乳酸脫氫酶

1、乳酸脫氫酶（乳酸脫氫酶（LactatedehydrogenaseLDH）是存在于細(xì)胞漿內(nèi)的一種酶，乳酸脫氫酶在生命體中糖代謝中扮演重要角色。在我們培養(yǎng)的細(xì)胞中乳酸脫氫酶分別存在于以下三個(gè)地方：1、存在于活細(xì)胞內(nèi)。若你培養(yǎng)的是貼壁細(xì)胞(viableadherentcells)，那么貼在壁上的就是活細(xì)胞，此時(shí)的乳酸脫氫酶就存在于細(xì)胞內(nèi)，所以測(cè)得貼壁細(xì)胞中的乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細(xì)胞中活細(xì)胞的量，我們稱(chēng)之為L(zhǎng)DHV。2、存在于漂浮

2、于培養(yǎng)液中的凋亡小體(Apoptoticbodies)。由于凋亡小體有細(xì)胞膜，因此凋亡小體中的乳酸脫氫酶也沒(méi)有釋放到胞外。此時(shí)測(cè)得凋亡小體中的乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細(xì)胞中凋亡細(xì)胞(apoptoticcell)的量，我們稱(chēng)之為L(zhǎng)DHa。3、存在于培養(yǎng)液中。壞死的細(xì)胞(Necrosis)胞膜破裂乳酸脫氫酶釋放，分布于培養(yǎng)液中此時(shí)測(cè)得培養(yǎng)液乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細(xì)胞中壞死細(xì)胞(necroticcell)的量，我們稱(chēng)之為

3、LDHn。那么我們就可以計(jì)算細(xì)胞中凋亡或壞死的比率來(lái)衡量細(xì)胞損傷的程度。凋亡%=LDHa(LDHaLDHnLDHv)100壞死%=LDHn(LDHaLDHnLDHv)100死亡%=(LDHaLDHn)(LDHaLDHnLDHv)100其中(LDHaLDHnLDHv)代表細(xì)胞總LHD。因?yàn)榧词刮覀兠看温癜宓募?xì)胞數(shù)相同，但是由于細(xì)胞生長(zhǎng)受多方面影響，所得的細(xì)胞數(shù)量也不一樣，所以每次測(cè)得胞內(nèi)和胞外乳酸脫氫酶的量都會(huì)不一樣，所以不能單純通過(guò)測(cè)上

4、清中LDH的量或測(cè)細(xì)胞總LHD來(lái)評(píng)估細(xì)胞受損的程度，而通過(guò)上清LDH總LDH的比率來(lái)評(píng)估細(xì)胞受損程度是比較符合實(shí)際。另附簡(jiǎn)要操作：吸取細(xì)胞培養(yǎng)瓶中液體置離心管中離心，離心后沉淀于管底的是凋亡小體，上清液中的就是壞死細(xì)胞的LDH將凋亡小體和貼附于培養(yǎng)瓶壁上的細(xì)胞破膜即可測(cè)定凋亡小體和活細(xì)胞的LDH.乳酸脫氫酶（乳酸脫氫酶（LactatedehydrogenaseLDH）是存在于細(xì)胞漿內(nèi)的一種酶，乳酸脫氫酶在生命體中糖代謝中扮演重要角色。在

5、我們培養(yǎng)的細(xì)胞中乳酸脫氫酶分別存在于以下三個(gè)地方：1、存在于活細(xì)胞內(nèi)。若你培養(yǎng)的是貼壁細(xì)胞(viableadherentcells)，那么貼在壁上的就是活細(xì)胞，此時(shí)的乳酸脫氫酶就存在于細(xì)胞內(nèi)，所以測(cè)得貼壁細(xì)胞中的乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細(xì)胞中活細(xì)胞的量，我們稱(chēng)之為L(zhǎng)DHV。2、存在于漂浮于培養(yǎng)液中的凋亡小體(Apoptoticbodies)。由于凋亡小體有細(xì)胞膜，因此凋亡小體中的乳酸脫氫酶也沒(méi)有釋放到胞外。此時(shí)測(cè)得凋亡小體中的

6、乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細(xì)胞中凋亡細(xì)胞(apoptoticcell)的量，我們稱(chēng)之為L(zhǎng)DHa。3、存在于培養(yǎng)液中。壞死的細(xì)胞(Necrosis)胞膜破裂乳酸脫氫酶釋放，分布于培養(yǎng)液中此時(shí)測(cè)得培養(yǎng)液乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細(xì)胞中壞死細(xì)胞(necroticcell)的量，我們稱(chēng)之為L(zhǎng)DHn。那么我們就可以計(jì)算細(xì)胞中凋亡或壞死的比率來(lái)衡量細(xì)胞損傷的程度。凋亡%=LDHa(LDHaLDHnLDHv)100壞死%=LDHn(L

7、DHaLDHnLDHv)100死亡%=(LDHaLDHn)(LDHaLDHnLDHv)100其中(LDHaLDHnLDHv)代表細(xì)胞總LHD。因?yàn)榧词刮覀兠看温癜宓募?xì)胞數(shù)相同，但是由于細(xì)胞生長(zhǎng)受多方面影響，所得的細(xì)胞數(shù)量也不一樣，所以每次測(cè)得胞內(nèi)和胞外乳酸脫氫酶的量都會(huì)不一樣，所以不能單純通過(guò)測(cè)上清中LDH的量或測(cè)細(xì)胞總LHD來(lái)評(píng)估細(xì)胞受損的程度，而通過(guò)上清LDH總LDH的比率來(lái)評(píng)估細(xì)胞受損程度是比較符合實(shí)際。另附簡(jiǎn)要操作：吸取細(xì)胞培養(yǎng)