流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期操作步驟

1、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期操作步驟流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期操作步驟取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A549細(xì)胞，按1106cellsmL以1mL接種于100mm培養(yǎng)皿內(nèi)↓24h后，進(jìn)行所需的處理（比如加藥照射）↓特定時(shí)間后終止培養(yǎng)，進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)↓收集原培養(yǎng)液，洗后的PBS和消化后的細(xì)胞，將三者混勻放入15ml離心管中↓1000rpm離心5min（短時(shí)低速離心）↓棄上清，用1.5ml預(yù)冷PBS，1000rpm離心5min后去除PBS和細(xì)胞懸液內(nèi)的細(xì)胞碎片↓加

2、入1.5ml預(yù)冷PBS在渦旋狀態(tài)下加入3.5ml無水乙醇，混勻后，于4℃固定30min或20℃長(zhǎng)期保存?！?000rmin離心5min↓↓流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液，細(xì)胞排成單列由噴嘴中心噴出，形成細(xì)胞液柱↓液柱與激光束相交，細(xì)胞上的熒光染料被激發(fā)產(chǎn)生熒光（488nm激發(fā)光源）↓熒光信號(hào)變成電信號(hào)輸出到計(jì)算機(jī)，軟件分析（熒光染料和細(xì)胞DNA分子特異性結(jié)合，可以檢測(cè)出細(xì)胞周期各時(shí)相細(xì)胞比例）↓在用第三方軟件分析之前，將流式結(jié)果按如下所示導(dǎo)出結(jié)果分析