JNK抑制劑SP600125對(duì)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞增殖、遷移的影響.pdf

1、目的:探討JNK特定抑制劑SP600125對(duì)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞的增殖、遷移的影響及其機(jī)制。
　　方法:用10、20、40μmol/L的JNK抑制劑SP600125處理人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞24、48、72h，選用MTT法，檢測(cè)SP600125對(duì)細(xì)胞增殖的抑制情況;選用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SP600125對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響。用10、20、40μmol/L的JNK抑制劑SP600125處理人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞48h，選

2、用免疫熒光實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)JNK和p-JNK蛋白的定位情況;選用Western blot，檢測(cè)經(jīng)SP600125處理后JNK和p-JNK蛋白的表達(dá)狀況。
　　結(jié)果:1.MTT結(jié)果顯示:Tca8113細(xì)胞經(jīng)10、20、40μmol/L SP600125分別處理24、48、72h后，與對(duì)照組相比，用藥組的Tca8113細(xì)胞明顯抑制增殖（P＜0.01）;呈現(xiàn)出濃度和時(shí)間依賴性。2.劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:Tca8113細(xì)胞經(jīng)10、20、40μmol

3、/LSP600125分別處理24、48、72h后，與對(duì)照組相比，用藥組的細(xì)胞移動(dòng)距離短于對(duì)照組（P＜0.01）。相同藥物濃度時(shí)，用藥時(shí)間越長，細(xì)胞移動(dòng)距離越小;藥物作用時(shí)間相同時(shí)，藥物濃度越高，細(xì)胞移動(dòng)距離越小。表明SP600125抑制Tca8113細(xì)胞的移動(dòng)，呈現(xiàn)出濃度依賴性和時(shí)間依賴性。3.細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果顯示:Tca8113細(xì)胞經(jīng)10、20、40μmol/L SP600125處理48h，JNK蛋白主要定位在細(xì)胞質(zhì)，用藥組與對(duì)照

4、組熒光密度未見明顯變化;p-JNK蛋白主要定位在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)，用藥組與對(duì)照組相比，隨著用藥濃度增加，其熒光密度減低。4.Western Blot結(jié)果顯示:Tca8113細(xì)胞經(jīng)10、20、40μ mol/L SP600125處理48h后提取蛋白，與對(duì)照組相比，經(jīng)SP600125處理的Tca8113細(xì)胞中，p-JNK表達(dá)減少，且隨著藥物濃度的增加p-JNK表達(dá)越低（P＜0.01）。表明SP600125抑制p-JNK的表達(dá)，呈濃度依賴性。