纈草中環(huán)烯醚萜提取工藝優(yōu)化及抗氧化作用的研究.pdf

1、纈草為敗醬科纈草屬Valeriana植物,多年生草本,具有顯著的平滑肌解痙、增加冠脈流量、抗心律失常、抗腫瘤、鎮(zhèn)靜安神等作用,然而對(duì)纈草的研究多集中于功效研究及化學(xué)成分分析方面,尚未有對(duì)纈革中環(huán)烯醚萜類化合物進(jìn)行提取工藝優(yōu)化的研究。本文以寬葉纈草V.officinalis var.latifolia為原料,探討纈草中環(huán)烯醚萜類化合物超聲波萃取工藝和大孔樹(shù)脂純化纈草中環(huán)烯醚萜的最優(yōu)工藝,通過(guò)體外抗氧化活性評(píng)價(jià)試驗(yàn),研究探索纈草環(huán)烯醚萜提取

2、物清除自由基活性。研究結(jié)果如下:
　　 (1)寬葉纈草中環(huán)烯醚萜類化合物提取工藝優(yōu)化通過(guò)設(shè)計(jì)以甲醇濃度、超聲波功率、萃取時(shí)間、液料比為參試因子二次通用旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn),得到超聲波提取的數(shù)學(xué)模型方程:Y=1.63814+0.03575X1-0.02958X2-0.00958X3+0.02350X4-0.03433X12-0.04620X22-0.03920X32-0.032953X42-0.01000X1X3+0.01187X2X3,

3、并且通過(guò)數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)分析確定了寬葉纈草中提取環(huán)烯醚萜化合物最佳工藝條件:即濃度80％,超聲功率250 w,萃取時(shí)間5.5 min,液料比22:1,使其理論得率為1.66％。通過(guò)試驗(yàn)驗(yàn)證理論模型可靠,驗(yàn)證試驗(yàn)值為1.66％。
　　 (2)寬葉纈草中環(huán)烯醚萜類化合物大孔樹(shù)脂富集工藝優(yōu)化通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂型號(hào)優(yōu)選試驗(yàn)、D101大孔樹(shù)脂吸附環(huán)烯醚萜類化合物的上樣量試驗(yàn)與動(dòng)態(tài)洗脫試驗(yàn),確定D101樹(shù)脂吸附上樣濃度為10.0 mg/mL,上樣液的

4、pH=6.8,上樣體積為20.0 mL,洗脫體積為4 VB。通過(guò)二次通用旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)柱層析試驗(yàn),得到D101大孔吸附樹(shù)脂柱層析純化環(huán)烯醚萜類化合物的數(shù)學(xué)模型:Y=70.06392-3.69212X1-1.84568X2+6.43739X3-2.67725X12-3.16338X22-7.88863X32+2.35000X1X3-1.57000X2X3。經(jīng)過(guò)回歸分析以及方差分析,對(duì)方程進(jìn)行尋優(yōu)環(huán)D101大孔樹(shù)脂純化烯醚萜化合物最佳工藝

5、條件:上樣流速2.5 BV/h、洗脫流速1.7 BV/h和甲醇濃度75％,其純化后環(huán)烯醚萜純化物的得率為72.40％,通過(guò)試驗(yàn)驗(yàn)證理論模型可靠,驗(yàn)證試驗(yàn)值為72.12％。經(jīng)HPLC檢測(cè)環(huán)烯醚萜純化物純度可以達(dá)到46.70％。
　　 (3)纈草中環(huán)烯醚萜類化合物硅膠柱層析通過(guò)薄層層析和硅膠柱層析以及HPLC純度檢測(cè)試驗(yàn)研究得到氯仿:甲醇=7:1為常壓硅膠柱層析的洗脫溶劑比,對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物即可達(dá)到很好的分離,經(jīng)一次硅膠柱層析可以使經(jīng)大孔

6、吸附樹(shù)脂純化的環(huán)烯醚萜純化物的純度從46.70％提高到98％以上。由纈草三脂降解特征反應(yīng)及HPLC檢測(cè)技術(shù),可判定純化產(chǎn)物為纈草三脂。
　　 (4)纈草中環(huán)烯醚萜類化合物純化物抗氧化研究纈草中環(huán)烯醚萜純化物清除自由基試驗(yàn)顯示,纈草中環(huán)烯醚萜純化物對(duì)于DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥自由基等自由基都表現(xiàn)出較好的清除作用,清除效果依次為DPPH·＞O2·＞·OH。半清除率濃度(IC50)分別為1.33、1.45、2.07μg/m