魚類膠原蛋白肽的制備及其功能的研究.pdf

1、本論文主要利用酶工程技術(shù)，以漁業(yè)加工的下腳料鯊魚皮和真鯛魚鱗為原料，通過選擇合適的蛋白酶和控制酶解過程，研究開發(fā)魚膠原蛋白肽制品。
　　首先，分別以鯊魚皮和真鯛魚鱗為原料，以對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)的抑制率為指標(biāo)，利用單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化菠蘿蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶酶法制備膠原蛋白肽的最佳工藝條件，表明:在各自最適溫度和最適pH條件下，三種酶酶解鯊魚皮的最適酶量（酶與鯊魚皮重量之比）都為0.2％，最適時(shí)間都為5h。三種酶酶解真鯛

2、魚鱗的最適酶量（酶與真鯛魚鱗重量之比）除胰蛋白酶為0.1％，其他酶都為0.2％，最適時(shí)間都為5h。然后，制得在各種最佳條件下的膠原蛋白肽，把菠蘿蛋白酶酶解鯊魚皮所得肽標(biāo)記為S1，胰蛋白酶酶解鯊魚皮所得肽標(biāo)記為S2，中性蛋白酶酶解鯊魚皮所得肽標(biāo)記為S3，菠蘿蛋白酶酶解真鯛魚鱗所得肽標(biāo)記為Z1，胰蛋白酶酶解真鯛魚鱗所得肽標(biāo)記為Z2，中性蛋白酶酶解真鯛魚鱗所得肽標(biāo)記為Z3。測(cè)定它們對(duì)ACE的半抑制濃度(IC50)，S1，S2，S3，Z1，Z2

3、，Z3對(duì)ACE的IC50分別為4.8，8.4，8.2，6.5，12.0，7.2mg/ml。再把它們分別經(jīng)SephadexG-25凝膠過濾柱層析進(jìn)一步分離純化，測(cè)定各個(gè)峰值部分的肽液對(duì)ACE的抑制效果，只有S1過G25的第一個(gè)峰值部分和Z1過G25的第二個(gè)峰值部分的肽液對(duì)ACE的抑制率超過50％。將這兩個(gè)組分的肽液冷凍干燥，得到干品，分別標(biāo)記為樣品A和樣品B，樣品A和樣品B對(duì)ACE的半抑制濃度分別為4.0mg/ml和2.2mg/ml。對(duì)A

4、CE的抑制效果比過柱前分別提高了1.2和3倍。雖然樣品B對(duì)ACE具有最好的抑制效果，但是它得率很低。如果要生產(chǎn)膠原蛋白肽保健品，S1是最合適的。
　　得到6種膠原蛋白肽干品之后，選取鯊魚皮膠原蛋白肽中對(duì)ACE具有最佳抑制效果的肽S1及真鯛魚鱗膠原蛋白肽中對(duì)ACE具有最佳抑制效果的肽Z1，對(duì)它們進(jìn)行了基本成分的測(cè)定。結(jié)果顯示，膠原蛋白肽中粗蛋白含量豐富，分別達(dá)到87.5％和86.3％，粗脂肪含量較少，分別為0.15％和0.12％，水

5、分含量分別為11％和5.5％，灰分含量分別為1.0％和0.4％;膠原蛋白肽中對(duì)人體有益的金屬元素含量豐富，S1中含量從高到低依次為K、Na、Ca、Fe、Cu、Zn，Z1中從高到低依次為Na、K、Ca、Fe、Cu、Zn，對(duì)人體有害的重金屬含量都大大低于國(guó)家食品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的安全劑量;氨基酸種類豐富，人體必需氨基酸分別為21.41％和13.35％，是質(zhì)量較好的蛋白源;用此方法得到的膠原蛋白肽的分子量范圍為2-3kDa容易為人體所吸收，同時(shí)也進(jìn)一