海兔素對(duì)刀豆蛋白A誘導(dǎo)大鼠肝損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：研究海兔素（Aplysin）對(duì)刀豆蛋白A誘導(dǎo)的肝損傷大鼠肝臟組織形態(tài)學(xué)及血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）、腫瘤壞死因子-α(TNF-α）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）等的影響，以初步探討海兔素對(duì)刀豆蛋白A誘導(dǎo)的肝損傷的保護(hù)作用及初步作用機(jī)制。
　　方法：1.動(dòng)物分組及模型建立：兩月齡健康雄性Wistar大鼠40只，按體重隨機(jī)分為4組（正常對(duì)照組、刀豆蛋白A模型組、海兔素低劑量組、海

2、兔素高劑量組），每組10只。刀豆蛋白A模型組與海兔素低、高劑量組給予刀豆蛋白A15 mg/(kg?bw?w)尾靜脈注射，連續(xù)8周，建立大鼠肝損傷模型；模型建立的同時(shí)，正常對(duì)照組、刀豆蛋白 A模型組每日給予大豆油灌胃，海兔素低、高劑量組給予100、150 mg/kg海兔素+大豆油灌胃，共持續(xù)8周后，于末次灌胃后禁食12 h后，按體重給予3％戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉，腹主動(dòng)脈取血及留取肝臟組織。2. HE染色觀察肝組織形態(tài)學(xué)改變；3.

3、Masson Trichrome及天狼星紅染色觀察肝組織纖維化狀況；4.全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)大鼠血清ALT、AST及LDH水平；5.酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)大鼠血清TNF-α和TGF-β1水平。
　　結(jié)果：1. HE染色病理觀察結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，刀豆蛋白A模型組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)模糊紊亂，纖維組織增生明顯，可見灶狀壞死及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，膠原纖維明顯增多，海兔素低、高劑量組大鼠肝細(xì)胞壞死程度與模型組比較均有不同程度改善

4、，肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂程度減輕，炎性細(xì)胞減少，且海兔素高劑量組大鼠肝細(xì)胞壞死的改善程度較低劑量組明顯；2. Masson染色結(jié)果顯示，刀豆蛋白A模型組膠原纖維則較正常對(duì)照組增多，纖維間隔形成，可見弓形纖維，形成假小葉；海兔素干預(yù)后膠原纖維表達(dá)狀況均有所改善，匯管區(qū)及小葉內(nèi)、小葉間隔均較模型組減少，且海兔素高劑量組膠原纖維表達(dá)更低；3.天狼星紅染色結(jié)果顯示，刀豆蛋白A模型組則出現(xiàn)大量膠原纖維，并伴有明顯膠原纖維增生和假小葉的出現(xiàn)；與刀豆蛋白 A

5、模型組比較，海兔素高劑量組肝組織膠原纖維增生明顯減少。4.與正常對(duì)照組比較，模型組大鼠血清ALT、AST、LDH和TNF-α及TGF-β1水平均顯著升高（P<0.05），海兔素低、高劑量組血清 ALT、AST、TNF-α水平均較刀豆蛋白 A模型組降低（P<0.05），且海兔素高劑量組降低程度比海兔素低劑量組大（P<0.05）。海兔素高劑量組血清LDH及TGF-β1水平均較刀豆蛋白A模型組顯著降低（P<0.05），在海兔素低劑量組雖然有所