產紫杉烷真菌Pestalotiopsis malicola的EMS誘變育種及NK-36b的細胞水平遺傳分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、紫杉烷類化合物最初是從植物中得到的天然產物，結構分類屬于二萜類，又稱紫杉烷二萜。其中，紫杉醇是一種高效、低毒、廣譜、作用機制獨特的天然抗腫瘤藥物。紫杉烷類藥物的市場供應受制于原料來源和制備技術兩方面，藥價昂貴。真菌大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵生產具有廣闊的發(fā)展前景，將產生巨大的社會效應和市場效益。
　　 本實驗室分離得到一株產紫杉烷類化合物的擬盤多毛孢屬真菌Pestalotiopsis malicola，經HPLC、LC-MS、NMR驗證其發(fā)

2、酵產物中包括紫杉醇、10-DAB在內的多種紫杉烷衍生物。為了提高紫杉烷產量，本文采用化學誘變的方法對P.malicola進行誘變育種。實驗以EMS作為誘變劑，摸索不同濃度下EMS對P.malicola的致死效果，并選取終濃度0.4M的EMS進行誘變育種?，F已獲得253株突變菌株，并且經HPLC檢測，部分突變菌株次生代謝產物含量與野生型相比明顯增多。我們對產紫杉烷衍生物含量增多的突變株進行單孢分離并多次傳代培養(yǎng)，結果表明突變菌株性狀遺傳穩(wěn)

3、定。
　　 本實驗室通過根癌農桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導的原生質體轉化(ATMT)篩選得到一株產紫杉醇能力缺失的轉化子Bu95。本文通過反向PCR和染色體步移方法對插入Bu95的T-DNA左側翼序列進行了分析并測序。
　　 本論文的另一項重要工作是對本實驗室篩選的一株腐生真菌NK-36b進行細胞水平的遺傳分析。NK-36b的次生代謝產物非常豐富，除紫杉烷類化合物外，其發(fā)酵產物中還含有大

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