抑殺雜交鱧源舒伯特氣單胞菌的中草藥篩選與應(yīng)用.pdf

1、近年來，隨著高密度養(yǎng)殖雜交鱧(Channa maculata♀×C.argus♂)技術(shù)的推廣，致使養(yǎng)殖水體水質(zhì)較差，病害頻頻發(fā)生，制約其可持續(xù)健康發(fā)展。其中，舒伯特氣單胞菌（Aeromonas schubertii）所引起的內(nèi)臟類結(jié)節(jié)病是鱧科魚類常見疾病之一。中草藥作為在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的藥物，不僅在我國具有歷史悠久、資源豐富、毒副作用小、無殘留等優(yōu)勢，而且具有抗菌、增強免疫等作用。因此，利用中草藥提高魚體的免疫力，減少病害發(fā)生是維持雜交

2、鱧養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要舉措。
　　試驗一選取五倍子、黃柏、烏梅等60味中草藥作為原料，采用水提法，制成濃度為1g/mL的藥液，采用瓊脂擴散法和二倍稀釋法，利用來自患病雜交鱧體內(nèi)分離出的的舒伯特氣單胞菌進行體外抑菌試驗，以抑菌圈直徑和MIC作為評價指標，篩選出抑菌效果較好的中草藥。試驗結(jié)果表明，初步篩選出了五倍子、大黃、黃柏、黃連、地榆、丁香、木瓜、訶子、五味子、兒茶、烏梅11味中草藥對舒伯特氣單胞菌抑菌較好的抑菌效果；通過二次篩

3、選，確定以初步篩選出的五倍子、大黃、烏梅等11味中草藥進行組方試驗研究。
　　試驗二采用正交t值法進行試驗設(shè)計，將初步篩選出的烏梅等11味中草藥進行配伍，以瓊脂擴散法測出的抑菌圈直徑為評價指標，經(jīng)主藥篩選、輔藥交互作用和劑量選擇三個步驟，篩選出的復(fù)方中草藥由烏梅和木瓜按一定的比例組成；并以急性毒性試驗對該復(fù)方進行安全性評價，以雜交鱧為試驗對象，結(jié)果表明，復(fù)方中草藥制劑的半致死濃度 LD50≥8×105mg/L，依據(jù)急性毒性（LD5

4、0）劑量分級表可判定所選中草藥制劑為無毒物，屬安全制劑。
　　試驗三、四選用初始體重(22.42±0.99) g，體長(15.45±1.02)cm的雜交鱧為試驗對象，隨機分為8組，每組30尾，每組設(shè)3個重復(fù)。將單方烏梅和復(fù)方中草藥分別以0.5％、1.0%、2.0%劑量加入到基礎(chǔ)飼料中，以基礎(chǔ)飼料和1%木瓜添加量的飼料為對照，飼喂60d后，分別測定增重率、特定生長率、豐滿度、內(nèi)臟比等生長指標、形體指標和內(nèi)臟指數(shù)，以研究單方和復(fù)方中草

5、藥對雜交鱧生長性能的影響。結(jié)果表明，飼喂試驗飼料60d后，隨著復(fù)方添加量的增大，平均末體重、絕對增重量、增重率和特定生長率出現(xiàn)緩慢降低的趨勢，最大值均出現(xiàn)在0.5%復(fù)方添加組，分別比基礎(chǔ)飼料組增加了14.93%、20.92%、22.46%、11.47%。
　　同時，測定肝臟、肌肉、血清中SOD、MDA、CAT、ACP和AKP的活性，以研究單方和復(fù)方中草藥對雜交鱧非特異性免疫功能的影響。結(jié)果表明，各添加組之間形體指數(shù)差異不顯著，而脾

6、臟指數(shù)的最大值出現(xiàn)在2%烏梅添加組，比基礎(chǔ)飼料組增加了47.83%。各添加組血清、肝臟和肌肉組織中的SOD活性與對照組相比，均有不同程度的提高，其中，1%烏梅添加量對肝臟和血清SOD影響最大，2%復(fù)方添加量對肌肉SOD影響最大；各添加組血清、肝臟和肌肉組織中的MDA含量與對照組相比，均有不同程度的降低，其中，1%烏梅添加量對肝臟 MDA影響最大，0.5%復(fù)方、2%烏梅添加組肌肉中的MDA含量最低，2%烏梅添加組血清中MDA含量最低；0.