β-防御素-3-聚乳酸聚乙醇酸緩釋微球抑制人工關(guān)節(jié)術(shù)后生物膜形成的研究.pdf

1、近年來(lái)，外科手術(shù)技術(shù)、植入物材料以及生物力學(xué)方面有了長(zhǎng)足的進(jìn)步，同時(shí)，患者的理念也逐漸發(fā)生了改變，人工關(guān)節(jié)置換術(shù)已經(jīng)成為治療骨性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及股骨頭壞死等嚴(yán)重關(guān)節(jié)病變的常規(guī)治療方案。手術(shù)后的良好效果和長(zhǎng)時(shí)間的隨訪結(jié)果也使患者及醫(yī)生感到滿意。然而，自從人工關(guān)節(jié)置換術(shù)開展以來(lái)，感染一直是最嚴(yán)重也是最難治療的并發(fā)癥。針對(duì)感染的預(yù)防以及治療，時(shí)刻困擾著臨床醫(yī)生。人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染不僅給患者的身體和精神上帶來(lái)極大的創(chuàng)傷，感染的昂貴治

2、療費(fèi)用對(duì)患者來(lái)說(shuō)是巨大的經(jīng)濟(jì)壓力，同時(shí)術(shù)后感染也使醫(yī)護(hù)人員產(chǎn)生打擊和挫敗感。因此，對(duì)于一名關(guān)節(jié)外科醫(yī)生來(lái)說(shuō)，積極預(yù)防并且正確治療人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染是一門必修課。
　　目的:研究人β-防御素3（HBD-3）/聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球的制各方法及體外釋放藥物的性能。同時(shí)在動(dòng)物體內(nèi)驗(yàn)證人β-防御素3（HBD-3）/聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球治療人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后葡萄球菌感染以及阻止生物膜形成的可行性。
　　方法:

3、r>　　1.采用改良復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法，以PLGA作為藥物載體，HBD-3為藥物制備HBD-3/PLGA緩釋微球。使用掃描電鏡(SEM)觀察微球的物理性質(zhì)，微球的載藥量和包封率通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)定。記錄HBD-3/PLGA微球的緩釋數(shù)據(jù)，分析微球在體外緩釋藥物的特點(diǎn)。
　　2.在體外實(shí)驗(yàn)中，觀察不同濃度的HBD-3溶液和HBD-3/PLGA緩釋微球的抑菌環(huán)大小以及抑菌環(huán)的持續(xù)時(shí)間。
　　3.在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，建立兔人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后感

4、染模型，對(duì)動(dòng)物感染模型分別處以關(guān)節(jié)腔內(nèi)置入HBD-3/PLGA緩釋微球、單純HBD-3陽(yáng)性對(duì)照以及生理鹽水陰性對(duì)照，使用組織培養(yǎng)、電鏡掃描及激光共聚顯微鏡觀察及檢測(cè)HBD-3/PLGA緩釋微球和單純HBD-3在控制人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后葡萄球菌感染和抑制生物膜形成的效果。
　　結(jié)果:
　　1.在鏡下觀察HBD-3/PLGA緩釋微球的表面比較光滑，分布相對(duì)均勻，有一定的流動(dòng)性，其平均粒徑為219.49nm，HBD-3的載藥量為(20

5、.67±0.17)％，包封率為(54.52±1.31)％，可以達(dá)到最低抑菌濃度的要求。
　　2.體外的緩釋實(shí)驗(yàn)中HBD-3的釋藥情況相對(duì)均勻，25d累計(jì)釋藥量平均為(74.12±0.43)％。
　　3.在體外實(shí)驗(yàn)中，單純HBD-3溶液和HBD-3/PLGA緩釋微球在培養(yǎng)皿上均出現(xiàn)抑菌環(huán)，第10d中單純HBD-3溶液的抑菌環(huán)為2.66mm，HBD-3/PLGA緩釋微球的抑菌環(huán)為8.92mm。
　　4.在動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，單

6、純HBD-3溶液和HBD-3/PLGA緩釋微球組均觀察到細(xì)菌生物膜的生成受到抑制，其中HBD-3/PLGA緩釋微球組電鏡下細(xì)菌數(shù)量更少，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)及生物膜形成的時(shí)間更長(zhǎng)。
　　結(jié)論:
　　1.使用改良復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法制備出的HBD-3/PLGA緩釋微球形態(tài)基本符合實(shí)驗(yàn)前預(yù)估的要求。
　　2.體外實(shí)驗(yàn)中HBD-3/PLGA緩釋微粒具有緩釋特性，相對(duì)于單純HBD-3抑制葡萄球菌生長(zhǎng)的效果更加明顯和持久。
　　3.動(dòng)