民間藥筋骨草抗疲勞抗氧化作用及主要成分提取工藝研究.pdf

1、目的：
　　本課題目的在于研究民間藥筋骨草抗疲勞抗氧化作用及主要成分提取工藝。主要分三部分，第一部分研究筋骨草對小鼠和大鼠的抗疲勞抗氧化作用；第二部分研究筋骨草黃酮和多糖的體外抗氧化活性；第三部分研究筋骨草中主要有效成分總黃酮、多糖和生物堿的最佳提取工藝。
　　方法：
　　第一部分：將72只昆明種健康小鼠隨機(jī)分成空白對照組，肉蓯蓉組（5.0 g/kg），家種筋骨草組（5 g/kg）、野生筋骨草組（2.5、5、10 g/

2、kg）,每組12只；將48只SD大鼠隨機(jī)分成空白對照組，肉蓯蓉組（2.5 g/kg），家種筋骨草組（2.5 g/kg）、野生筋骨草組（1.25、2.5、5.0 g/kg），每組8只，經(jīng)口灌胃15 d。常溫不負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)，測力竭游泳時間，BUN、糖元和MDA含量以及SOD活力。
　　第二部分：以Vc為對照，采用DPPH、ABTS和FRAP法對民間藥筋骨草黃酮和多糖抗氧化活性進(jìn)行綜合評價。
　　第三部分：通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)

3、，分別研究乙醇濃度、超聲時間、料液比和提取溫度對筋骨草總黃酮提取率的影響，料液比、超聲時間、提取次數(shù)和提取溫度對筋骨草多糖提取率的影響，料液比、乙醇濃度、提取溫度和超聲時間對筋骨草生物堿提取率的影響。優(yōu)選出超聲輔助提取筋骨草總黃酮、多糖和生物堿的最佳工藝，并測定野生和家種筋骨草中總黃酮，多糖和生物堿含量。
　　結(jié)果:
　　第一部分：研究表明民間藥筋骨草2.5、5、10 g/kg三個劑量均可以延長小鼠力竭游泳時間，降低BUN含

4、量，增加糖元儲備，減少M(fèi)DA的堆積，增強(qiáng)SOD活力，以10 g/kg劑量效果最佳，大鼠在抗疲勞抗氧化主要指標(biāo)上也有相同的效果，以5 g/kg劑量效果最佳。
　　第二部分：研究發(fā)現(xiàn)筋骨草黃酮對DPPH自由基（ IC50=42.91μg/mL，最大清除率為88.57％）、ABTS自由基（IC50=44.61μg/mL，最大清除率為92.86%）的清除能力較好，對Fe3+的還原能力（AEAC＝5380μmol/g）比較強(qiáng)；筋骨草多糖對D

5、PPH自由基（ IC50=46.96μg/mL，最大清除率為84.44%）、ABTS自由基（IC50=49.56μg/mL，最大清除率為93.21%）的清除能力較好，對Fe3+的還原能力（AEAC＝3708μmol/g）比較強(qiáng)。
　　第三部分：研究表明得到從筋骨草中提取總黃酮的最佳工藝：藥材加30倍的70%乙醇，50℃超聲提取2次，每次30 min，野生筋骨草總黃酮提取率為4.78%，含量為47.82 mg/g；家種筋骨草總黃酮得

6、提取率為2.01%，含量為20.06 mg/g。多糖提取的最佳工藝：藥材加30倍的蒸餾水，80℃超聲提取3次，每次25 min，野生筋骨草多糖提取率為3.55%，含量為35.55 mg/g；家種筋骨草多糖提取率為2.05%,含量為20.50 mg/g。生物堿提取的最佳工藝：藥材加25倍的60%PH=1乙醇溶液，50℃水浴1 h后超聲15 min，野生筋骨草生物堿提取率為0.072%，含量為0.72 mg/g；家種筋骨草生物堿提取率為0.