18F-ML-10PET-CT顯像探測化療后腫瘤細(xì)胞凋亡的實驗研究.pdf

1、第一部分18F-ML-10的制備及在雄性昆明小鼠體內(nèi)的生物分布
　　目的：
　　采用住友CFN多功能模塊自動化合成18F-ML-10，并進(jìn)行雄性昆明小鼠體內(nèi)生物學(xué)分布實驗，為臨床應(yīng)用提供實驗資料。
　　方法：
　　醫(yī)用回旋加速器產(chǎn)生的18F-離子被QMA柱捕獲后，含碳酸鉀的K2.2.2乙腈溶液淋洗QMA柱，將18F-離子淋入反應(yīng)管，加熱使乙腈和水共沸除水。將10 mg前體加入1ml乙腈中，密封條件下與18F-離子

2、90℃反應(yīng)5 min，然后加入1mL2 mol/L HCl水解7min，再加入2.0 mL1mol/L NaOH中和，隨后混合物進(jìn)入HPLC單元進(jìn)一步純化。當(dāng)系統(tǒng)檢測到HPLC處放射峰時，將粗產(chǎn)品切換至固相萃取中轉(zhuǎn)瓶，經(jīng)C18柱萃取后，用乙醇將產(chǎn)品洗脫，經(jīng)無菌慮膜過濾入產(chǎn)品收集瓶后備用。取雄性昆明小鼠50只，隨機依據(jù)檢測臟器％ID/g的不同時間點將其分為10組，每組5只，將18F-ML-10經(jīng)尾靜脈注入雄性昆明小鼠體內(nèi)，考察18F-ML

3、-10的生物學(xué)分布情況。
　　結(jié)果：
　　采用住友CFN多功能模塊能夠自動化合成18F-ML-10，合成效率為19.17±1.94%，時間為63.00±1.41 min，放化純度>95%，產(chǎn)品無菌、無熱原，符合注射標(biāo)準(zhǔn)。生物學(xué)分布顯示18F-ML-10經(jīng)血液循環(huán)迅速分布全身各處，在全身各組織器官集聚較少，主要經(jīng)由泌尿系統(tǒng)排泄。
　　結(jié)論：
　　住友CFN多功能模塊能夠自動化合成18F-ML-10，能滿足科研和臨床

4、正電子發(fā)射斷層顯像（PET）的需要。18F-ML-10經(jīng)血液循環(huán)迅速分布全身各處，在全身各組織器官集聚較少，主要經(jīng)泌尿系統(tǒng)排泄。18F-ML-10生物分布特點適于細(xì)胞凋亡顯像的進(jìn)一步研究。
　　第二部分18F-ML-10 PET/CT顯像在檢測荷瘤兔細(xì)胞凋亡的初步研究
　　目的：
　　利用VX2腫瘤細(xì)胞制作腫瘤動物模型。用紫杉醇誘導(dǎo)VX2腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡，推斷PET/CT顯像最佳時間點。判定18F-ML-10 PET/

5、CT顯像用于細(xì)胞凋亡評估的可能性。
　　方法：
　　將荷瘤種兔體內(nèi)取下的VX2腫瘤組織切割成小塊，移植在大白兔左上肢皮下，成功制作腫瘤動物模型。取VX2細(xì)胞動物模型6只，經(jīng)兔子耳緣靜脈將紫杉醇滴注入腫瘤動物模型體內(nèi)，誘導(dǎo)VX2細(xì)胞發(fā)生凋亡后，注射18F-ML-10后分別于不同的時間點（A組30min、B組60min、C組90min、D組120min）行18F-ML-10 PET/CT全身斷層融合顯像，測量瘤體部位的SUVma

6、x值；采用單因素方差分析，判定紫杉醇誘導(dǎo)VX2腫瘤細(xì)胞凋亡模型的18F-ML-10PET/CT顯像最佳顯像時間點。取VX2細(xì)胞動物模型12只，隨機分為化療組（F組）和對照組（E組），化療2天后，行18F-ML-10 PET/CT全身斷層融合顯像；同時，對瘤體組織行細(xì)胞凋亡百分比檢測。采用Mann-Whitney檢驗分析E組與F組之間瘤體的SUVmax值的差異及瘤體細(xì)胞凋亡百分比的差異；對F組VX2瘤體組織的SUVmax值與細(xì)胞凋亡百分比

7、之間做Spearman秩相關(guān)分析。
　　結(jié)果：
　　1.本實驗成功建立了兔軟組織內(nèi)VX2腫瘤動物模型，成功率100%。
　　2.瘤體不同時間點的SUVmax值分別為A組：1.14±0.20、B組：1.65±0.28、C組：1.48±0.23、D組：1.23±0.21。A組與B組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.01)，A組與C組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.02），A組與D組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.509)，B

8、組與C組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.218)，B組與D組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.005)，C組與D組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.08)。18F-ML-10 PET/CT顯像最佳時間點定為注射顯像劑后60min-90min時間段。
　　3.F組SUVmax值1.65±0.33與E組SUVmax值0.59±0.17比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.004）；F組細(xì)胞凋亡百分比26.22±5.41％與E組細(xì)胞凋亡百分比4.

9、55±2.23％比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.004）；F組瘤體組織SUVmax值與細(xì)胞凋亡百分比之間采用Spearman秩相關(guān)檢驗，兩者呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)rs=0.943。說明18F-ML-10 PET/CT顯像可用于細(xì)胞凋亡評估。
　　結(jié)論：
　　兔VX2腫瘤動物模型造模成功率100％，模型穩(wěn)定。18F-ML-10 PET/CT顯像用于檢測體內(nèi)紫杉醇誘導(dǎo)VX2細(xì)胞凋亡顯像的最佳時間點為注射后60-90min。18F-M