《牛蜘蛛腿綜合征檢測(cè) pcr方法》征求

1、ICS 65.020.30CCS B43N Y中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T XXXX-XXXX牛蜘蛛腿綜合征檢測(cè) PCR 方法Detection of arachnomelia syndrome in cattle—PCR method(公開(kāi)征求意見(jiàn)稿 公開(kāi)征求意見(jiàn)稿)202X- 202X- - 發(fā)布 202X- 202X- - 實(shí)施 實(shí)施中

2、華 人 民 共 和 國(guó) 農(nóng) 業(yè) 農(nóng) 村 部 發(fā) 布NY/T XXXX-202X牛蜘蛛腿綜合征檢測(cè) PCR 方法1 范圍本文件描述了牛蜘蛛腿綜合征檢測(cè)的 PCR 方法。本文件適用于西門(mén)塔爾牛、瑞士褐牛、中國(guó)西門(mén)塔爾牛、新疆褐牛、三河牛、蜀宣花牛及其他含有西門(mén)塔爾牛和/或褐牛血緣個(gè)體的蜘蛛腿綜合征的遺傳檢測(cè)。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于

3、本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。 GB/T 19495.2 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求GB/T 27642 牛個(gè)體及親子鑒定微衛(wèi)星 DNA 法農(nóng)業(yè)部 2031 號(hào)公告—14轉(zhuǎn)基因動(dòng)物及其產(chǎn)品成分檢測(cè) 普通牛（Bos taurus）內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因定性PCR方法NY/T 2695 牛遺傳缺陷基因檢測(cè)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T 3446 奶牛短脊椎畸形綜合征檢測(cè)PCR法3 術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3

4、.1 牛蜘蛛腿綜合征 arachnomelia syndrome，AS一種牛的先天性、致死性骨骼系統(tǒng)畸形、臨床表現(xiàn)四肢外觀像“蜘蛛腿”的常染色體遺傳病。注：患病犢牛頭部畸形，包括下頜骨短，上頜骨向下凹陷，上頜前端呈圓錐形，并向上微微翹起；脊柱向背側(cè)彎曲，明顯“蜷縮駝背”狀態(tài)，但肋骨和肩胛骨正常；四肢僵直，骨骼畸形，后肢畸形尤為嚴(yán)重，掌骨和跖骨向內(nèi)側(cè)彎曲與身體平行或呈一定角度，長(zhǎng)骨骨端正常，長(zhǎng)骨骨干比正常犢牛細(xì)而脆弱，外徑和內(nèi)徑偏小但骨密

5、質(zhì)部分的寬度未發(fā)生改變，四肢外觀像“蜘蛛腿”。[來(lái)源：NY/T 2695-2015，3.9，有修改]4 原理根據(jù)褐牛 AS 致因突變位點(diǎn)和西門(mén)塔爾牛 AS 致因突變位點(diǎn)的側(cè)翼序列設(shè)計(jì)特異性引物，并在上游引物 5’端分別引入 HEX 和 FAM 熒光標(biāo)記，隨后對(duì) DNA 樣品進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，獲得與預(yù)期片段大小一致的 PCR 產(chǎn)物。PCR 產(chǎn)物變性解鏈后，經(jīng)毛細(xì)管電泳技術(shù)進(jìn)行片段分離，依據(jù)熒光吸收峰圖鑒定片段長(zhǎng)度，判定基因型，確定待檢樣