DFMG調(diào)控氧化損傷VECs TLR4表達對VSMCs增殖與遷移的影響.pdf

1、目的:
　　觀察一種活性新化學實體，7-二氟亞甲基-5，4-二甲氧基異黃素(7-difluoromethoxy-5,4'-dimethoxygenistein，DFMG)能否通過調(diào)控損傷內(nèi)皮細胞(vascular endothelial cells，VECs) TLR4表達干預共培養(yǎng)模型中平滑肌細胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)的增殖和遷移。
　　方法:
　?、儆肨ranswe

2、ll法建立VECs-VSMCs共培養(yǎng)模型，用LPC誘導VECs的損傷。采用CCK-8法和Transwell遷移法測定不同濃度的LPC誘導的VECs的損傷對VSMCs的增殖和遷移的影響。應用ELISA法分析不同濃度的LPC誘導的損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中VECs IL-6和TNF-α的表達量。采用Western blot和熒光定量PCR測定損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中VECs TLR4在蛋白水平和基因水平的表達。

3、　?、诓捎肅CK-8法測定不同濃度和不同作用時間的DFMG能否干預損傷VECs與VSMCs的共培養(yǎng)模型中VSMCs的增殖。并且，運用TLR4過表達和TLR4沉默的轉染技術，采用CCK8法和Transwell遷移法測定DFMG能否通過抑制VECs TLR4的表達干預共培養(yǎng)模型中VSMCs的增殖和遷移。
　　結果:
　?、匐S著LPC濃度的增加，LPC誘導的VECs損傷引起VSMCs增殖和遷移的效應增強;
　?、陔S著LPC濃

4、度的增加，LPC誘導的損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中VECs的TNF-α和IL-6的分泌增加，并且選取30μM作為LPC誘導的共培養(yǎng)模型的最佳濃度;
　?、跮PC誘導的損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中損傷VECs的TLR4在蛋白水平和基因水平的表達均增高;
　?、蹹FMG抑制損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中VSMCs的增殖，其干預作用呈現(xiàn)一定的時間-濃度依賴特性;
　?、軹LR4過表達具有與LPC類似的作