冠狀動脈粥樣硬化血液生化指標及新microRNA的挖掘.pdf

1、背景和目的:當冠狀動脈粥樣硬化(AS)斑塊狹窄到一定程度影響正常心肌灌注時才會表現(xiàn)出臨床癥狀。在早期無癥狀患者及時發(fā)現(xiàn)病變，給予合理的治療可以阻止或減慢病變的繼續(xù)發(fā)展，預防急性心血管事件包括急性冠脈綜合征或猝死的發(fā)生。因此，對于那些有著糖尿病、肥胖、血脂異常等冠狀動脈粥樣硬化危險因素的人群，通過安全、無創(chuàng)、有效的診斷指標及時發(fā)現(xiàn)病變有著非常重要的意義。MicroRNA(miRNA)自發(fā)現(xiàn)以來，得到了廣泛研究，其在生理狀態(tài)和病理疾病中均發(fā)

2、揮了重要作用。MiRNA穩(wěn)定存在于血清/血漿中，通過檢測患者血液循環(huán)miRNA譜，可實現(xiàn)疾病的診斷、鑒別診斷、危險分層及預后的判斷。血液標本安全易得，本研究通過對血液生化指標及血清microRNA表達譜的研究，試圖發(fā)現(xiàn)新的冠狀動脈粥樣硬化診斷標志物。
　　對象與方法:以來該院查體人群為研究對象，根據(jù)冠脈動脈血管造影(CTA)檢查結果，將人群分為冠狀動脈粥樣硬化組及正常組。收集研究對象臨床資料及血液標本，進行生化指標包括同型半胱氨酸

3、(Hcy)的檢測。應用Solexa測序技術篩查血液循環(huán)中動脈粥樣硬化斑塊相關miRNA的表達，挖掘新的未報到的miRNA并進行qRT-PCR鑒定。
　　結果:
　　1.年齡、吸煙、高血壓、血清TG、LDL-C和斑塊的嚴重程度密切相關。年齡、吸煙、LDL-C和斑塊的鈣化性質獨立相關。
　　2.Hcy和冠狀動脈斑塊狹窄程度和鈣化性質獨立明顯相關，當Hcy＞15μmol/L，和重度狹窄獨立顯著相關，OR為2.212(95％

4、CI=1.119-4.375，p=0.022);當Hcy＞15μmol/L時和斑塊鈣化獨立顯著相關，OR為1.668(95％CI=1.030-2.699, p=0.037)。
　　3.通過Solexa測序對AS及不穩(wěn)定心絞痛(UAP)疾病患者的血循環(huán)miRNA進行篩查，發(fā)現(xiàn)3個未報到新的miRNAs(N1，N2，N3)，并用qRT-PCR方法在80例正常者(Control)，80例AS患者，80例UAP患者血清中進行驗證。

5、　　4.N1含量在AS組顯著高于Control組和UAP組(P值分別為p＜0.0001與p=0.0337); N3含量在AS組顯著高于其他兩組Control組和UAP組（P值分別為p＜0.0001與p=0.005）。
　　5.應用生物信息軟件初步預測了新miRNAs N1和N3的生物學功能，發(fā)現(xiàn)N1和N3在多環(huán)節(jié)參與動脈粥樣硬化的形成，為動脈粥樣發(fā)生發(fā)展中新miRNAs N1和N3的具體調控機制提供了線索。
　　結論:本研究