ARID1A和PIK3CA在子宮內(nèi)膜異位相關(guān)性卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的意義及相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、研究目的:卵巢癌是婦科三大惡性腫瘤之一，嚴(yán)重威脅女性健康。卵巢透明細(xì)胞癌（以下簡稱OCCC）和卵巢子宮內(nèi)膜樣癌(以下簡稱OEAC)是其中的兩個(gè)亞型，與子宮內(nèi)膜異位癥密切相關(guān)。研究認(rèn)為，相關(guān)腫瘤抑制因子及參與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和增殖的信號(hào)傳導(dǎo)通路關(guān)鍵基因的突變是促進(jìn)二者發(fā)生、發(fā)展的主要因素，但潛在的分子機(jī)制目前尚不十分清楚。近年來，隨著對OCCC和OEAC研究的不斷深入，與二者密切相關(guān)的抑癌基因ARID1A和癌基因PIK3CA引起了廣泛的關(guān)注。

2、本研究主要從蛋白和基因水平兩方面檢測ARID1A和PIK3CA在子宮內(nèi)膜異位相關(guān)卵巢癌(OCCC和OEAC)中的表達(dá)情況，進(jìn)而探討這兩個(gè)指標(biāo)在OCCC和OEAC的發(fā)生、發(fā)展中的作用，以揭示OCCC和OEAC潛在的分子發(fā)病機(jī)制。
　　研究方法:①選取解放軍總醫(yī)院病理科存檔的63例OCCC和43例OEAC組織樣本作為實(shí)驗(yàn)組，30例子宮內(nèi)膜異位囊腫為作為良性對照，25例在位正常子宮內(nèi)膜做正常對照組，然后利用免疫組化法檢測各組p110α、

3、p-AKT、p-mTOR、BAF250a、PTEN、ER、PR、Ki-67、p53的蛋白表達(dá)水平并分析各蛋白與卵巢癌患者的臨床病理參數(shù)的關(guān)系;②利用RNA scope方法檢測OCCC組、OEAC組和異位囊腫組中ARID1A mRNA的表達(dá);利用熒光定量PCR方法檢測實(shí)驗(yàn)組與良性囊腫對照組PIK3CA基因的突變，并分析兩種基因異常與臨床病理參數(shù)的關(guān)系;③觀察ARID1A和PIK3CA基因沉默和過表達(dá)后對卵巢透明細(xì)胞癌ES-2、卵巢子宮內(nèi)膜

4、樣癌TOV-112D細(xì)胞的增值率、細(xì)胞周期、侵襲遷移能力的影響及其下游基因表達(dá)的變化。
　　研究結(jié)果:①在OEAC組和OCCC組中，p-AKT的表達(dá)與p110α的表達(dá)呈正相關(guān)（分別為p＜0.001、p=0.030）;②在OCCC組中，ARID1A mRNA基因的低表達(dá)，與FIGO分期較早(p=0.048)、BAF250a的缺失表達(dá)(p＜0.01)呈正相關(guān);在OEAC組中，ARID1A mRNA表達(dá)水平與p53蛋白的表達(dá)水平(p=0

5、.001)、BAF250a蛋白的表達(dá)水平(p=0.035)呈正相關(guān);③在OCCC組中PIK3CA基因突變的患者常處于FIGO分期的較早期(p=0.006)、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(p=0.024);PIK3CA基因突變是延長OCCC的患者無進(jìn)展生存期的重要因素;在OEAC組中PIK3CA基因突變與腫瘤直徑(p=0.025）呈正相關(guān);④在OCCC組中，ARID1A mRNA低表達(dá)患者的總生存期長、預(yù)后較好(p=0.040），PIK3CA基因突變的患

6、者PFS預(yù)后較好(p=0.034）;⑤細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)顯示，沉默ARID1A和過表達(dá)PIK3CA基因后，ES-2細(xì)胞和TOV-112D細(xì)胞增殖能力提高(p＜0.05)，G2期細(xì)胞減少，S期細(xì)胞增多，細(xì)胞遷移能力增強(qiáng)(p＜0.05);并且其所在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路下游蛋白AKT和STAT3的磷酸化水平明顯增高，下游基因IL-6、NF-κB以及miRNA19b表達(dá)增加(p＜0.05)。
　　研究結(jié)論:
　　ARID1A與PIK3CA異常在子

7、宮內(nèi)膜異位相關(guān)卵巢癌的發(fā)生或（和）發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。
　　1)ARID1A缺失發(fā)生在子宮內(nèi)膜異位惡性轉(zhuǎn)化為卵巢癌的早期，其可能促進(jìn)腫瘤的發(fā)展，并可能參與炎癥的發(fā)生，與NF-κB/IL6信號(hào)通路有關(guān);
　　2)PIK3CA突變發(fā)生在OCCC和OEAC的早期，但對促進(jìn)腫瘤發(fā)展的作用不顯著;PIK3CA參與NF-κB/IL6信號(hào)通路，進(jìn)而激活JAK/STAT信號(hào)通路，參與PI3K/AKT信號(hào)通路，增加miRNA19b的表達(dá)，