血管緊張素Ⅱ調控SK2通道參與犬心房顫動發(fā)生的研究.pdf

1、目的：心房顫動(Atrial fibrillation，AF)是臨床最常見的心律失常之一，明顯增加患者的死亡率及致殘率，是一種與年齡密切相關的漸進性疾病，并可使?jié)撛诘男呐K疾病惡化。AF的發(fā)病機制迄今為止不明，已經(jīng)提出了許多假說，從 AF局灶起源假說到多發(fā)子波折返假說再到局灶驅動伴顫動樣傳導、肺靜脈觸發(fā)起源假說，但沒有一種學說能解釋AF所有的現(xiàn)象。盡管觸發(fā)和折返作為AF的發(fā)生機制逐漸被接受，但AF的維持基質仍有許多尚未闡明的問題。新近發(fā)現(xiàn)

2、的SK2通道為小電導鈣激活鉀通道（Small conductance Ca2+-activated K+channel,SK通道）的一個亞型，因具有心房選擇性并且通道的改變與AF發(fā)生有關，成為近年大家研究的熱點之一。該通道對鉀離子具有選擇性，對電壓不敏感而對Ca2+高度敏感。業(yè)已證實AF的電重構涉及細胞內Ca2+超載，循環(huán)或組織血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡI，AngⅡ)的增加可使細胞內鈣進一步增多導致AF加重。而SK2通道對細

3、胞內鈣高度敏感，因此我們推測AngⅡ導致AF加重可能涉及了對SK2通道的調控，然而通過文獻的復習未見相關報道。因此本研究的目的是探討AngII對SK2通道的調控在AF發(fā)生中的作用機制。
　　方法：健康成年比格犬25只隨機分為5組（每組5只）：分別為假手術組（Sham組）、起搏組（Pacing組）、起搏+血管緊張素Ⅱ組（Pacing+AngⅡ組）、起搏+纈沙坦組（Pacing+Valsartan組）、起搏+血管緊張素Ⅱ+纈沙坦組（P

4、acing+AngⅡ+Valsartan組）。實驗各組用藥前及用藥后常規(guī)測量血壓，每次測量3次取平均值。其中加藥組于起搏前2周分別給予AngⅡ110ng/kg/min皮下持續(xù)微量泵入或（和）Valsartan30mg/kg/d口服。給藥后所有犬經(jīng)戊巴比妥鈉麻醉后常規(guī)氣管插管機械輔助通氣，檢測心電圖變化，經(jīng)右側股靜脈插入起搏電極至右心房，電極近端連接電生理起搏系統(tǒng)，除 Sham組外其余各組均給予快速心房起搏（頻率600次/分）8小時，起搏

5、前及起搏后每小時測量心房有效不應期（Atrial effective refractory period，AERP）和AF發(fā)生頻率及持續(xù)時間。起搏結束后抽取動物靜脈血離心，檢測血清AngII濃度變化，開胸取左右心房組織檢測組織AngII濃度變化，Western Blotting方法檢測各組右心房組織SK2通道蛋白表達的變化。
　　結果：
　　1.血壓的變化：AngⅡ預處理2周后，Pacing+AngⅡ組血壓上升45±3.53

6、mmHg與Sham組比較，差異明顯(p<0.01)；其余各組與Sham組比較差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）。
　　2.起搏后AERP的變化：與Sham組比較，Pacing組、Pacing+AngⅡ組、Pacing+AngⅡ+Valsartan組AERP明顯縮短（p<0.01），Pacing+AngⅡ組縮短最為顯著，Pacing+Valsartan組無明顯縮短（p>0.05）；與Pacing組比較，Pacing+AngⅡ組AERP

7、縮短（p<0.01），Pacing+Valsartan組、Pacing+AngⅡ+Valsartan組AERP延長（p<0.01）。
　　3.起搏后血清及左右心房組織AngⅡ濃度變化：與Sham組比較，Pacing組血清和RA組織AngⅡ濃度明顯升高（p<0.01），LA組織AngⅡ濃度也升高（p<0.05），Pacing+Valsartan組血清及左右心房組織AngⅡ濃度雖有所升高，但差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）。
　

8、　4.各組Burst刺激誘發(fā)AF的頻率和時間變化：與Sham組比較，Pacing組、Pacing+AngⅡ組誘發(fā)AF的頻率和時間明顯增加（p<0.01），Pacing+Valsartan組無明顯差異（p>0.05）；與Pacing組比較，Pacing+AngⅡ組誘發(fā)AF的頻率和時間增多（p<0.01），而Pacing+Valsartan組、Pacing+AngⅡ+Valsartan組明顯減少（p<0.01）。
　　5.Wester

9、n blotting檢測 SK2通道蛋白相對表達量結果顯示：與Sham組比較，Pacing組、Pacing+AngⅡ組、Pacing+AngⅡ+Valsartan組蛋白表達明顯下降(p<0.01)，其中Pacing+AngⅡ組下降最為顯著，Pacing+Valsartan組也有下降，但明顯沒有其余各組下降明顯(p<0.05)；與Pacing組比較，Pacing+AngⅡ組蛋白表達下降（p<0.01），Pacing+Valsartan組增

10、多（p<0.01），Pacing+AngⅡ+Valsartan組也有所上調（p<0.05）。
　　結論：
　　1.快速起搏可導致心房發(fā)生電重構，其中AngⅡ可加重心房的電重構，而Valsartan可減輕心房的電重構減少AF的發(fā)生。
　　2.快速起搏可導致血清及左右心房組織AngⅡ濃度增加，這是易于AF發(fā)生和維持的可能原因之一。
　　3.SK2通道可能參與了心房的電重構過程，快速起搏可導致心肌組織 SK2通道蛋白表