結(jié)核菌素試驗(yàn)2017

1、結(jié)核菌素試驗(yàn),,（一）定義：由人工培養(yǎng)的結(jié)核桿菌的培養(yǎng)濾液制成的一種生物制品，其有效成份為結(jié)核蛋白。 （二）使用：≥3月的嬰幼兒接種卡介苗前篩選。測(cè)試卡介苗接種后是否有效，于接種后12周進(jìn)行，陽性者表示接種成功。（其他略） （三）品種：OT、PPD（TB-PPD、BCG-PPD等）。 （四）規(guī)格：1ml/支、10人份，每毫升含PPD 1μg，相當(dāng)于50個(gè)國(guó)際結(jié)素單位。,一、結(jié)核菌素（Tuberculin）,1．舊結(jié)素

2、（Old Tuberculin OT）：以Koch最初方法制成的結(jié)素。由于其制作簡(jiǎn)易，性質(zhì)穩(wěn)定，所以在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)一直使用。缺點(diǎn)是含雜質(zhì)多，不易標(biāo)準(zhǔn)化，不同生產(chǎn)單位或同一單位生產(chǎn)的各批效價(jià)不一。 2．純蛋白衍化物（Pure Protein Derivatine PPD）：用化學(xué)方法從結(jié)核菌培養(yǎng)液中提取出較純結(jié)核蛋白而制成的一種固體狀結(jié)素。其純度高，特異性強(qiáng)，可以標(biāo)準(zhǔn)化，因此逐步取代了舊結(jié)素。,（一）方法；皮內(nèi)注射法（Mantoux法）

3、，最大優(yōu)點(diǎn)是劑量和結(jié)果都較準(zhǔn)確。 （二）部位：左前臂掌側(cè)中間。如有疤痕、血管瘤等無法注射時(shí)，可換臂，但需注明。 （三）劑量：0.1ml/人次。 （四）觀察：72小時(shí)。,二、皮試,結(jié)素反應(yīng)屬于細(xì)胞介導(dǎo)的遲發(fā)型（Ⅳ）變態(tài)反應(yīng)，是由結(jié)核蛋白與攜帶免疫信息的小淋巴細(xì)胞（致敏T淋巴細(xì)胞）接觸后產(chǎn)生的變態(tài)反應(yīng)。結(jié)核蛋白在生產(chǎn)提取過程中發(fā)生部分變性，抗原成份已不完整，是半抗原，其本身不能使動(dòng)物致敏，只有加上臘質(zhì)?。╓ax D）才能使動(dòng)物致

4、敏，而臘質(zhì)丁正是結(jié)核菌外殼的組成成份。故只有當(dāng)機(jī)體受到結(jié)核菌或卡介苗感染后方能形成致敏T淋巴細(xì)胞而對(duì)結(jié)素產(chǎn)生反應(yīng)，而非感染者不對(duì)結(jié)素產(chǎn)生反應(yīng)。,三、反應(yīng)機(jī)制,結(jié)素反應(yīng)共有二個(gè)階段，第一個(gè)階段是特異性階段。當(dāng)結(jié)素進(jìn)入致敏機(jī)體后，與循環(huán)中的致敏T淋巴細(xì)胞接觸，刺激T淋巴細(xì)胞釋放大量免疫活性物質(zhì)——淋巴因子，如巨噬細(xì)胞游走抑制因子、轉(zhuǎn)移因子、皮膚反應(yīng)因子、趨化因子、巨噬細(xì)胞凝集因子、淋巴毒素等。第二個(gè)階段是非特異性階段。釋放出的這些活性物質(zhì)可

5、以促使巨噬細(xì)胞向有反應(yīng)原的地方游走、聚集、發(fā)育、繁殖，可以使局部血管擴(kuò)張，通透性增加，導(dǎo)致局部充血、滲出，,更多的細(xì)胞從血管向外浸潤(rùn)，在24小時(shí)后局部出現(xiàn)紅暈和硬結(jié)，48—72小時(shí)達(dá)到高峰，形成肉眼可見的局部皮膚反應(yīng)，反應(yīng)強(qiáng)烈者可出現(xiàn)水泡、潰瘍，嚴(yán)重者可見前臂腫脹，疼痛、發(fā)熱、周身不適等。 紅暈是局部血管擴(kuò)張所致，對(duì)判斷機(jī)體致敏無意義，而硬結(jié)是水腫加巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)所致，是判斷機(jī)體致敏的依據(jù)。,1．發(fā)熱（T＞37.5℃）2．各種傳染病

6、及恢復(fù)期。3．各種器質(zhì)性疾病如心臟、血管系統(tǒng)、腎臟、肝臟和胃腸等疾病急性期。4．身體極度虛弱者。5．患有局部或全身性皮膚病。6．防御機(jī)制不健全者，如免疫缺陷，丙種球蛋白缺乏者。7．其他預(yù)防接種不到二周者。8．本人或家屬有過敏史或變態(tài)反應(yīng)史。9．神經(jīng)及精神不正常，易出現(xiàn)暈厥、休克、癲癇等情況者。,四、禁忌癥,1．試驗(yàn)前先核對(duì)藥名、劑量、有效期及嬰幼兒，如有沉淀、安瓿破損及過期者不得使用。 2．用75%酒精消毒皮膚。

7、 3．應(yīng)用一次性注射器，刻度和針孔斜面一致向上與皮膚平行刺入皮內(nèi)，緩慢準(zhǔn)確地注射0.1ml（含5U PPD）呈直徑約為6-10mm大小白色隆起，不要揉搓，會(huì)自行消退，不要用酒精棉球（簽）按壓針眼。,五、操作,4．干擾因素： a、光線：直接日光照射10分鐘，結(jié)素效價(jià)減少80%。1955年WHO曾做過這樣的研究，用光照射過的結(jié)素為接種卡介苗的學(xué)生做測(cè)定，同時(shí)設(shè)對(duì)照組。結(jié)果發(fā)現(xiàn)光照組90%以上反應(yīng)減弱，較對(duì)照組相差最大達(dá)8mm。

8、 b、溫度：保存溫度偏高可使結(jié)核蛋白變性而降低效價(jià)，時(shí)間長(zhǎng)了則結(jié)素會(huì)完全失效。 c、技術(shù)：注射劑量不足，未搖均勻，注射較深、驗(yàn)看不仔細(xì)不熟練等。,1．時(shí)間：72小時(shí)。 2．方法：一看、二摸、三量?？淳植坑袩o紅暈、雙圈、水泡等。對(duì)衣袖較緊者，擼起袖子時(shí)要稍等片刻再觀察，否則會(huì)誤為陰性。用手指上下、左右輕輕來回觸摸，不能擠捏，容易造成疼痛和假陽性。觸摸后用尺測(cè)量硬結(jié)邊緣，根據(jù)手臂的縱橫徑垂直交叉各測(cè)量一次，以毫米為單位記錄，如10

9、×12mm。 3．計(jì)算記錄硬結(jié)平均直徑：橫徑+縱徑/2。,六、觀察,4．結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)： 我國(guó)現(xiàn)將結(jié)素試驗(yàn)反應(yīng)結(jié)果分為三類： 陰性：無硬結(jié)或硬結(jié)平均直徑＜5mm； 陽性：硬結(jié)平均直徑5-19mm； 強(qiáng)陽性：硬結(jié)平均直徑≥15mm（成年人為20mm），或有雙圈、水泡、潰瘍、皮疹等。如無20 mm，但有雙圈、水泡、潰瘍、皮疹等也為強(qiáng)陽性。,結(jié)素試驗(yàn)結(jié)果定性與定量之間的關(guān)系： “－” —— 硬結(jié)平均

10、直徑＜5mm或無硬結(jié)； “＋” —— 硬結(jié)平均直徑5-9mm； “＋＋” —— 硬結(jié)平均直徑10-14mm； “＋＋＋” —— 硬結(jié)平均直徑15-19mm； “＋＋＋＋” —— 硬結(jié)平均直徑≥20mm，或有水泡等。,,,,,1．2-8℃冷藏，避光保存，不能直接放在冰上，不與其他藥物混放。 2．安瓿打開后1小時(shí)內(nèi)用完。 3．試驗(yàn)應(yīng)在室內(nèi)進(jìn)行，避免陽光直射。 4．注射時(shí)