流式細胞儀操作規(guī)程-sop_圖文

1、流式細胞儀操作規(guī)程目錄流式細胞儀操作規(guī)程目錄1：淋巴細胞亞群測定及絕對計數：淋巴細胞亞群測定及絕對計數2：活化淋巴細胞亞群、記憶：活化淋巴細胞亞群、記憶T及純真及純真T的檢測的檢測3：HLAB27測定測定4：CD55／CD59測定測定5：干細胞檢測和絕對計數：干細胞檢測和絕對計數6：白血病免疫分型測定：白血病免疫分型測定7：淋巴細胞：淋巴細胞T細胞亞群細胞內因子細胞亞群細胞內因子IFNγIL4測定測定8：細胞周期分析：細胞周期分析9：活

2、化血小板檢測：活化血小板檢測10：血小板抗體測定：血小板抗體測定11：紅細胞抗體測定：紅細胞抗體測定12：粒細胞抗體測定：粒細胞抗體測定淋巴細胞亞群測定方法方法流式細胞儀(BeckmanCoulter，貝克曼庫爾特)原理原理：雙三色四色直接免疫熒光法。熒光素標記的各種單克隆抗體加入到全血中，與白細胞膜上相應的抗原結合，經過溶血、洗滌（和固定）等步驟后，在流式細胞儀上進行分析，從而得到淋巴細胞亞群的百分數，加入FlowCount即可得出絕

3、對計數。淋巴細胞表面抗原分布如下：T淋巴細胞：CD3；B淋巴細胞：CD3，CDl9；輔助性T淋巴細胞：CD3CD4；抑制性T淋巴細胞：CD3CD8；NK細胞：CD3CDl656等。根據淋巴細胞膜上CD分子表達的不同，流式細胞儀可以分辨出淋巴細胞及其各種不同的亞群，利用計算機軟件計算出淋巴細胞亞群的百分數，加入FlowCount組會自動得出絕對計數。標本采集與處理標本采集與處理受檢者的準備受檢者的準備檢查對象生活飲食處于日常狀態(tài)。采集部位

4、采集部位靜脈采血抗凝劑抗凝劑EDTA或肝素抗凝血要求要求1樣本量1ml。2樣本應在采集后6小時內處理，冷凍或溶血的標本不能用。3樣本白細胞計數應在4.010.0109L之間。若10.0109L，樣本需要稀釋，用PBS稀釋；若4.0109L，應分離單個核細胞。試劑試劑品牌品牌劑型劑型規(guī)格規(guī)格貯存貯存貝克曼庫爾特貝克曼庫爾特成分成分1：單克隆抗體液體2—8℃(CD45483No.6607013No.6607013CD4556193No.66

5、07073No.6607073CD483No.IM1650No.IM1650同型對照IgG1IgG1IgG1No.IM1672No.IM1672CD319No.IM1293No.IM1293CD31656No.IM2076No.IM2076CD19PC5No.IM2643No.IM2643FlowCount熒光微球No.7547053No.7547053)2：全血溶血試劑(QPrep)液體(No.7546946)A：甲酸液體70ML室溫