四川省動物源金黃色葡萄球菌耐藥表型檢測及主要耐藥機制研究.pdf

1、金黃色葡萄球菌是常見的人獸共患病原菌，對其進行耐藥性研究具有重要意義。由于獸醫(yī)臨床抗菌藥物的不規(guī)范使用，動物源金黃色葡萄球菌耐藥性日益嚴重。對動物源金黃色葡萄球菌進行藥物敏感性試驗，主要耐藥基因檢測及分子流行病學研究，有助于了解耐藥菌株的產(chǎn)生和傳播趨勢，為臨床合理、規(guī)范用藥提供理論依據(jù)。
　　本文自2007年到2013年從不同動物源共分離得到236株金黃色葡萄球菌。對分離菌株進行對11種抗生素的藥物敏感性檢測后發(fā)現(xiàn)，除對苯唑西林表

2、現(xiàn)出較高敏感性（敏感率大于80％）外，對其他藥物呈不同水平耐藥性，菌株對青霉素、氨芐西林、慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、紅霉素、阿奇霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星和磺胺異噁唑的耐藥率分別達92.8％、90.25％、47.88％、36.87％、39.83％、77.12％、58.47％、40.68％、26.28％、87.71％。本次菌株多重耐藥現(xiàn)象嚴重，以6耐、9耐菌株為主。隨著時間推移，菌株對不同抗菌藥物耐藥率呈上升趨勢。不同動物源菌株耐藥性比較

3、可見，豬源菌株對紅霉素、阿奇霉素耐藥率顯著高于禽源金黃色葡萄球菌(P＜0.05)，而對其余9種藥物的耐藥率在不同動物源菌株間無顯著性差異.(P＞0.05)。
　　金黃色葡萄球菌血漿凝固酶檢測試驗顯示，236株金黃色葡萄球菌菌株中檢出159株血漿凝固酶陽性菌株;且血漿凝固酶陽性菌株對青霉素G、苯唑西林、慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、環(huán)丙沙星耐藥率顯著高于血漿凝固酶陰性菌株(P＜0.05)，多重耐藥譜較血漿凝固酶陰性菌株更廣泛。pvl

4、、tst毒力基因的PCR擴增結(jié)果顯示，236株金黃色葡萄球菌尚未檢出相關毒力基因。
　　本試驗建立了blaZ-mecA二重PCR體系及aacA-aphD-ermA-mecA三重PCR體系，以及擴增blaZ、mecA、aacA-aphD、ermA、ermB、ermC等6種耐藥基因的普通PCR體系。不同耐藥基因的PCR擴增結(jié)果顯示，介導β-內(nèi)酰胺類耐藥的基因blaZ、mecA檢出率為63.98％和10.59％;介導大環(huán)內(nèi)酯類、林可胺類

5、、鏈陽霉素B類(MLSB)的耐藥基因ermA、ermB、ermC檢出率分別為11.44％、83.05％和87.29％;介導氨基糖苷類耐藥基因aacA-aphD檢出率43.64％。檢出耐藥基因組合以blaZ+ermB+ ermC與 blaZ+ermB+ ermC+aacA-aphD為主。隨著時間推移，菌株攜帶多耐藥基因種類增加。
　　對24株mecA基因介導的MRSA菌株進行SCCmec分型發(fā)現(xiàn)，2008年及2009年分離株主要為H

6、A-MRSA菌株，占70.83％，2013年分離株主要為CA-MRSA，占20.83％;所有MRSA中，以SCCmecⅢ型為主，共有12株占50％。PFGE分子分型結(jié)果顯示，24株MRSA菌株共分為14個聚類組，命名為A-H組;J組為主要類型，占25％(6/24)。
　　以上結(jié)果說明，四川省不同動物源金黃色葡萄球菌對不同抗菌藥物呈不同水平的耐藥性，菌株對藥物的耐藥率隨時間推移呈上升趨勢，獸醫(yī)臨床應加強對金黃色葡萄球菌耐藥性的監(jiān)測;

7、四川省不同動物源金黃色葡萄球菌漿凝固酶陽性率高達67.37％，且血漿凝固酶陽性菌比陰性菌株具有更嚴重的多重耐藥性，說明致病性菌株長期、普遍存在于金黃色葡萄球菌群中，應加強對菌株血漿凝固酶以及耐藥性的檢測。本次檢測的MRSA SCCmec分型較復雜，其中以SCCmecⅢ型為主，且屬于Ⅲ型菌株攜帶的耐藥基因最多。隨分離時間的推移，菌株由HA-MRSA逐步向CA-MRSA轉(zhuǎn)變，且攜帶的耐藥基因更加豐富。MRSA菌株呈多克降流行，獸醫(yī)臨床應長期