正交試驗(yàn)法優(yōu)化水飛薊素固體脂質(zhì)納米粒的處方

1、<p>　　正交試驗(yàn)法優(yōu)化水飛薊素固體脂質(zhì)納米粒的處方</p><p>　　【關(guān)鍵詞】 固體脂質(zhì)納米粒；水飛薊素；制備工藝；</p><p>　　摘要：目的：為提高水飛薊素的療效，以硬脂酸為載體材料制備水飛薊素固體脂質(zhì)納米粒。方法：利用“乳化蒸發(fā)低溫固化”法制備水飛薊素固體脂質(zhì)納米粒，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法篩選出最優(yōu)處方。結(jié)果：固體脂質(zhì)納米?；境蕡A球狀或橢圓球狀，大小比較均勻

2、，生物數(shù)碼顯微鏡測定粒徑（245±100）nm。結(jié)論：硬脂酸納米?？勺鰹樗w薊素藥物載體制成制劑。</p><p>　　關(guān)鍵詞：固體脂質(zhì)納米粒；水飛薊素；制備工藝；</p><p>　　正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)水飛薊素（silymarin，SILY）是從菊科植物水飛薊的果實(shí)經(jīng)提取精制而得到的黃酮木脂素類化合物，為類白色結(jié)晶性粉末，無臭，味微苦，有吸濕性。溶于丙酮、乙酸乙酯，略溶于甲醇、乙醇，

3、難溶于氯仿，不溶于水。SILY對急慢性肝炎、肝硬變和代謝中毒性肝損傷有較好療效，但由于水飛薊素難溶于水，生物利用度低，制備理想液體制劑較困難。如將其制成注射劑需采用非水溶媒，但制成的注射液加水稀釋至含水量占75%以上時(shí)出現(xiàn)混濁，因此只可肌肉注射，不宜靜脈注射。</p><p>　　固體脂質(zhì)納米粒（solid lipid nanoparticles，SLN）系指以生理相容的高熔點(diǎn)脂質(zhì)為骨架材料制成的納米粒。它一方面

4、可以因藥物被載體攜帶而增加藥物的溶解度，從而增加藥物的生物利用度；另一方面它對肝臟和腎臟等網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的臟器具有靶向性。選擇天然脂質(zhì)材料硬脂酸為藥物載體，制成水飛薊素固體脂質(zhì)納米粒（silymarin solid lipid nanoparticles，SILYSLN）可因藥物被載體攜帶，分散在水中形成近似膠體溶液。同時(shí)用Poloxamer188及磷脂為表面活性劑，使之吸附在SILYSLN上，用于靜脈注射，可靶向肝臟部位，有利于提高藥物療效

5、降低藥物毒副作用。本實(shí)驗(yàn)選用水飛薊素作為模型藥，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法考察吐溫80、十八醇、PoloxamerF68、磷脂各因素對SLN的綜合影響并優(yōu)選出較優(yōu)處方，并將其制成固體脂質(zhì)納米粒。 </p><p><b>　　1儀器設(shè)備與材料</b></p><p>　　WFZ800D2型紫外可見分光光度計(jì)（北京第二儀器廠）；JY922D型超聲細(xì)胞粉碎機(jī)； DF101T集熱式

6、恒溫加熱磁力攪拌器 （鞏義市英峪予華儀器廠）；TG328B電光分析天平（上海天平儀器廠）；Nanomizer System YSNM1500（CONTROL UNIT YOSHIDA）。水飛薊素（實(shí)驗(yàn)室提供）；硬脂酸（天津市博迪華工有限公司）；大豆磷脂（供注射用 上海大偉藥業(yè)有限公司 批號 020718）；Poloxamer188 （南京金陵石化公司表面活性劑研究所 藥用規(guī)格）無水乙醇（分析純）；十八醇（沈陽市新西試劑廠）；吐溫80

7、（大連市醫(yī)藥集團(tuán)公司）；十二烷基硫酸鈉 （沈陽市東興制藥廠）。</p><p><b>　　2實(shí)驗(yàn)方法</b></p><p>　　21SILYSLN處方依據(jù)</p><p>　　211制劑中主藥含量的確定根據(jù)文獻(xiàn)中的報(bào)道及制劑中SILY用量, 確定每次投藥量0.03g。硬脂酸含量0.1g。</p><p>　　212處

8、方篩選采用單因素考察及參考文獻(xiàn)資料,選用吐溫80、十八醇、PoloxamerF68、磷脂作為表面活性劑，硬脂酸作為載體。確定了表面活性劑和載體的用量范圍,最后利用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法確定處方的組成。 </p><p>　　2121正交試驗(yàn)因素及水平在主藥含量固定不變的前提下，將吐溫（A）、十八醇(B)、poloxamer(C)及磷脂(D)用量作為考察因素，每個(gè)因素選取3個(gè)水平, 同時(shí)考察因素A與因素B的交互作用,選用正

9、交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表L18(37)安排實(shí)驗(yàn)。以通過0.8μm微孔濾膜物質(zhì)量（滿分10分）、0.45μm微孔濾膜的物質(zhì)量（滿分10分）、透明度（滿分20分）、分層程度（滿分10分） (總分50分) 為判斷指標(biāo),評價(jià)處方的優(yōu)劣。具體實(shí)驗(yàn)安排見表1，2。</p><p>　　由計(jì)算可得：SSA×B=SS3+SS4=14.8+4.8=19.6； SSE=SS7=168.8</p><p>　　

10、又因?yàn)橐蛩谹、A×B、D的均方比誤差列的均方要小,所以將其合并為誤差列中：</p><p>　　SSE=SS1+SS3+SS4+SS6+SS7=90.8+14.8+4.8+98.8+168.8=378 。選擇溶劑乳化法，乳化分散低溫固化方法，乳化分散法對SILYSLN的制備工藝進(jìn)行了研究，結(jié)果以乳化分散低溫固化法較好。經(jīng)過單因素考察和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)選，確定較優(yōu)制備工藝為：取水飛薊素、硬脂酸和無水乙醇10

11、ml加入100ml小燒杯中，微熱振蕩使充分溶解，加入處方量的卵磷脂，微熱再加入處方量十八醇及吐溫使成有機(jī)相；另取Poloxamer188溶于30ml水中構(gòu)成水相，將有機(jī)相在（1000r&#12539;min-1）攪拌下逐滴注入（75±2）℃的水相中，繼續(xù)攪拌，使有機(jī)溶媒完全蒸發(fā)，并使體系濃縮至約10ml。將所得的半透明體系攪拌下（1000r&#12539;min-1）快速混于另一60ml水相中，繼續(xù)攪拌1hr，

12、即得硬脂酸納米粒膠體混懸液，即為SILYSLN。</p><p><b>　　3實(shí)驗(yàn)討論</b></p><p>　　本研究針對溶劑乳化法及乳化蒸發(fā)低溫固化方法進(jìn)行比較，其中溶劑乳化法含有較大量有機(jī)溶劑，若用作靜脈注射會產(chǎn)生過敏反應(yīng)，其次形成粒子粒徑遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于1μm，不符合SLN粒徑要求。乳化蒸發(fā)低溫固化方法較為理想，所得硬脂酸納米粒穩(wěn)定性好，不發(fā)生沉降。</p&

13、gt;<p>　　實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，乳化劑的種類及用量對硬脂酸納米粒粒徑有較大影響，于是選擇多種乳化劑 混合使用。粒徑會隨磷脂、Poloxamer用量的增加而減少，但乳化劑用量過多，使液體過于粘稠，延緩納米粒中藥物的釋放。 而吐溫80作為靜脈注射表面活性劑，有較強(qiáng)的溶血作用，其用量一定得以控制于3%以下。</p><p>　　另外，溫度對硬脂酸納米粒粒徑亦有影響。當(dāng)溫度高于表面活性劑的相轉(zhuǎn)變溫度時(shí)，制得的

14、SLN更穩(wěn)定，一般控制在70℃以上，因?yàn)榇藭r(shí)磷脂的脂肪酸鏈能自由伸展，更充分地發(fā)揮作用。</p><p>　　有機(jī)溶劑無水乙醇及蒸餾水的用量對粒徑的影響不大。無水乙醇最終要蒸發(fā)除去，由于乙醇可以作為藥物溶劑使用，所以不需做殘留溶劑檢查。蒸餾水用量影響藥物濃度，本實(shí)驗(yàn)確定濃度為約0.5mg/ml。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p>&l

15、t;p>　　1Rainer HM, KarstenM, Sven G Solid lipid nanoparticles (SLN) for controlled drug deliverya review of the state of the art Eur J Pharm Biopharm, 2000,50(5):161~177.</p><p>　　2Muller RH, Mehnert W, Lu

16、cks JS, et al. Solid lipid nanoparticles (SLN)an alternative colloidal carrier system for controlled drug delivery Eur J Pharm Biopharm ,1995,41:62</p><p>　　3固體脂質(zhì)納米粒的研究進(jìn)展中國藥學(xué)雜志，2001，36（2）：73~76</p>&l