海兔素對(duì)酒精性肝損傷大鼠小腸黏膜屏障的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：研究海兔素（Aplysin）對(duì)酒精性肝損傷大鼠血漿中D-乳酸（D-LA）、二胺氧化酶（DAO）、腸脂肪酸結(jié)合蛋白（FABP2）和炎性因子（TNF-α、TGF-β）及腸組織中叉頭樣轉(zhuǎn)錄因子O4（FOXO4）等的影響，以初步探討海兔素對(duì)酒精性肝損傷大鼠腸黏膜損傷的保護(hù)作用及初步作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.動(dòng)物分組及模型建立：兩月齡健康雄性Wistar大鼠60只，按體重隨機(jī)分為4組，每組15只。酒精模型組給予56℃白酒灌

2、胃，第1周5.5ml/(kg·bw·d)，第2周7.5ml/(kg·bw·d)，第3周8.0ml/(kg·bw·d)，第4周9.0ml/(kg·bw·d)，第5周至第8周11ml/(kg·bw·d)；海兔素低、高劑量組首先分別給予Aplysin100、150mg/(kg·bw·d)灌胃，1h后再給予與模型組相同劑量的酒精灌胃；空白對(duì)照組灌胃給予10ml/(kg·bw·d)生理鹽水，實(shí)驗(yàn)共持續(xù)8周。大鼠末次灌胃后，禁食12h，按體重給予3

3、％戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉，腹主動(dòng)脈取血及小腸組織。
　　2.透射電鏡觀察大鼠小腸超微結(jié)構(gòu)變化。
　　3.酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)大鼠血漿中FABP2、TNF-α、TGF-β、D-LA及DAO濃度。
　　4.免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小腸組織中FOXO4的表達(dá)情況，計(jì)算其陽(yáng)性表達(dá)率。
　　結(jié)果：
　　1.透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，空白對(duì)照組小腸上皮柱狀細(xì)胞排列整齊、緊密，微絨毛豐富，緊密連接結(jié)構(gòu)清晰完整；酒精模

4、型組大鼠小腸上皮細(xì)胞表面微絨毛排列稀疏，細(xì)胞間緊密連接腫大，海兔素高、低劑量組小腸上皮柱狀細(xì)胞及微絨毛排列情況較酒精模型組得到不同程度改善，緊密連接腫脹減輕；
　　2.酒精模型組大鼠血漿中D-LA、DAO和FABP2的濃度顯著增加（P<0.05），而海兔素干預(yù)后，可有效抑制酒精誘導(dǎo)的血漿D-LA、DAO和FABP2的濃度升高（P<0.05）；
　　3.免疫組化結(jié)果顯示，酒精模型組小腸組織FOXO4表達(dá)水平明顯降低，較空白對(duì)照

5、組OD值降低約50%（P<0.05）；海兔素低、高劑量組FOXO4的表達(dá)水平顯著增高，OD值均顯著高于模型組（P<0.05）。
　　4.酒精模型組大鼠血漿中炎性因子TNF-α、TGF-β濃度均較空白對(duì)照組顯著升（P<0.05），而海兔素低、高劑量組血漿中TNF-α、TGF-β濃度均較酒精模型組明顯降低（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.通過對(duì)小腸組織超微結(jié)構(gòu)的觀察、血漿中D-LA、DAO及FABP2水平的檢測(cè)，初步