四環(huán)素開關(guān)誘導(dǎo)的shRNAs靶向長鏈非編碼RNA CCAT2抑制膀胱癌細(xì)胞的表型.pdf

1、背景與目的：
　　膀胱癌的發(fā)病伴隨著基因突變,由于目前對膀胱癌發(fā)病機(jī)制缺乏深入了解，導(dǎo)致在膀胱癌的治療上存在較大的局限，如效果差，缺乏靶向性，副作用多。長鏈非編碼RNA在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的調(diào)控作用是近年來的研究熱點(diǎn)。研究表明，多種長鏈非編碼RNA在腫瘤的組織中異常表達(dá)，影響腫瘤的生長及患者的預(yù)后。長鏈非編碼RNA CCAT2是一個(gè)熟為人知的原癌基因，可促進(jìn)多種腫瘤的發(fā)展。我們研究了 CCAT2在膀胱癌中相對表達(dá)水平，并檢測其對膀胱癌

2、細(xì)胞的表型影響。另外，我們還合成了靶向針對CCAT2的四環(huán)素誘導(dǎo)短發(fā)夾RNA(shRNA）來抑制膀胱癌細(xì)胞的惡性表型。
　　方法與結(jié)果：
　　我們提取了配對膀胱癌組織和膀胱癌細(xì)胞中的RNA，并利用實(shí)時(shí)qRT-PCR方法檢測CCAT2在配對膀胱癌組織和細(xì)胞中的相對表達(dá)水平。數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，CCAT2在膀胱癌組織中的表達(dá)水平顯著高于癌旁組織的表達(dá)水平，并且CCAT2在膀胱癌細(xì)胞的表達(dá)水平也顯著高于正常膀胱上皮細(xì)胞的表達(dá)水平。高表達(dá)

3、的CCAT2與膀胱癌的組織學(xué)分級和TMN分期有關(guān)。另外，我們使用CCAT2高表達(dá)的膀胱癌細(xì)胞株（T24和5637）進(jìn)行下一步的功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。研究結(jié)果表明，沉默CCAT2可以顯著抑制膀胱癌細(xì)胞的增殖，遷移能力，并促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞凋亡。為了能人工控制CCAT2的表達(dá)水平，我們利用四環(huán)素開關(guān)來合成了靶向針對CCAT2的四環(huán)素誘導(dǎo)shRNA。研究結(jié)果表明，靶向針對CCAT2的四環(huán)素誘導(dǎo)shRNA可以抑制CCAT2的表達(dá)水平呈劑量效應(yīng)，并且能有效抑制