水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)畢業(yè)論文-中草藥復(fù)方對鱉源致病性嗜水氣單胞菌的體外抑菌效應(yīng)

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文</b></p><p><b>　?。?0 屆）</b></p><p>　　中草藥復(fù)方對鱉源致病性嗜水氣單胞菌的體外抑菌效應(yīng)</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專業(yè)班級

2、 水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué) </p><p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號 </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p><b>　　目錄</

3、b></p><p><b>　　中文摘要1</b></p><p><b>　　英文摘要2</b></p><p><b>　　1.前言3</b></p><p><b>　　2.材料與方法4</b></p><p>

4、;<b>　　2.1材料4</b></p><p><b>　　2.2實驗方法4</b></p><p><b>　　3.結(jié)果與分析5</b></p><p>　　3.1兩味中草藥復(fù)配組合對實驗菌的抑制效果5</p><p>　　3.2三味中草藥配伍組合對實驗菌的抑制效

5、果6</p><p>　　3.3適宜中草藥配伍組合的使用范圍7</p><p><b>　　4.討論8</b></p><p>　　4.1中草藥復(fù)配組合對實驗菌的抑制效應(yīng)特征8</p><p>　　4.2關(guān)于實驗菌對中草藥復(fù)配組合的評價8</p><p>　　4.3關(guān)于中草藥復(fù)配組合藥效

6、的探討8</p><p><b>　　5.致謝9</b></p><p><b>　　參考文獻10</b></p><p>　　[摘要] 為評價中草藥復(fù)配組合對嗜水氣單胞菌體外抑菌效果，通過黃芩、金銀花、蒲公英3味中草藥的10倍水提粉劑（按中草藥原料重量的10倍濃縮，即10克中草藥濃縮成1克的水提粉劑）對鱉源致病性嗜

7、水氣單胞菌株ZHYYZ-1（GenBank登錄號：GU563992）進行體外抑制實驗。采用倍比稀釋法和平板法測定各藥液對體外培養(yǎng)的嗜水氣單胞菌的MIC及MBC值，為金銀花1.56 mg/ml、黃芩1.56mg/ml、蒲公英3.12mg/ml，并分別記做1個單方藥物濃度單位。通過測定（1A ,0.8A+0.2B，0.6A+0.4B，0.4A+0.6B， 0.2A+0.8B,1B）（例如黃芩與金銀花進行復(fù)配，則1A=1h=1.56mg/ml

8、，1B=1j=1.56 mg/ml）單方兩兩復(fù)配組合對實驗菌的殺滅作用，篩選出對實驗菌具明顯抑菌效果的蒲公英與黃芩組合（0.2p+0.8h、0.4p+0.6h、0.6p+0.4h，依次記為A、B、C）和黃芩與金銀花組合（0.4h+0.6j、0.6h+0.4j、0.8h+0.2j，依次記為D、E、F），開展A、B、C、D、E、F間(例如A與D復(fù)配，則A=0.2p+0.8</p><p>　　[關(guān)鍵詞] 黃芩 金銀

9、花 蒲公英 嗜水氣單胞菌ZHYYZ-1 </p><p>　　Chinese Herbal Medicine on turtle Pathogenic Aeromonas hydrophila, the inhibition</p><p>　　[Abstract] To evaluate the combination of Chinese herbal compound on th

10、e bacteria Aeromonas hydrophila Bacteriostatic effect, through the skullcap, honeysuckle, dandelion 3 herbs mentioned 10 times of water powder (herbal raw materials by 10 times the weight of concentrate, or 10grams to 1

11、gram of concentrated herbal water extract powder) on the turtle pathogenic strains of Aeromonas hydrophila ZHYYZ-1 (GenBank accession number: GU563992) inhibition in vitro.By dilution plate method and determin</p>

12、<p>　　[Keywords] Scutellaria Honeysuckle Dandelion</p><p>　　Aeromonas hydrophila ZHYYZ-1 </p><p><b>　　1.前言</b></p><p>　　中華鱉（Trionyx sinensis）俗稱鱉、甲魚、團魚等，隸屬

13、于爬行綱、龜鱉目、鱉科、鱉屬，具很高的營養(yǎng)、經(jīng)濟和藥用價值，深受廣大消費者青睞，是當前我國最重要的淡水養(yǎng)殖品種之一。目前中華鱉各種疾病的頻繁爆發(fā)，已成為限制中華鱉養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的主要瓶頸之一[1]。</p><p>　　嗜水氣單胞菌(Aleromonas hydrophila)為水域常在菌，致病性嗜水氣單胞菌既是引起淡水養(yǎng)殖動物暴發(fā)性死亡的主要病原，也是淡水養(yǎng)殖動物細菌性疾病中經(jīng)濟損失最為嚴重的致病菌[2]。研

14、究表明，該菌對淡水魚感染率高達90%以上，死亡率高達65%以上，其既是引起養(yǎng)殖中華鱉爆發(fā)性死亡的主要病原，也是養(yǎng)殖中華鱉細菌性疾病中經(jīng)濟損失最為嚴重的致病菌之一[3]。在目前已報道的25種中華鱉疾病中，由其引起的鱉病就達15種之多[4]。無疑，獲取有效抑制該菌的藥物制劑具有重要的現(xiàn)實意義。</p><p>　　近四十年來，國內(nèi)外有關(guān)嗜水氣單胞菌的防治仍以藥物防治為主，但由于養(yǎng)殖生產(chǎn)上濫用抗生素、違禁藥物的嚴重存在

15、，已造成抗藥性菌株出現(xiàn)、污染環(huán)境、鱉肉質(zhì)下降等不良后果[5,6]。尤其是Rijker等發(fā)現(xiàn)，使用土霉素能夠抑制哺乳動物的體液免疫，口服抗生素在對致病菌產(chǎn)生殺傷或抑制作用的同時也會影響動物體內(nèi)正常微生物的種群，甚至破壞體內(nèi)的微生態(tài)平衡。為保障食品安全，國內(nèi)在一大批常用藥物被禁用同時，并未給出那些禁用藥物的替代品，致使屢禁屢用現(xiàn)象不斷升級,未禁用的部分抗生素和消毒劑因長期使用，已產(chǎn)生抗藥性并影響產(chǎn)品質(zhì)量。故開發(fā)不耐藥的、安全度高的抗菌藥物也

16、就顯得十分重要和必要。</p><p>　　中草藥是中藥和草藥的總稱[7,8], 是指在中國物性理論(陰陽五行學(xué)說)指導(dǎo)下用于防治人和動物疾病、促進健康、提高生產(chǎn)性能和動物產(chǎn)品質(zhì)量的天然物質(zhì)[9]。我國是中草藥的發(fā)源地，古代先賢對中草藥和中醫(yī)藥學(xué)的深入探索、研究和總結(jié)，使得中草藥得到了最廣泛的認同與應(yīng)用，它具有天然性、多功能性、無毒副殘留性、無抗藥性、雙向調(diào)節(jié)性、免疫性等多種優(yōu)點[10,11]。在當前全面提倡健康

17、養(yǎng)殖的新形勢下，推廣中草藥防治鱉病，能提高養(yǎng)殖中華鱉的免疫功能和抗病能力，而備受人們的關(guān)注[12,13]。實踐證明，中草藥是一類極有開發(fā)前景很好的純天然漁藥資源。</p><p>　　目前，國內(nèi)外有關(guān)鱉源致病性嗜水氣單胞菌的研究多集中于生物學(xué)特征[14]、病原分離與鑒定[15,16,17]、病理觀察[18]、毒力因子及致病力[19,20]、病原檢測[21,22,23]以及免疫防病[24,25]等方面。陳超然報道，

18、在中華鱉稚鱉飼料中添加35mg/kg·d的甘草素，不僅具有提高供試中華鱉免疫應(yīng)答水平，改善肝功能,增強抗嗜水氣單胞菌感染的能力，同時還具有明顯的促生長作用[26]。吳德鋒等在鱉飼料中添加由連翹、板藍根、金銀花等10多種中藥組成的復(fù)方中藥添加劑，治療鱉白點病、紅脖子病等效果顯著。而有關(guān)防控水生動物嗜水氣單胞菌病的中草藥復(fù)配組合物間比例關(guān)系的優(yōu)化研究尚未見報道。</p><p>　　鑒于此，作者于2010年

19、7-12月以浙江海洋學(xué)院水產(chǎn)養(yǎng)殖實驗室安全養(yǎng)殖分室提供的鱉源致病性嗜水氣單胞菌ZHYYZ-1為實驗菌，在完成對致病性嗜水氣單胞菌有顯著抑菌效果的9種中草藥單方實驗的基礎(chǔ)上，篩選出具顯著抑制效果的3味中草藥黃芩、金銀花、蒲公英，開展中草藥復(fù)方對致病性嗜水氣單胞菌抑菌效果的篩選與評價研究，以期為水產(chǎn)動物嗜水氣單胞菌藥物制劑的開發(fā)提供基礎(chǔ)資料。</p><p><b>　　2.材料與方法</b>&

20、lt;/p><p><b>　　2.1材料</b></p><p><b>　　2.1.1實驗菌</b></p><p>　　以鱉源致病性嗜水氣單胞菌ZHYYZ-1為實驗菌，由浙江海洋學(xué)院水產(chǎn)養(yǎng)殖實驗室安全養(yǎng)殖分室提供，為致病性強毒株。接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，30℃振蕩培養(yǎng)24h后用無菌生理鹽水（0.85%NaCl）制成不同

21、濃度的菌懸液，現(xiàn)配現(xiàn)用。</p><p>　　2.1.2培養(yǎng)基與中草藥</p><p>　　中草藥黃芩、金銀花、蒲公英均購自舟山同仁堂。營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(含2％NaC1)、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(含2％NaC1)均選購自杭州微生物試劑有限公司。</p><p><b>　　2.1.3實驗儀器</b></p><p>　　生化培養(yǎng)箱

22、（型號SHP-750）、雙人單面凈化工作臺（型號SW-CJ-2FD）、立式自動電熱壓力蒸汽滅菌器（型號LDZX-40SAI）等。</p><p><b>　　2.2實驗方法</b></p><p>　　2.2.1菌懸液和含藥平板的制備</p><p>　　實驗菌鱉源強致病性嗜水氣單胞菌ZHYYZ-1經(jīng)30℃斜面培養(yǎng)18h后，用無菌生理鹽水洗下菌

23、苔，依次制成菌濃度為1.0×104cfu/ml、1.0×105cfu/ml、1.0×106cfu/ml 、1.0×107 cfu/ml的懸液，4℃保存?zhèn)溆谩?lt;/p><p>　　取各實驗藥物10倍水提物10g，80目過篩，分別加400mL蒸餾水加熱使其完全溶解，藥物濃度為0.025g/mL，然后取出200mL，加入200mL蒸餾水，充分混勻，再取出200mL，如此稀釋各藥物

24、至對104菌液最小抑菌濃度的下一個濃度水平，并制成一定濃度的母液；采用2倍稀釋法，用蒸餾水梯次稀釋母液至藥物最小抑菌濃度（菌懸液濃度為1.0×104cfu/ml）的一半；設(shè)置若干藥液體積梯度，依次加入營養(yǎng)瓊脂并加熱溶解，121℃高壓滅菌20min，無菌操作，制成不同濃度的含藥平板，30℃過夜培養(yǎng)。</p><p>　　2.2.2最小抑菌濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MBC）的測定 </p>

25、<p>　　將制備好的菌液濃度為104-107g/mL的菌懸液，依次均勻涂布于各含藥平板（100µl菌液/塊），30℃恒溫培養(yǎng)24h后測定各實驗藥物對不同濃度菌液的最小抑菌濃度（以含藥平板上殘留菌落數(shù)小于10個菌落的藥物濃度作為該藥物的最小抑菌濃度）和最小殺菌濃度（以實驗菌殺滅率達到90%的藥物濃度為最小殺菌濃度），結(jié)果見表1。</p><p>　　表1：單味中草藥對不同濃度菌液的MIC和M

26、BC（mg/mL）</p><p>　　Table 1: Single Chinese herbs broth with different concentrations of </p><p>　　the MIC and MBC (mg / mL)</p><p>　　2.2.3 中草藥復(fù)配組合對實驗菌的抑制效果實驗及評價方法</p><p&g

27、t;　　由表1知，金銀花、黃芩、蒲公英的最小抑菌濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MBC）值為金銀花1.56 mg/ml、黃芩1.56mg/ml、蒲公英3.12mg/ml。將1.56 mg/ml金銀花（記做1j）、1.56mg/ml黃芩（記做1h）、3.12mg/ml蒲公英（記做1P）分別記做1個單方藥物濃度單位。以加和等藥物濃度方式設(shè)置兩味中草藥聯(lián)合藥物濃度梯度【(兩味藥物濃度加和方式依次為1A ,0.8A+0.2B，0.6A+0.4B，

28、0.4A+0.6B， 0.2A+0.8B,1B，其中第1組和最后1組為對照組），（例如黃芩與金銀花進行復(fù)配，則1A=1h=1.56mg/ml，1B=1j=1.56 mg/ml）】，各梯度組總藥物濃度為1個藥物濃度單位,組內(nèi)設(shè)平行組,采用最小殺菌濃度測定實驗方法，測定其對實驗菌的殺滅作用。根據(jù)復(fù)配組合對實驗菌的殺菌抑制效果，若其抑制效果等于對照組,表明其具有加和作用;若其抑制效果大于對照組,表明具有協(xié)同作用;若小于其抑制效果較高者,則表明

29、具有拮抗作用;若大于或等于其抑制效果較高者,而小于對照組,則表明抑制作用具有相互獨立性。</p><p>　　根據(jù)兩味中草藥的復(fù)配組合抑菌試驗結(jié)果,篩選出對實驗菌具有明顯抑菌效果的復(fù)配組合，再將其開展三味中草藥配伍組合的殺菌效果評價實驗（實驗及評價方法同兩味中草藥復(fù)配組合抑制試驗相同），獲取抑制嗜水氣單胞菌病的中藥劑配方。為進一步獲取中藥劑配方適宜的使用范圍，再設(shè)置菌濃度為1×103cfu/ml、1&#

30、215;104cfu/ml、1×105cfu/ml 三個組別，并相應(yīng)稀釋中藥劑配方藥物濃度，稀釋倍數(shù)為2倍、4倍、10倍，采用最小殺菌濃度測定實驗方法，最終得到適宜的中藥劑配方使用范圍。</p><p><b>　　3.結(jié)果與分析</b></p><p>　　3.1兩味中草藥復(fù)配組合對實驗菌的抑制效果</p><p>　　由表2可見，

31、復(fù)配組合蒲公英和黃芩、黃芩和金銀花對實驗菌的抑制效果作用明顯，尤其在復(fù)配組合（0.4蒲公英+0.6黃芩、0.6黃芩+0.4金銀花）中出現(xiàn)對菌株有殺滅作用，這表明復(fù)配組合后，其藥性加強，表現(xiàn)為協(xié)同效應(yīng)。當兩味中草藥復(fù)配組合的藥量相差不大時，協(xié)同效應(yīng)更為明顯，其抑菌和殺菌能力均大于單藥抗菌效果，抑菌作用并非單味中草藥抑菌效果的簡單加和。</p><p>　　在不同實驗菌濃度下，同一復(fù)配中草藥對實驗菌的抑制效果不同。3

32、個復(fù)配組中都隨著菌液濃度的增加而出現(xiàn)明顯的抑制效果作用減弱的現(xiàn)象。實驗菌濃度在1×105cfu/ml時，3個復(fù)配組合中都出現(xiàn)對實驗菌的殺滅效果作用，表現(xiàn)出協(xié)同作用；實驗菌濃度在1×106cfu/ml時，3個復(fù)配組合中對實驗菌的抑制效果作用相差不大，但仍表現(xiàn)出協(xié)同作用；而當實驗菌濃度在1×107cfu/ml時，蒲公英和金銀花復(fù)配的培養(yǎng)平板中的實驗菌成長為無數(shù)小菌落、片狀菌苔等，表明其抑制效果為拮抗作用。3個復(fù)

33、配組中黃芩和金銀花的效果最為明顯，藥平板殘留的菌落數(shù)量均小于等于106.3±7.4個/塊平板，甚至出現(xiàn)對實驗菌的殺滅效果作用。</p><p>　　在相同實驗菌濃度下，不同復(fù)配中草藥對實驗菌的抑制效果也是不同的。復(fù)配組合蒲公英和黃芩、黃芩和金銀花在實驗菌濃度為1×105cfu/ml、1×106cfu/ml、1×107cfu/ml時，對實驗菌都有明顯的抑制效果，但是復(fù)配組中隨

34、著黃芩的用量的減少，其抑菌效果有減弱的趨勢，但仍表現(xiàn)為協(xié)同作用；復(fù)配組合蒲公英和金銀花（0.2p+0.8j、0.4p+0.6j）在實驗菌濃度為1×105cfu/ml、1×106cfu/ml時，對實驗菌有抑制效果，表現(xiàn)為協(xié)同作用，但復(fù)配組合蒲公英和金銀花（0.6p+0.4j、0.8p+0.2j）在實驗菌濃度為1×107cfu/ml時，實驗菌數(shù)量遠遠大于對照組，對實驗菌沒有抑制作用，表現(xiàn)為拮抗作用。</p

35、><p>　　表2：兩味中草藥復(fù)配組合對實驗菌的抑制效果</p><p>　　Table 2: combination of two herbs mixed inhibitory effect of the experimental strains</p><p>　　注：j代表金銀花（1.56 mg/ ml），p代表蒲公英（3.12mg/ ml），h代表黃芩（1.56

36、mg/ ml)</p><p>　　3.2三味中草藥配伍組合對實驗菌的抑制效果</p><p>　　由表3可見，蒲公英、金銀花、黃芩三味中草藥配伍中的（0.08p+0.60h+0.32j）與（0.16p+0.60h+0.24j）這兩個配伍組合的殺菌率均達到99%以上，故可將其作為作為治療淡水養(yǎng)殖動物嗜水氣單胞菌病重癥的中藥配方， 黃芩、金銀花、蒲公英三者復(fù)配的質(zhì)量百分比依次為（51.7-5

37、5.6）%、（20.7-29.6）%和（14.8-27.6）%，這一結(jié)果也完全符合中藥的“性味歸經(jīng)”和“君臣佐使”配伍原理，即：由表2可見，蒲公英與黃芩組合（0.2p+0.8h、0.4p+0.6h、0.6p+0.4h，依次記為A、B、C）、黃芩與金銀花組合（0.4h+0.6j、0.6h+0.4j、0.8h+0.2j，依次記為D、E、F）對實驗菌有極為顯著的強抑菌作用，而金銀花與蒲公英組合對菌濃度1×107cfu/ml組別有較強

38、的殺滅拮抗作用。故三者配伍時應(yīng)將黃芩作為君藥，金銀花為臣藥（其殺菌能力與黃芩等同，且明顯強于蒲公英，見表2）、蒲公英為佐藥（殺菌能力相對較弱，且與金銀花有弱拮抗效應(yīng)，見表2）。</p><p>　　表3：三味中草藥配伍組合對實驗菌的殺滅率(%) </p><p>　　Table 3: Compatibility of Chinese herbal combination of shamis

39、en,the killing of experimental strain rate (%)</p><p>　　注：j代表金銀花（1.56 mg/ ml），p代表蒲公英（3.12mg/ ml），h代表黃芩（1.56mg/ ml)</p><p>　　3.3適宜中草藥配伍組合的使用范圍</p><p>　　由表4知，將復(fù)配組合(0.08p+0.60h+0.32j)與

40、（0.16p+0.60h+0.24j）藥液濃度稀釋倍數(shù)為4倍時，在不同的菌液濃度下，其殺菌率仍可達90%以上。表明此復(fù)配組合具有很強的殺菌效果，在實際養(yǎng)殖中，可適當稀釋用來預(yù)防和治療輕度的淡水養(yǎng)殖動物嗜水氣單胞菌病。</p><p>　　表4：蒲公英、黃芩、金銀花三方不同配比組合的殺菌率（%）</p><p>　　Table 4: dandelion, skullcap, honeysuc

41、kle combination of three different sterilization rate ratio (%)</p><p>　　注：j代表金銀花（1.56 mg/ ml），p代表蒲公英（3.12mg/ ml），h代表黃芩（1.56mg/ ml)</p><p><b>　　4.討論</b></p><p>　　4.1中草藥復(fù)

42、配組合對實驗菌的抑制效應(yīng)特征</p><p>　　中草藥配伍有兩層含義: 一是指中藥學(xué)中的配伍,即按病情需要和藥性特點, 將兩種以上藥物配合使用；二是指在方劑學(xué)中的配伍, 即藥物按君臣佐使的法度加以組合并確定一定的比例[26]。藥物通過配伍, 能增效、減毒、擴大治療范圍, 適應(yīng)復(fù)雜病情及預(yù)防藥物中毒。中草藥的配伍絕不是藥物之間的簡單相加[27]。</p><p>　　兩味中草藥復(fù)配組合屬于

43、中藥學(xué)中的配伍，即將蒲公英、黃芩、金銀花按不同的質(zhì)量比例直接復(fù)配組合用于實驗。在相同的實驗條件下，不同實驗質(zhì)量比例梯度組的抑菌效果存在差異，將蒲公英、黃芩、金銀花中兩兩復(fù)配時，有較強抑菌能力的一方作為主藥，另一方作為配藥，則抑菌強度為黃芩=金銀花＞蒲公英（見表1），當兩味中草藥復(fù)配組合時，主藥與配藥比例大于1時，抑菌效果明顯（見表2）。隨著主藥與配藥的質(zhì)量比例在增大時，復(fù)配組合對實驗菌的抑制效果越顯著，這與表2的實驗結(jié)果相吻合。<

44、/p><p>　　三味中草藥配伍組合屬于方劑學(xué)中的配伍。即藥物按君臣佐使的法度加以組合并確定一定的比例，故三者配伍時應(yīng)將黃芩作為君藥，金銀花為臣藥（其殺菌能力與黃芩等同，且明顯強于蒲公英，）、蒲公英為佐藥（殺菌能力相對較弱，且與金銀花有弱拮抗效應(yīng)，見表2）。根據(jù)蒲公英、黃芩、金銀花的性味歸經(jīng)，三味中草藥配伍組合質(zhì)量比例關(guān)系為黃芩＞金銀花＞蒲公英時，其抑制效果較明顯，這與表3的實驗結(jié)果相符。</p>&l

45、t;p>　　4.2關(guān)于實驗菌對中草藥復(fù)配組合使用范圍的評價</p><p>　　單味中草藥對實驗菌均有抑制作用，但因各中草藥的主要成分不同，導(dǎo)致對實驗菌的抑制效果強度不同，為克服這一缺點，可將性味歸經(jīng)相似的中草藥配伍，即性能功效相類似的藥物配合應(yīng)用，可以增強原有療效[28]。使之形成協(xié)同作用，加強抑菌效果。</p><p>　　實驗菌對中草藥配伍組合使用范圍很廣，不管單味還是配伍都能

46、有抑菌效果，但配伍組合的效果一般強于單味藥物。因中草藥成分復(fù)雜，當配伍的中草藥相惡時，兩藥合用，一種藥物能使另一種藥物原有功效降低，甚至喪失（表3與表2相比可得）?？梢?，實驗菌對中草藥的配伍還是有一定的使用范圍的，選擇配伍的中草藥要性味歸經(jīng)相似為好。</p><p>　　4.3關(guān)于中草藥復(fù)配組合藥效的探討</p><p>　　中草藥配伍組合不是簡單的加和作用，應(yīng)將配伍組合的相互作用歸為以下

47、4 種基本方式: (1)若其抑菌效應(yīng)等于對照組,表明具有加和作用；(2)若大于對照組,表明具有協(xié)同作用；(3) 若小于其抑菌強度較高者,則表明具有拮抗作用；(4)若大于或等于其抑菌強度較高者,而小于對照組,則表明抑制作用具有相互獨立性。 </p><p>　　試驗中的三味中草藥蒲公英、黃芩、金銀花，據(jù)《中華本草》介紹，蒲公英，性味，苦甘，寒；金銀花，性味，甘，寒；黃芩，性味，苦，寒[29]。其性味歸經(jīng)相似，但配伍

48、時藥物按君臣佐使的法度加以組合并確定的比例不同，其有些組合的抑菌效果并不都比兩味中草藥復(fù)配組合或單味中草藥的抑制效果強（見表2、3）。因中草藥成分復(fù)雜多樣，根據(jù)中草藥配伍關(guān)系及作用原理可知，配伍時關(guān)系主要有相須、相使、相畏、相殺、相惡和相反六個方面，只有當配伍的中草藥性味歸經(jīng)相似時，才會出現(xiàn)藥效增強，即為協(xié)同或加和作用。否則藥效則會減弱或維持藥效強度，即為拮抗或獨立作用。</p><p>　　鑒于目前，對防治鱉源

49、致病性嗜水氣單胞菌的最佳中草藥配伍組合在中華鱉細菌性疾病中的開發(fā)應(yīng)用還處于摸索階段。而且中草藥的組成成分復(fù)雜，其具體成分、作用方式和機理如何,仍有待于進一步研究。</p><p><b>　　[參 考 文 獻]</b></p><p>　　[1]鞠長增.鱉的養(yǎng)殖與疾病防治[M].鄭州: 河南科學(xué)技術(shù)出版社, 1997112521281</p><p

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51、<p>　　[5]汪長友．中草藥在魚病防治中的應(yīng)用[J]．水產(chǎn)學(xué)雜志，2003，16 (2)：91-93．</p><p>　　[6]苑麗．11種中草藥對常見病原菌的體外抑菌試驗[J]．獸藥與飼料添加劑，2001(1)：20．</p><p>　　[7]李明鋒, 王汝英,魚病藥物防治幾個問題的探討[J].現(xiàn)代漁業(yè)信息，1994，9（2）:23-26.</p>&

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53、lt;/p><p>　　[11]劉艷華，楊勁松．中草藥防治魚病研究進展[J]．中國獸藥雜志，1998，32 (1)：52—54</p><p>　　[12]楊永仙. 抗生素和中草藥在水產(chǎn)養(yǎng)殖疾病防治中的作用[J].云南農(nóng)業(yè),2008(6):17.</p><p>　　[13]陳超然,陳曉輝,陳昌福. 口服甘草素對中華鱉稚鱉抗嗜水氣單胞菌感染的作用. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，S

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56、gt;　　[19]葉巧真，何建國，翁少萍,等.中華鱉白底板病和紅底板病病毒及細菌的致病性.淡水漁業(yè)，1999，29（8）：3-7.</p><p>　　[20]楊先樂，柯福恩，周劍光，等.嗜水氣單胞菌對中華鱉致病力的研究.中國水產(chǎn)科學(xué)，1999，6（1）：117-121.</p><p>　　[21]陳昌福. 用直接熒光抗體法和細菌培養(yǎng)法對中華鱉體內(nèi)的嗜水氣單胞菌的檢測. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報

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59、成都中醫(yī)藥大學(xué)2005年.</p><p>　　[27]于虹,天津中醫(yī)學(xué)院,中藥配伍理論的應(yīng)用意義.中草藥,2003.</p><p>　　[28]儲岳峰,顏新敏,胡元亮,等.幾種中藥成分的免疫增強活性及其作用效果[J].中國獸醫(yī)科學(xué),2005,35(1):67-70.</p><p>　　[29]《中華本草》,國家中醫(yī)藥管理局,編委會,出版社：上海科學(xué)技術(shù)出版社，