干細胞內毒素檢測標準操作規(guī)程sop-zk-003

1、GMP質量管理文件編號：SOPZK003第0頁共9頁干細胞內毒素檢測標準操作規(guī)程（SOP）北京賽托森生物科技發(fā)展有限公司質量管理GMP質量管理文件編號：SOPZK003第2頁共9頁品，需調節(jié)被測溶液（或其稀釋液）的pH值，可使用酸、堿溶液或適宜的緩沖液調節(jié)pH值。酸或堿溶液須用細菌內毒素檢查用水在已去除內毒素的容器中配制。緩沖液必須經過驗證不含內毒素和干擾因子。6.供試品細菌內毒素的限值(L)藥典有明確規(guī)定的按照藥典規(guī)定值，如無規(guī)定需經

2、計算得出，具體計算方法見各藥典。7.供試品最大有效稀釋倍數(shù)(MVD)和最小有效稀釋濃度的確定(MVC)最大有效稀釋倍數(shù)是指在試驗中供試品溶液被允許達到稀釋的最大倍數(shù)(1→MVD)，在不超過此稀釋倍數(shù)的濃度下進行內毒素限值的檢測。用以下公式來確定MVD，MVD=cLλ。式中L為供試品的細菌內毒素限值；c為供試品溶液的濃度，當L以EUml表示時，則c為1mlml，當L以EUmg或EUU表示時，c的單位需為mgml或Uml。如供試品為注射用無

3、菌粉末或原料藥，則MVD取1，可計算供試品的最小有效稀釋濃度c=λL；λ為在凝膠法中鱟試劑的標示靈敏度EUml（商品包裝上有標示）。舉例：設設鱟試劑的靈敏度為0.25EUml，即λ=0.25EUml，英國藥典規(guī)定檸檬酸的限值L為0.5IUmg(IU與EU等同)，由于檸檬酸為固體，則可以通過c=λL，確定最小有效稀釋濃度，即MVC=0.250.5=0.5mgml。8.設備和試劑8.1電子天平8.2電熱滅菌干燥箱，溫度能達到250攝氏度8.

4、3恒溫水浴或恒溫培養(yǎng)箱，能滿足恒溫在371℃8.4渦旋混合器8.5無菌工作臺8.6微量加樣器，200ul8.7去熱源一次性吸頭8.8凝集管(10mm75mm)8.9管架8.10錫紙8.11鱟試劑，應具有國家主管部門的批準文號。7.12細菌內毒素國家標準品或細菌內毒素工作標準品，除另有規(guī)定外，應使用由中國藥典生物制品檢定所統(tǒng)一發(fā)放的標準品7.13細菌內毒素檢查用水，內毒素含量應小于0.015EUml7.13細菌內毒素檢查用pH緩沖溶液注：

5、以上試劑推薦使用廈門鱟試劑實驗廠有限公司湛江安度斯生物有限公司及湛江博康海洋生物公司9.實驗器皿去熱源實驗所用的器皿需經處理，取出可能存在的外源性內毒素。通常玻璃器皿首先細菌，再用錫紙包裹放入250℃干燥箱中進行干熱滅菌。而使用不耐熱的塑料器皿，應選用表面無內毒素并且對實驗無干擾的器械。10.鱟試劑的靈敏度符合實驗在本檢查法規(guī)定的條件下，使鱟試劑產生凝集的內毒素的最低濃度即為鱟試劑的標示靈敏度，用EUml表示。當使用新批號的鱟試劑或試驗