難依次為花托＞花絲＞子房＞花柱＞花瓣。最適合花托愈傷組織增殖和不定芽產(chǎn)生的培養(yǎng)基是MS+NAA0.2 mg/L+6-BA2.0 mg/L。IBA可以明顯增強其生根的效果,濃度以0.5mg/L為宜,移栽成活率可達100％。
　　 3.細葉百合種子最適萌發(fā)條件研究表明,培養(yǎng)基為MS,溫度25℃是細葉百合種子萌發(fā)的最適條件,采用人為添加無菌水的方式,可以有效保證種子的高萌發(fā)率。