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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:近年來(lái)隨著有生物活性的能夠進(jìn)行多突觸傳遞的嗜神經(jīng)示蹤病毒的發(fā)現(xiàn)、改造與應(yīng)用,有關(guān)調(diào)控內(nèi)臟功能的中樞核團(tuán)定位和功能認(rèn)識(shí)得以深化,相關(guān)中樞核團(tuán)之間的神經(jīng)解剖學(xué)通路變得更加明晰。本研究運(yùn)用偽狂犬病毒(pseudorabies virus, PRV)轉(zhuǎn)突觸示蹤技術(shù)和熒光標(biāo)記技術(shù)試圖確定中樞神經(jīng)系統(tǒng)參與調(diào)控小鼠腎臟功能的相關(guān)神經(jīng)核團(tuán),以及這些核團(tuán)之間的神經(jīng)解剖學(xué)投射通路。
方法:將嗜神經(jīng)示蹤病毒PRV-614注入19只成年雄性C5
2、7BL/6J小鼠的左側(cè)腎臟上極,按照動(dòng)物的不同生存期限無(wú)痛處死后制備冰凍切片,用熒光免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)脊髓、腦干(延髓和中腦)中PRV-614感染神經(jīng)元、色氨酸羥化酶(TPH)和酪氨酸羥化酶(TH)陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)。
結(jié)果:1.PRV-614經(jīng)小鼠腎臟注射后第3d,少量的PRV-614感染神經(jīng)元逆行示蹤標(biāo)記在脊髓 T9的IML區(qū)。
2.注射PRV-614后第4d,少量的PRV-614感染神經(jīng)元發(fā)現(xiàn)在脊髓T8-10的
3、IML區(qū)、IC區(qū)和CAN區(qū),以及延髓頭端腹外側(cè)核。
3.注射PRV-614后第5d,較多的PRV-614感染神經(jīng)元發(fā)現(xiàn)在脊髓T7-12的IML區(qū)、IC區(qū)和CAN區(qū)等,延髓頭端腹內(nèi)側(cè)核、延髓頭端腹外側(cè)核、延髓中縫核、孤束核、A5區(qū)域、藍(lán)斑核及亞藍(lán)斑核等;較少的PRV-614感染神經(jīng)元發(fā)現(xiàn)在中腦PPTg和LDTg區(qū)等。
4.注射PRV-614后第6d,在脊髓幾乎未發(fā)現(xiàn)PRV-614感染神經(jīng)元。較多的PRV-614感染神經(jīng)
4、元發(fā)現(xiàn)在延髓頭端腹內(nèi)側(cè)核、延髓頭端腹外側(cè)核、延髓中縫核、A5區(qū)域、藍(lán)斑核及亞藍(lán)斑核等,以及中腦PPTg和LDTg區(qū)。其中PRV-614感染神經(jīng)元主要發(fā)現(xiàn)在LDTg頭端和中間部位,以及PPTg中部和尾部。PRV-614/TPH雙重標(biāo)記神經(jīng)元主要分布在 LDTg頭端,而PRV-614/TH神經(jīng)元分散在 LDTg中在3個(gè)部位。PRV-614/TPH和PRV-614/TH神經(jīng)元主要位于PPTg(cPPTg)尾側(cè)。
結(jié)論:1.從小鼠腎臟
5、注射的PRV-614經(jīng)突觸逆行傳遞到達(dá)中樞核團(tuán)具有時(shí)空表達(dá)特異性。
2.主要調(diào)節(jié)腎臟交感神經(jīng)活性的脊髓節(jié)段范圍可能是T8-10,其中T9尤為重要。
3.延髓頭端腹外側(cè)核是主要調(diào)節(jié)腎臟TH陽(yáng)性交感神經(jīng)活性的中樞核團(tuán),而延髓中縫核是主要調(diào)節(jié)腎臟TPH陽(yáng)性交感神經(jīng)活性的中樞核團(tuán)。
4.腦橋中A5區(qū)域、藍(lán)斑核及亞藍(lán)斑核是主要調(diào)節(jié)腎臟TH陽(yáng)性交感神經(jīng)活性的中樞核團(tuán)。
5.LDTg頭部和PPTg尾部均參與腎臟
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