外周血清素對離體Sprague-Dawley大鼠成骨細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:
　　研究血清素與SD大鼠成骨細(xì)胞（Osteoblasts，OBs）的劑量相關(guān)性。
　　方法:
　?、儋N壁培養(yǎng)與分離新生大鼠顱骨細(xì)胞。通過觀察細(xì)胞形態(tài)和熒光染色鑒定。
　?、谙騊3代細(xì)胞培養(yǎng)液中混進(jìn)不同濃度（10-5 mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L、10-9 mol/L、0mol/L）血清素干預(yù)。
　?、鄣?天用MTT法分析干預(yù)因素與增殖的關(guān)系。
　

2、　④第10天分別用微量酶標(biāo)法測堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）水平和免疫熒光法測Ⅰ型膠原蛋白（Collagen-Ⅰ，Col-Ⅰ）水平分析干預(yù)因素與分化的關(guān)系。
　?、莸?5天用ELISA法測骨鈣素（Osteocalcin，OCN）水平，分析干預(yù)因素與分化的關(guān)系。
　　統(tǒng)計學(xué)方法
　　通過SPSS20.0收集整理并分析數(shù)據(jù)。計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s）表示，不同組間比較采用單因素方差分析

3、，多組間兩兩之間比較采用LSD-t檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　不同濃度（10-5 mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L、10-9 mol/L、0mol/L）血清素干預(yù)， MTT法測得平均光密度值分別為：0.400±0.028，0.379±0.023，0.379±0.047，0.401±0.038，0.420±0.038，0.618±0.064，任意組與空白

4、對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；微量酶標(biāo)法測得ALP平均水平分別為：0.046±0.002，0.017±0.002，0.026±0.002，0.046±0.002，0.051±0.002，0.073±0.003，任意組與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；免疫熒光法測得Col-Ⅰ平均水平分別為：45.581±6.378，33.110±1.161，23.327±0.784，15.731±2.243，27.331

5、±2.430，33.592±2.684，除10-6 mol/L組外任意組與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；ELISA法測得 OCN平均水平分別為：3.002±1.639，1.711±0.370，2.193±0.551，2.439±1.469，2.703±1.175，8.021±3.036，任意組與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論:
　　血清素對成骨細(xì)胞成負(fù)性效應(yīng)，這種負(fù)效應(yīng)與血清