CaN調(diào)節(jié)β-catenin磷酸化對海馬神經(jīng)元突觸形成的影響.pdf

1、鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（Calcineurin，CaN）是一種受Ca2+/鈣調(diào)蛋白（Calmodulin，CaM）調(diào)節(jié)的絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶，通過調(diào)節(jié)神經(jīng)元關(guān)鍵蛋白質(zhì)的磷酸化狀態(tài)而影響神經(jīng)元功能，在突觸可塑性方面發(fā)揮重要的作用。β-catenin在突觸連接強度和功能性突觸形成中發(fā)揮重要作用，為了探討在神經(jīng)元突觸形成過程中CaN與β-catenin的關(guān)系，本實驗采用環(huán)孢霉素A（cyClosporin A，CsA）和他克莫司（Tacrolimu

2、s，F(xiàn)K506）特異抑制CaN，觀察原代培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元β-catenin表達(dá)、磷酸化和突觸小泡膜蛋白synaptophysin表達(dá)變化，以研究CaN對神經(jīng)元突觸形成變化的影響。
　　具體實驗過程和結(jié)果如下：首先分離培養(yǎng)原代大鼠海馬神經(jīng)元，然后采用4種方式處理細(xì)胞，依次為對照組、乙醇組、CsA組和FK506組，最后通過細(xì)胞免疫組化和western blot確定相應(yīng)蛋白質(zhì)β-catenin的表達(dá)、磷酸化和synaptophysi

3、n表達(dá)的變化情況。結(jié)果顯示原代神經(jīng)元中β-catenin蛋白含量對照組和乙醇組無顯著差異，而CsA組和FK506組與對照組相比均顯著升高；磷酸化的β-catenin的蛋白含量對照組和乙醇組無顯著差異，而CsA組和FK506組與對照組相比均顯著降低；Synaptophysin蛋白含量對照組和乙醇組無顯著差異，而CsA組和FK506組與對照組相比均顯著升高。
　　上述結(jié)果表明當(dāng)CaN活性被抑制后，神經(jīng)元中β-catenin磷酸化程度降