微生物學(xué)實驗思考討論錯題整理

1、微生物學(xué)思考討論錯題整理實驗一實驗一顯微鏡的使用和細(xì)菌基本形態(tài)觀察顯微鏡的使用和細(xì)菌基本形態(tài)觀察1.觀察標(biāo)本時，必須依次用低倍鏡、高倍鏡，原因是低倍鏡視野比較大，能看到的范圍大，容易找到觀察的目標(biāo)，然后再用放大倍數(shù)高的高倍鏡或油鏡有目的的觀察。2.影響顯微鏡分辨率的因素有哪些？實驗二實驗二環(huán)境微生物的檢測環(huán)境微生物的檢測1.本實驗只取了臺面的小部分樣品，經(jīng)培養(yǎng)后觀察到4種不同的菌落，且各菌落皆有自己鮮明的特點。菌落的數(shù)量反映了A種細(xì)菌在

2、臺面的存活能力最強(qiáng)，故種群數(shù)量大，相對于BCD細(xì)菌在實驗臺臺面有競爭優(yōu)勢。由于臺面是平面，空氣是立體的，故空氣中的細(xì)菌比臺面的多，而且空氣中的微生物與暴露時間有關(guān)。由此可見，一個清潔的實驗臺有利于實驗的成功（不被污染）。2.通過本實驗，在防止微生物污染和擴(kuò)散方面，我體會到我們生活在微生物的包圍之中，微生物無處不在，故十分容易對培養(yǎng)基造成污染，因此實驗過程要求無菌操作，整個微生物操作過程均應(yīng)在酒精燈旁或在潔凈臺內(nèi)進(jìn)行，以避免污染微生物。實

3、驗過后，所有帶活體微生物的器皿和材料均應(yīng)滅菌，防止微生物擴(kuò)散，污染環(huán)境。實驗三實驗三細(xì)菌簡單染色及革蘭氏染色細(xì)菌簡單染色及革蘭氏染色1.革蘭氏染色成敗的關(guān)鍵因素是脫色，脫色不夠造成假陽性，脫色過度造成假陰性。其他影響因素：1）菌齡：選用對數(shù)生長期為宜，若太老，由于菌體死亡或自溶使革蘭氏陽性細(xì)菌轉(zhuǎn)呈陰性反應(yīng)。2）涂片厚薄均勻度：太厚會使脫色不完全造成假陽性。3）媒染時間、脫色時間及脫色時的酒精濃度（95%乙醇，不應(yīng)被稀釋）2.制片時通過加

4、熱固定使細(xì)胞質(zhì)凝固，使細(xì)胞固定在載玻片上，且不破壞細(xì)胞形態(tài)。但要注意避免高溫所導(dǎo)致的菌體變形。實驗五實驗五微生物的血球計數(shù)板直接計數(shù)及細(xì)胞大小的測定微生物的血球計數(shù)板直接計數(shù)及細(xì)胞大小的測定1.血球計數(shù)板直接計數(shù)法的原理該法的有效測量濃度范圍是106以上用該法進(jìn)行計數(shù)的適宜濃度是107個ml左右實驗六（一）培養(yǎng)基的配制及滅菌實驗六（一）培養(yǎng)基的配制及滅菌1.濕熱滅菌法的優(yōu)點缺點：1）設(shè)備費用高2）不能用于對熱不穩(wěn)定的物料滅菌2.請設(shè)計干

5、熱滅菌和濕熱滅菌效果比較的方案（二）微生物的分離純化與菌落計數(shù)二）微生物的分離純化與菌落計數(shù)1.平板菌落計數(shù)法因為，所以計數(shù)結(jié)果往往偏低，故使用CFU（注意用科學(xué)計數(shù)法表示數(shù)量）表示樣品活菌含量。該法的結(jié)果受培養(yǎng)條件的影響，故需標(biāo)示培養(yǎng)條件。該法可以通過培養(yǎng)條件，而可以實現(xiàn)樣品中不同種類微生物的分別測量。2.結(jié)論：菌落，形態(tài)是否單一；個體形態(tài)，是否均一。最終是否得到了純培養(yǎng)。3.劃線時要快速，使接種環(huán)在平板上平穩(wěn)滑動。4.土壤樣品應(yīng)充分

6、振搖！5.當(dāng)平板上長出的菌落不是均勻分散的，而是集中在一起，你認(rèn)為問題出在哪里？答：因為倒平板后未立即搖勻。6.血球板直接計數(shù)法：1）優(yōu)點：直觀，快速，操作簡單2）缺點：僅適用于菌液濃度高于108個ml的樣品，菌濃度低時計數(shù)不準(zhǔn)確或無法計數(shù)。該法不適用于絲狀微生物的計數(shù)，但可計數(shù)它們的孢子。平板菌落計數(shù)法：1）優(yōu)點：可通過不同的培養(yǎng)條件對樣品中的微生物進(jìn)行分類分別測量，方法應(yīng)用范圍廣泛，幾乎可以測量任何樣品。2）缺點:操作繁瑣耗時（三）

7、微生物的生理生化特征（三）微生物的生理生化特征1.細(xì)菌菌株（編號）：來源：XX由XX樣品，經(jīng)XX培養(yǎng)基XX及XX分離得到的單菌落。經(jīng)鏡檢，證實為純培養(yǎng)的細(xì)菌。（四）目標(biāo)微生物的篩選（四）目標(biāo)微生物的篩選1.實驗中，若兩個產(chǎn)抗生素的對照組：細(xì)黃鏈霉菌和青霉均未得到產(chǎn)抗生素陽性的結(jié)果，說明“抗生素產(chǎn)生情況”的實驗是失敗的。得出的“放線菌XX號不產(chǎn)青霉素“的結(jié)論也就不可靠。應(yīng)予以討論。實驗七實驗七噬菌體效價的測定噬菌體效價的測定1.觀察比較平

8、板上的噬菌斑的生長情況：對照平板上無噬菌斑出現(xiàn)，但形成了鋪滿整個平板之菌苔。2.實驗中影響噬菌斑大小的因素有：1）上層瓊脂的濃度對噬菌斑能否正常形成有主要影響2）下層瓊脂的營養(yǎng)必須適宜于宿主的生長3）噬菌體為烈性噬菌體數(shù)與宿主細(xì)胞濃度比例越高，菌斑越大4）外在因素：培養(yǎng)時間，溫度，培養(yǎng)基類型會影響細(xì)菌和噬菌體的生長情況和噬菌體對細(xì)菌的侵染程度，從而影響噬菌斑大小。5）與宿主細(xì)胞的特異性越低，形成噬菌斑的機(jī)會越大。3.保溫過程中劇烈搖晃試