鈉鉀合金注射式消融方法抗小鼠EMT6乳腺癌細(xì)胞移植瘤實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：液態(tài)堿金屬是新興的熱化學(xué)微創(chuàng)消融惡性腫瘤手段。本研究嘗試采用鈉鉀合金（NaK合金）注射式消融方法治療小鼠 EMT6乳腺癌細(xì)胞移植瘤，探討該治療手段治療腫瘤的可行性，并動(dòng)態(tài)觀察評(píng)估其治療的有效性。
　　方法：
　　1.動(dòng)物采用15只6周齡平均重量20g的BALB/c雌鼠。
　　2.利用固態(tài)金屬鈉和金屬鉀在常溫常壓硅油保護(hù)下制備液態(tài) NaK合金，并保存于硅油中。
　　3.將凍存的EMT6小鼠乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行傳代培

2、養(yǎng)，收集培養(yǎng)好的腫瘤細(xì)胞重懸至2×107/ml，向每只小鼠右后腿腹股溝皮下注射0.2ml細(xì)胞懸液。
　　4.接種腫瘤細(xì)胞后第10天根據(jù)腫瘤生長(zhǎng)體積及形狀將小鼠分為A、B兩個(gè)治療組，即腫瘤完全消融組與部分消融組，每組5只，剩下5只為C組對(duì)照組。
　　5.消融治療臺(tái)為帶有四壁玻璃槽，將熱電偶插入腫瘤中心位置以便監(jiān)測(cè)及收集消融過(guò)程腫瘤中心溫度，利用紅外熱像儀捕獲消融過(guò)程小鼠體表熱效應(yīng)的紅外圖像。
　　6.采用一次性胰島素注射

3、器將液態(tài)NaK合金注入A、B兩治療組小鼠腫瘤內(nèi)進(jìn)行熱化學(xué)消融治療，C組小鼠不進(jìn)行治療。治療結(jié)束后立即在每組中處死1只小鼠取出殘留組織或腫瘤制成病理切片。其余小鼠放回籠內(nèi)連續(xù)測(cè)量20天腫瘤體積。將小鼠體積數(shù)據(jù)進(jìn)行連續(xù)測(cè)量雙因素方差分析（Two Way ANOVA），分別將A、B兩組與C組相比，分析小鼠腫瘤體積隨時(shí)間變化有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果：
　　1.熱電偶監(jiān)測(cè)的消融過(guò)程中腫瘤內(nèi)部最高溫度可在消融開始瞬間急劇升高，平均最高

4、溫度可達(dá)104℃，溫度高于43℃腫瘤致死溫度持續(xù)時(shí)間約30s，證明了NaK合金與組織內(nèi)水接觸發(fā)生的劇烈放熱反應(yīng)的可靠性及殺滅惡性腫瘤的積極性。紅外熱像儀監(jiān)測(cè)的消融過(guò)程體表溫度最高36.2℃，遠(yuǎn)低于腫瘤中心內(nèi)部溫度，且由消融中心向四周溫度遞減，為臨床中實(shí)現(xiàn)微創(chuàng)消融提供依據(jù)。
　　2.A組小鼠消融治療后腫瘤結(jié)構(gòu)消失，殘留空腔結(jié)構(gòu)及血痂，病理切片可見治療后乳腺癌細(xì)胞正常結(jié)構(gòu)消失，細(xì)胞發(fā)生凝固性壞死，血痂逐漸脫落，局部未見腫瘤復(fù)發(fā)。B組消

5、融區(qū)域同 A組，部分殘留腫瘤組織繼續(xù)生長(zhǎng)，具有浸潤(rùn)性生長(zhǎng)趨勢(shì)。病理切片可見消融區(qū)域與殘留腫瘤組織之間存在清晰的界線。C組小鼠腫瘤體積快速增長(zhǎng)，浸潤(rùn)周圍結(jié)構(gòu)影響活動(dòng)， C組腫瘤細(xì)胞成浸潤(rùn)性生長(zhǎng)趨勢(shì)，病理性核分裂象多見。
　　3.對(duì)三組小鼠腫瘤進(jìn)行持續(xù)測(cè)量，計(jì)算20天小鼠腫瘤體積，將數(shù)據(jù)進(jìn)行Two Way ANOVA統(tǒng)計(jì)分析，得出兩實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比腫瘤體積隨時(shí)間變化有差異，A組C組比較，第10~20天兩組小鼠腫瘤體積有差異，B組C組

6、比較，第11~20天兩組小鼠腫瘤體積有差異，即完全消融組及部分消融組小鼠乳腺癌移植瘤體積小于對(duì)照組。
　　結(jié)論：采用注射式消融方式利用液態(tài)NaK合金對(duì)小鼠EMT6乳腺癌移植瘤進(jìn)行微創(chuàng)治療是可行的。該方法使腫瘤內(nèi)部溫度迅速升高，并保持一定時(shí)間，體現(xiàn)其可靠確切的熱消融效果。消融過(guò)程體表溫度遠(yuǎn)低于腫瘤中心溫度，為實(shí)現(xiàn)微創(chuàng)治療提供依據(jù)。消融后腫瘤細(xì)胞徹底變性壞死，且形成邊界清晰的消融界線。經(jīng)NaK合金完全熱化學(xué)消融的小鼠EMT6乳腺癌細(xì)胞