積雪草苷抑制高糖腹透液誘導(dǎo)人腹膜間皮細(xì)胞氧化應(yīng)激的機(jī)制研究.pdf

1、目的:觀察積雪草苷(asiaticoside，AS)對(duì)高糖腹透液(peritoneal dialysis solution，PDS)誘導(dǎo)人腹膜間皮細(xì)胞氧化應(yīng)激水平及p38絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedprotein kinase，MAPK)通路活化的影響，探討AS抗腹膜氧化應(yīng)激的分子機(jī)制。
　　方法:體外培養(yǎng)人腹膜間皮細(xì)胞株HMrSV5，CCK-8法檢測(cè)4.25％葡萄糖腹透液及不同濃度(10、50、100、

2、150、200μmol/L)的AS對(duì)細(xì)胞活力的影響;根據(jù)CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力的結(jié)果篩選出用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的AS的合適藥物濃度，將細(xì)胞隨機(jī)分為7組:對(duì)照組、PDS組、AS低（50μmol/L）、中（100μmol/L）、高(150μmol/L)劑量組、NAC組、SB203580組，分別培養(yǎng)6、12、24 h，采用雙氯熒光素(DCFH-DA)染色、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)的產(chǎn)生;比

3、色法檢測(cè)細(xì)胞中丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、總超氧化物歧化酶(Total-superoxide dismutase，T-SOD)的水平;Western Blot檢測(cè)磷酸化p38MAPK(phosphorylated-p38MAPK，p-p38MAPK)、p38MAPK蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:①PDS作用下HMrSV5細(xì)胞活力下降，ROS生成增多，p-p38MAPK表達(dá)上調(diào)，均呈時(shí)間相關(guān)，以PDS作用24h最顯著

4、;PDS作用24h細(xì)胞中MDA水平升高，T-SOD水平下降;②低、中、高劑量的AS能提高PDS作用下的細(xì)胞活力，減少ROS的生成，中、高劑量的AS能降低PDS作用下細(xì)胞中MDA的水平，升高T-SOD的水平，下調(diào)p-p38MAPK的表達(dá)，均呈劑量相關(guān)，以AS高劑量組作用最顯著;③抗氧化劑NAC及p38MAPK抑制劑SB203580均能減少ROS的生成，降低細(xì)胞中MDA的水平，升高T-SOD的水平，下調(diào)p-p38MAPK的表達(dá)。