早期雞胚活性粗提物的初步應(yīng)用研究.pdf

1、雞早期胚盤細(xì)胞具有分化的多潛能性，可以分化成不同組織細(xì)胞，故認(rèn)為雞胚活性粗提物含有干細(xì)胞活性成分的特性。而干細(xì)胞療法是通過調(diào)控細(xì)胞因子，修復(fù)受損的組織細(xì)胞，然后通過細(xì)胞間的相互作用及產(chǎn)生細(xì)胞因子幫助受損細(xì)胞重建的功能。經(jīng)大量研究，證實(shí)了干細(xì)胞在神經(jīng)再生、創(chuàng)傷修復(fù)和抗衰老等領(lǐng)域有重要的臨床價(jià)值。因?yàn)殡u胚來源易獲得，本試驗(yàn)采用雞胚胎作為試驗(yàn)對(duì)象，從雞胚中提取出雞胚活性粗提物，比較不同離心轉(zhuǎn)數(shù)，對(duì)提取雞胚粗提物的影響。采用不同孵化時(shí)間的種蛋蛋

2、黃飼喂小鼠，觀察對(duì)小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育的影響。同時(shí)又探討了雞胚活性粗提物對(duì)于小鼠軟組織創(chuàng)傷愈合的促進(jìn)作進(jìn)用，為雞胚活性粗提物在臨床治療上的應(yīng)用提供新的思路和借鑒。主要內(nèi)容如下:
　　1.探討早期胚胎活性物分離的最佳時(shí)期，37℃培養(yǎng)箱孵化種蛋，收集雞胚盤內(nèi)的原代細(xì)胞，反復(fù)凍融，然后提取雞胚盤細(xì)胞內(nèi)的活性物，對(duì)比差速離心對(duì)雞胚干細(xì)胞活性物提取的影響。結(jié)果如下:孵化72h的雞胚盤最大，胚盤內(nèi)的細(xì)胞最多。差數(shù)離心轉(zhuǎn)數(shù)越高，提取的雞胚活性粗提物越

3、多。
　　2.探討不同時(shí)間孵化的種蛋蛋黃對(duì)小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育的影響。將未孵化雞胚的種蛋蛋黃、孵化36h的種蛋蛋黃和孵化72h的種蛋蛋黃分別飼喂隨機(jī)分配的三組小鼠，另外一組正常飼喂鼠料。結(jié)果顯示:飼喂蛋黃的小鼠體重平均增長(zhǎng)率為36％，與對(duì)照組平均增長(zhǎng)率18.5％相比較體重增加明顯;飼喂孵化種蛋蛋黃的小鼠與飼喂未經(jīng)孵化的種蛋蛋黃的小鼠相比，其體重增加明顯，差異顯著(P＜0.05);尤其是飼喂孵化72h種蛋蛋黃的小鼠平均增長(zhǎng)率42.4％，與

4、對(duì)照組平均增長(zhǎng)率18.5％相比體重增加更明顯，差異極顯著(P＜0.01)，由此說明了蛋黃內(nèi)的雞胚干細(xì)胞或者細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子有利于小鼠腸道吸收，促進(jìn)小鼠體重增長(zhǎng)，對(duì)小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育具有促進(jìn)作用。探討注射雞胚活性粗提物對(duì)小鼠的影響。將提取的雞胚活性粗提物皮下注射小鼠，觀察小鼠。結(jié)果顯示:小鼠體溫會(huì)逐漸升高，此為小鼠對(duì)外來物質(zhì)識(shí)別的過程，隨后體溫會(huì)逐漸恢復(fù)到正常水平。
　　3.探討雞胚活性粗提物對(duì)小鼠組織創(chuàng)傷的作用。構(gòu)建昆明小鼠軟組織創(chuàng)

5、傷模型，皮下注射和皮膚表面涂抹雞胚活性粗提物。結(jié)果顯示:在昆明小鼠組織缺損創(chuàng)面模型中，只用蛋黃的小鼠兩側(cè)傷口愈合幾乎沒有差別，而涂抹雞胚活性粗提物的右側(cè)傷口愈合速度比左側(cè)未涂抹的傷口愈合速度要快。注射雞胚活性粗提物的右側(cè)傷口比未注射的左側(cè)傷口愈合速度要快。探討雞胚活性粗提物對(duì)小鼠組織燙傷的作用。構(gòu)建昆明小鼠組織燙傷模型，在燙傷處涂抹雞胚活性粗提物。結(jié)果顯示:涂抹雞胚活性粗提物右側(cè)傷口和左側(cè)相比較，右側(cè)的傷口愈合速度更快。組織學(xué)檢查結(jié)果顯

6、示涂抹雞胚活性粗提物試驗(yàn)組表皮和真皮層細(xì)胞修復(fù)能力強(qiáng)于對(duì)照組。
　　結(jié)論:
　　1通過雞種蛋的孵化，發(fā)現(xiàn)雞早期胚胎孵化72h為活性分離的最佳時(shí)期，孵化72h的雞胚盤最大，胚盤內(nèi)的細(xì)胞最多，提取的雞胚活性粗提物最好。驗(yàn)證了經(jīng)反復(fù)凍融法提取雞胚活性粗提物的可行性。
　　2不同時(shí)間段孵化的種蛋蛋黃對(duì)小鼠飼喂，發(fā)現(xiàn)孵化72h的種蛋蛋黃對(duì)小鼠的體重增長(zhǎng)最為明顯。推測(cè)雞胚干細(xì)胞或者細(xì)胞分泌的活性成分能有利于小鼠腸道吸收，促進(jìn)小鼠體