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文檔簡介
1、目的:
為了研究miR-597在乳腺癌中的表達,尤其是其對乳腺癌增殖,遷移侵襲的作用以及該過程所涉及的分子機制。
方法:
1.用實時熒光定量PCR檢測38對臨床標本及乳腺癌細胞MDA-MB-231和SK-BR-3中miR-597的表達水平。
2.在腫瘤細胞中瞬時轉染miR-597mimics,并用MTT實驗、EdU實驗及流式周期實驗檢測細胞的增殖能力,用劃痕實驗及transwell侵襲實驗檢測乳腺
2、癌細胞的體外遷移和侵襲的能力。
3.結合生物信息學方法預測miR-597的靶基因,并用Q-PCR、雙熒光素酶報告實驗及蛋白印記法驗證;隨后敲減及挽救靶基因,結合功能實驗判斷靶基因的準確性。
4.利用實時熒光定量PCR驗證miR-597與FOSL2間的相互關系。
結果:
1.與正常組織和細胞比較,乳腺癌組織及MDA-MB-231和SK-BR-3細胞中miR-597均呈低表達;
2.與對照相
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