海兔素對酒精性肝損傷大鼠小腸黏膜屏障的保護作用研究.pdf

1、目的：研究海兔素（Aplysin）對酒精性肝損傷大鼠血漿中D-乳酸（D-LA）、二胺氧化酶（DAO）、腸脂肪酸結(jié)合蛋白（FABP2）和炎性因子（TNF-α、TGF-β）及腸組織中叉頭樣轉(zhuǎn)錄因子O4（FOXO4）等的影響，以初步探討海兔素對酒精性肝損傷大鼠腸黏膜損傷的保護作用及初步作用機制。
　　方法：
　　1.動物分組及模型建立：兩月齡健康雄性Wistar大鼠60只，按體重隨機分為4組，每組15只。酒精模型組給予56℃白酒灌

2、胃，第1周5.5ml/(kg·bw·d)，第2周7.5ml/(kg·bw·d)，第3周8.0ml/(kg·bw·d)，第4周9.0ml/(kg·bw·d)，第5周至第8周11ml/(kg·bw·d)；海兔素低、高劑量組首先分別給予Aplysin100、150mg/(kg·bw·d)灌胃，1h后再給予與模型組相同劑量的酒精灌胃；空白對照組灌胃給予10ml/(kg·bw·d)生理鹽水，實驗共持續(xù)8周。大鼠末次灌胃后，禁食12h，按體重給予3

3、％戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉，腹主動脈取血及小腸組織。
　　2.透射電鏡觀察大鼠小腸超微結(jié)構(gòu)變化。
　　3.酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測大鼠血漿中FABP2、TNF-α、TGF-β、D-LA及DAO濃度。
　　4.免疫組化實驗檢測小腸組織中FOXO4的表達情況，計算其陽性表達率。
　　結(jié)果：
　　1.透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，空白對照組小腸上皮柱狀細胞排列整齊、緊密，微絨毛豐富，緊密連接結(jié)構(gòu)清晰完整；酒精模

4、型組大鼠小腸上皮細胞表面微絨毛排列稀疏，細胞間緊密連接腫大，海兔素高、低劑量組小腸上皮柱狀細胞及微絨毛排列情況較酒精模型組得到不同程度改善，緊密連接腫脹減輕；
　　2.酒精模型組大鼠血漿中D-LA、DAO和FABP2的濃度顯著增加（P<0.05），而海兔素干預(yù)后，可有效抑制酒精誘導的血漿D-LA、DAO和FABP2的濃度升高（P<0.05）；
　　3.免疫組化結(jié)果顯示，酒精模型組小腸組織FOXO4表達水平明顯降低，較空白對照

5、組OD值降低約50%（P<0.05）；海兔素低、高劑量組FOXO4的表達水平顯著增高，OD值均顯著高于模型組（P<0.05）。
　　4.酒精模型組大鼠血漿中炎性因子TNF-α、TGF-β濃度均較空白對照組顯著升（P<0.05），而海兔素低、高劑量組血漿中TNF-α、TGF-β濃度均較酒精模型組明顯降低（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.通過對小腸組織超微結(jié)構(gòu)的觀察、血漿中D-LA、DAO及FABP2水平的檢測，初步