SERPINA亞家族的進化及東方田鼠SERPINA3n的表達分析.pdf

1、SERPIN（絲酶抑制蛋白）是一類分布廣泛、成員眾多的蛋白酶抑制劑家族，目前已闡明部分家族成員在一些生理及病理過程中，尤其是免疫調節(jié)及炎癥反應中發(fā)揮重要的調節(jié)作用。但仍有很多成員功能不明?；钴S進化及顯著分化是具有不同生物學功能的基礎。
　　 本研究通過進化分析，解析SERPIN的進化規(guī)律，而為進一步研究SERPIN家族各成員的功能指出更明確的目標和方向。日本血吸蟲病是世界性分布的、危害嚴重的人畜共患寄生蟲病之一。人類和小鼠感染日

2、本血吸蟲后機體處于一種低免疫水平狀態(tài)，而東方田鼠是目前唯一具有天然抗性的哺乳動物。根據已有的研究結果表明有SERPIN家族成員參與東方田鼠抗日本血吸蟲感染過程。本實驗通過生物信息學分析及半定量RT-PCR作表達研究，確定東方田鼠SERPIN家族有哪些與抗性相關的成員及其可能發(fā)揮的作用，從而有助于闡明東方田鼠抗日本血吸蟲感染的分子機制。以已知SERPIN序列及其保守區(qū)BLAST基因組數據庫，對原雞、小鼠、黑猩猩、人類等代表性物種SERPI

3、N家族作進化研究，結果表明A、B亞家族進化活躍。對哺乳動物SERPINA亞家族進一步分析發(fā)現嚙齒類有一個進化活躍的A3次亞家族。而進化活躍與其功能多樣性密切相關。通過在大鼠、小鼠SERPIN基因保守區(qū)設計引物，擴增獲得東方田鼠部分SERPINA亞家族5個成員的反應中心環(huán)(reactive centerloop，RCL)特異序列及SERPINA3n的ORF序列。通過進化及序列結構分析表明東方田鼠SERPINA3n基因與大鼠、小鼠直系同源基

4、因RCL有較大差異，而結構決定功能，提示其有不同的抑制功能。
　　 本研究從東方田鼠、小鼠感染日本血吸蟲0天、7天、12天的肝組織中提取總RNA，通過RT-PCR檢測感染前后SERPINA3n亞家族基因的表達差異?；虮磉_結果顯示東方田鼠與小鼠SERPINA3n基因表達均下調，并有差異。綜上所述，嚙齒類SERPINA3次亞家族的進化異?；钴S，顯然其成員有明顯的功能分化，有待繼續(xù)深入研究。東方田鼠SERPINA3n的RCL結構與大