木犀草苷上調(diào)14-3-3η蛋白保護(hù)心肌細(xì)胞抗缺氧-復(fù)氧損傷.pdf

1、目的：
　　木犀草苷（Luteoloside, Lut）是一種廣泛存在于中草藥中的黃酮類化合物，具有保護(hù)心血管的作用。本實(shí)驗(yàn)對(duì)H9c2心肌細(xì)胞進(jìn)行Lut預(yù)處理，建立缺氧/復(fù)氧（anoxia/reoxygenation，A/R）損傷模型，研究Lut對(duì)受到缺氧/復(fù)氧損傷的心肌細(xì)胞的保護(hù)作用，并且探究Lut的保護(hù)作用是否與影響14-3-3η蛋白的表達(dá)有關(guān)。
　　方法：
　　本實(shí)驗(yàn)采用H9c2細(xì)胞，對(duì)其進(jìn)行Lut預(yù)處理并構(gòu)建A

2、/R模型。利用MTS法檢測(cè)細(xì)胞存活率；分光光度計(jì)法檢測(cè)乳酸脫氫酶（LDH）的釋放；Western blot法檢測(cè)14-3-3η蛋白的表達(dá)水平；流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)的活性氧（ROS）水平；分光光度計(jì)法檢測(cè)線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（mPTP）的開(kāi)放程度、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的活性；Western blot法檢測(cè)Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)水平；流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡程度。
　　結(jié)果：
　　各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞經(jīng)過(guò)缺氧/

3、復(fù)氧處理后：
　　1.預(yù)處理Lut提高H9c2細(xì)胞存活率，降低LDH活性；
　　2.預(yù)處理Lut增加H9c2細(xì)胞內(nèi)14-3-3η蛋白表達(dá)量；
　　3.預(yù)處理Lut降低H9c2細(xì)胞內(nèi)ROS水平；
　　4.預(yù)處理Lut減弱H9C2細(xì)胞內(nèi)mPTP開(kāi)放程度；
　　5.預(yù)處理Lut降低H9c2細(xì)胞內(nèi)Caspase-3活性；
　　6.預(yù)處理Lut上調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)，下調(diào)Bax蛋白的表達(dá)；
　　7.預(yù)處