鈉鉀合金消融治療小鼠胰腺癌.pdf

1、目的：癌癥是威脅人類健康的一個(gè)重大問(wèn)題，全世界每年大約有1400萬(wàn)新發(fā)癌癥患者，并有將近800萬(wàn)人死于癌癥。找到一個(gè)與癌癥分期相關(guān)的腫瘤治療方法至關(guān)重要。局部消融技術(shù)作為一種微創(chuàng)治療方法被廣泛應(yīng)用于惡性腫瘤治療。鈉鉀合金消融的方法打破傳統(tǒng)消融的理念，通過(guò)鈉鉀合金與組織中的水分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，釋放能量。反應(yīng)物鈉和鉀作為人體的基本元素，可以完全被吸收。通過(guò)注射器將很少量液態(tài)的鈉鉀合金注射到目標(biāo)組織，局部產(chǎn)生高溫，反應(yīng)同時(shí)生成氫氧根和氫氣。氫氧

2、根產(chǎn)生類似于電化學(xué)反應(yīng)中正負(fù)極的作用，形成堿性環(huán)境，對(duì)腫瘤組織起到殺傷作用。另一方面，反應(yīng)產(chǎn)生的氣體在腫瘤組織內(nèi)部發(fā)生氣穴效應(yīng)，依靠氣體沖擊造成細(xì)胞的機(jī)械性壞死破裂。目前并沒(méi)有關(guān)于鈉鉀合金對(duì)早期及晚期胰腺癌小鼠療效的報(bào)道，此次采用經(jīng)皮穿刺鈉鉀合金消融技術(shù)，術(shù)后精確記錄小鼠腫瘤體積和重量的方法，評(píng)估鈉鉀合金消融對(duì)小鼠早期腫瘤和晚期腫瘤的治療效果，為腫瘤臨床治療提供一個(gè)新方向。
　　方法：
　　將Panc02胰腺癌細(xì)胞制成濃度為

3、1×107/ml的懸浮液，注射到21只雌性C57BL/6小鼠中，每只注射0.2ml，約2×106個(gè)腫瘤細(xì)胞，建立腫瘤小鼠模型。每?jī)商鞙y(cè)量一次腫瘤體積。小鼠隨機(jī)分為早期腫瘤組(ET組，腫瘤平均體積約為150mm3)，晚期腫瘤組(DT組，腫瘤平均體積約為550mm3)和對(duì)照組(CO組，腫瘤平均體積約為550mm3)共3組。
　　1.早期腫瘤組7只小鼠在接種腫瘤細(xì)胞后第18天，向小鼠腫瘤中心注射15uL鈉鉀合金進(jìn)行消融治療，注射過(guò)程用熱

4、電偶、紅外熱像儀監(jiān)測(cè)溫度變化。腫瘤消融術(shù)后，早期腫瘤組隨機(jī)選取兩只小鼠處死，切取消融區(qū)的腫瘤組織制成病理切片。
　　2.晚期腫瘤組7只小鼠在接種腫瘤細(xì)胞后第25天，向小鼠腫瘤中心注射15uL鈉鉀合金，同時(shí)用熱電偶、紅外熱像儀監(jiān)測(cè)。腫瘤消融術(shù)后，晚期腫瘤組隨機(jī)選取兩只小鼠處死，切取消融區(qū)的腫瘤組織制成病理切片。
　　3.對(duì)照組7只小鼠不進(jìn)行鈉鉀合金消融，在接種腫瘤細(xì)胞后第25天，向小鼠腫瘤中心注射15uL生理鹽水，同時(shí)用熱電偶

5、、紅外熱像儀監(jiān)測(cè)。注射完成后，隨機(jī)選取兩只小鼠處死，切取腫瘤組織制成病理切片。
　　繼續(xù)觀察17天，剩余小鼠全部處死。切取腫瘤組織并稱重，計(jì)算抑瘤率。
　　結(jié)果：
　　1.溫度變化
　　溫度時(shí)間曲線揭示了消融區(qū)中心溫度變化，小鼠機(jī)體正常溫度為33℃(t<0)，當(dāng)堿金屬合金注入到腫瘤中心（t=0），溫度在兩秒內(nèi)迅速由33℃升高至85℃。最高溫度維持不到1秒鐘，逐漸減低，直到恢復(fù)至起始溫度。反應(yīng)釋放大量熱能，溫度可以

6、保持在42℃以上長(zhǎng)達(dá)50秒。
　　紅外熱像儀放置在小鼠上方10cm處，記錄小鼠表面皮膚溫度。紅色區(qū)域?yàn)樯郎貐^(qū)域，注射鈉鉀合金時(shí)，升溫范圍最大，形狀類似腫瘤，越靠近注射點(diǎn)溫度越高。此時(shí)小鼠其他部位體溫基本維持不變。隨著消融結(jié)束，深紅顏色區(qū)域即溫度為40℃的范圍，向注射中心逐漸縮小。腫瘤組織溫度升高可以維持約50秒。
　　2.病理組織切片
　　早期腫瘤組可以看到明顯的凝固性壞死，細(xì)胞核碎裂溶解，細(xì)胞結(jié)構(gòu)完全消失，呈均質(zhì)紅染

7、。晚期腫瘤組細(xì)胞發(fā)生不完全壞死，界限分明。部分為完整的腫瘤細(xì)胞，細(xì)胞核大染色深，細(xì)胞核異形性顯著。部分為不完全壞死的腫瘤細(xì)胞。細(xì)胞核碎裂，細(xì)胞腫脹壞死。對(duì)照組的腫瘤細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，異形性明顯，細(xì)胞核數(shù)量多顏色深，染色質(zhì)豐富。
　　3.腫瘤體積測(cè)量
　　腫瘤細(xì)胞在小鼠腹膜內(nèi)接種后生長(zhǎng)良好，腫瘤體積迅速增大。早期腫瘤組在接受堿金屬消融時(shí)，腫瘤體積約為180mm3，術(shù)后腫瘤體積迅速下降，逐漸形成硬痂，腫瘤幾乎完全消失，到消融術(shù)后第2

8、4天，測(cè)量硬痂處腫瘤體積約為33mm3。晚期組腫瘤在消融術(shù)后迅速縮小，至260mm3。由于晚期腫瘤體積大、形狀不規(guī)則，消融不完全，腫瘤體積在消融術(shù)后10天開(kāi)始增長(zhǎng)，觀察結(jié)束時(shí)，體積約為560mm3。對(duì)照組小鼠體積一直不斷增大。在接種后0-20天，對(duì)照組腫瘤幾乎呈對(duì)數(shù)生長(zhǎng)。20天后腫瘤生長(zhǎng)逐漸減緩，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)未消融組腫瘤平均體積為3300mm3。
　　4.腫瘤抑瘤率
　　在觀察結(jié)束時(shí)，小鼠被全部處死，取出腫瘤測(cè)量重量，早期腫瘤